細(xì)胞內(nèi)許多的生物分子以及細(xì)胞器具有極其重要的生理功能,因而對(duì)于它們的識(shí)別和檢測(cè)十分重要。熒光探針檢測(cè)具有靈敏度高,特異性好等優(yōu)點(diǎn)。目前被廣泛應(yīng)用于生命系統(tǒng)中物質(zhì)的識(shí)別和檢測(cè)。香豆素類化合物是一類具有芳香氣味的天然產(chǎn)物,其母核結(jié)構(gòu)是苯并-α-吡喃酮,引入吸電子基團(tuán)而發(fā)出強(qiáng)烈的熒光。黃酮類化合物廣泛存在自然界某些植物中,結(jié)構(gòu)以苯并-γ-吡喃酮為母核。此衍生物很多具有分子內(nèi)質(zhì)子轉(zhuǎn)移效應(yīng)而導(dǎo)致其特殊的熒光性能。本論文以香豆素和黃酮為母體設(shè)計(jì)合成了兩類熒光探針分別應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)生物巰基的檢測(cè)和細(xì)胞內(nèi)線粒體的靶向標(biāo)記成像。用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)生物巰基的香豆素類熒光探針:本章以香豆素為母核,設(shè)計(jì)合成了三種熒光探針去檢測(cè)生物巰基,半胱氨酸(Cys),同型半胱氨酸(Hcy)和谷胱甘肽(GSH)。探針A以“二甲基吡喃丙二腈”為衍生物。原因是在香豆素的3位引入了二甲基吡喃丙二腈延長(zhǎng)了其共軛體系,波長(zhǎng)紅移至648 nm,具有很好的分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移效應(yīng),該探針與GSH、Cys呈現(xiàn)淬滅型熒光響應(yīng)模式。探針B為“苯硫酚-醛基”為衍生物,由于在香豆素4號(hào)位引入苯硫酚基團(tuán),其水溶性良好,并且探針B與GSH、Cys反應(yīng)分別在470...

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 緒論
    1.1 引言
    1.2 生物巰基的功能與熒光檢測(cè)
        1.2.1 生物巰基的功能
        1.2.2 生物巰基的熒光檢測(cè)
    1.3 香豆素及黃酮類熒光探針研究進(jìn)展
        1.3.1 基于香豆素母體的巰基熒光探針
        1.3.2 基于黃酮母體的熒光探針
    1.4 本文研究設(shè)想
2 香豆素類熒光探針的合成與性能研究
    2.1 引言
    2.2 探針分子設(shè)計(jì)
    2.3 實(shí)驗(yàn)部分
        2.3.1 儀器與試劑
        2.3.2 探針A的合成
        2.3.3 探針B、C的合成
        2.3.4 實(shí)驗(yàn)測(cè)試方法
        2.3.5 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)與熒光成像
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 探針的結(jié)構(gòu)與核磁共振氫譜分析
        2.4.2 探針A的紫外可見吸收光譜
        2.4.3 探針A的熒光光譜與性質(zhì)
        2.4.4 探針A對(duì)GSH、Cys的熒光響應(yīng)
        2.4.5 探針A的細(xì)胞成像
        2.4.6 探針B的紫外吸收光譜
        2.4.7 探針B與GSH、Cys/Hcy響應(yīng)的熒光光譜
        2.4.8 探針B對(duì)GSH和Cys濃度、時(shí)間的熒光檢測(cè)
        2.4.9 探針B與GSH、Cys的響應(yīng)機(jī)理
        2.4.10 探針B的特異性檢測(cè)
        2.4.11 探針B的細(xì)胞毒性與熒光成像
        2.4.12 探針C的紫外吸收光譜
        2.4.13 探針C對(duì)Cys、GSH和S^2-的熒光檢測(cè)
        2.4.14 探針C對(duì)Cys、GSH和S^2-的特異性
        2.4.15 探針C的細(xì)胞成像
    2.5 本章小結(jié)
3 黃酮類熒光探針的合成及性能研究
    3.1 引言
    3.2 探針分子設(shè)計(jì)
    3.3 實(shí)驗(yàn)部分
        3.3.1 儀器與試劑
        3.3.2 探針D的合成
        3.3.3 實(shí)驗(yàn)測(cè)試方法
        3.3.4 細(xì)胞培養(yǎng)與熒光成像
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 探針D的核磁共振氫譜
        3.4.2 探針D的紫外-可見吸收和熒光光譜
        3.4.3 探針D在不同溶劑中的熒光光譜
        3.4.4 探針D在不同pH下的光譜
        3.4.5 細(xì)胞內(nèi)線粒體熒光成像
    3.5 本章小結(jié)
4 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄



本文編號(hào)：3842351