核酸是遺傳和病理分析中必不可少的生物活性分子,核酸的檢測與確定對于癌癥的早期檢測和醫(yī)學(xué)診斷尤其必要。因此,本論文基于G-三鏈體和金屬有機(jī)框架材料構(gòu)建了幾種高靈敏的熒光生物傳感器用于檢測特定的DNA和miRNA。具體研究如下:1. 基于G-三鏈體的免酶免標(biāo)記的放大策略用于熒光檢測HIV-DNA基于G-三鏈體結(jié)構(gòu)和催化發(fā)夾自組裝放大(CHA)技術(shù),我們發(fā)展了一種HIV-DNA熒光檢測系統(tǒng)。發(fā)夾分子1(H1)可以充當(dāng)與HIV-DNA結(jié)合的觸發(fā)型的分子探針,它通過與目標(biāo)物雜交產(chǎn)生的G-三鏈體可以與硫黃素T(ThT)結(jié)合,從而使ThT的熒光信號顯著提高。該方法不僅具有良好的選擇性,而且具有較寬的線性范圍,檢測限為33 p M。此外,該方法不需要復(fù)雜的標(biāo)記且沒有酶的參與,實(shí)用且簡單。2. 基于金屬有機(jī)框架材料UiO-66-NH₂和三螺旋分子信標(biāo)的生物探針用于miRNA的熒光檢測在這項(xiàng)工作中,我們首先將DNA三螺旋分子通過共價(jià)作用與MOFs材料組裝成R2-MOFs復(fù)合物。在沒有miRNA-203的情況下,P1中修飾的染料FAM的熒光被MOFs材料猝滅,熒光信號降低。在miRNA...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 生物傳感技術(shù)的介紹
        1.1.1 生物傳感器的分類
        1.1.2 熒光生物傳感器的原理
        1.1.3 熒光生物傳感器的應(yīng)用
    1.2 G-三鏈體的研究
        1.2.1 G-四鏈體的介紹
        1.2.2 G-三鏈體的介紹
        1.2.3 G-三鏈體在光學(xué)生物探針中的應(yīng)用
    1.3 金屬有機(jī)框架材料的研究
        1.3.1 金屬有機(jī)框架材料的介紹
        1.3.2 金屬有機(jī)框架材料的制備
        1.3.3 基于金屬有機(jī)框架材料的熒光生物傳感器
    1.4 核酸的研究
        1.4.1 核酸及生物標(biāo)志物的介紹
        1.4.2 基于核酸探針檢測核酸的意義
    1.5 本論文的選題意義和主要研究內(nèi)容
第2章 基于G-三鏈體的免酶免標(biāo)記的放大策略用于熒光檢測HIV-DNA
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)序列與儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)序列
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 圓二色譜表征
        2.3.2 凝膠電泳表征
        2.3.3 熒光分析
        2.3.4 實(shí)際樣品分析
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 HIV-DNA檢測原理
        2.4.2 實(shí)驗(yàn)可行性
        2.4.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        2.4.4 方法的靈敏度和選擇性
        2.4.5 血清樣品中檢測HIV-DNA
    2.5 本章小結(jié)
第3章 基于金屬有機(jī)框架材料UiO-66-NH₂和三螺旋分子信標(biāo)的生物探針用于miRNA的熒光檢測
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)序列與儀器
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)序列
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 凝膠電泳表征
        3.3.2 UiO-66-NH₂的合成
        3.3.3 DNA/UiO-66-NH₂ 的合成
        3.3.4 熒光分析
        3.3.5 生物實(shí)際樣品分析
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 比率型檢測miRNA的原理和材料表征
        3.4.2 miRNA檢測的可行性分析
        3.4.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        3.4.4 靈敏度分析
        3.4.5 選擇性分析
        3.4.6 生物實(shí)際樣品檢測
    3.5 本章小結(jié)
第4章 基于金屬有機(jī)框架材料ZIF-8 的生物探針用于miRNA的比率型熒光放大檢測
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)序列與儀器
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)序列
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 凝膠電泳分析
        4.3.2 ZIF-8合成
        4.3.3 DNA/ZIF-8 制備
        4.3.4 熒光分析
        4.3.5 生物實(shí)際樣品分析
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 比率型檢測miRNA的設(shè)計(jì)及其原理
        4.4.2 MOFs材料的表征
        4.4.3 miRNA檢測的可行性
        4.4.4 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        4.4.5 靈敏度分析
        4.4.6 選擇性分析
        4.4.7 生物實(shí)際樣品檢測
    4.5 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及專利



本文編號：3873465