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熒光碳點(diǎn)傳感器的構(gòu)建及其在酶活性檢測中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2023-04-25 05:39
  碳點(diǎn)(CDs)是一種具有分散性的碳納米顆粒,具有優(yōu)良的熒光性質(zhì)、良好的水溶性、穩(wěn)定性和生物相容性,以及無毒、環(huán)保、低成本等優(yōu)點(diǎn),近年來被廣泛應(yīng)用于材料學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域。生物酶與人體的許多疾病息息相關(guān),利用生物酶來進(jìn)行醫(yī)學(xué)診斷的研究越來越廣泛,而利用簡單快速的化學(xué)方法來檢測生物酶,為醫(yī)學(xué)疾病的診斷提供了新的思路和方法。在本課題中,我們在相對溫和的條件下合成熒光納米材料作為探針,以酶活性單元作為生物敏感單元,構(gòu)建對目標(biāo)分析物高選擇性的檢測器。1. 建立了由熒光聚多巴胺納米粒子(F-PDA)和羥基氧化鈷(Co OOH)納米片制備的新型F-PDA-Co OOH探針,用于測定α-葡萄糖苷酶的活性。巧妙地結(jié)合并利用了兩種納米材料之間的熒光能量共振轉(zhuǎn)移(FRET)效應(yīng),通過熒光“開啟”模式成功測定了α-葡萄糖苷酶活性。當(dāng)α-葡萄糖苷酶的活性在2-80 U/L之間與F-PDA的熒光強(qiáng)度具有良好的線性關(guān)系,檢測限低至1.65 U/L。該探針易于制備,具有良好的選擇性、靈敏度和準(zhǔn)確性,在人體血清樣品檢測中顯示出較好的適用性。2. 由對氨基苯酚和乙二胺在50℃加熱條件下,一步合成了熒光碳點(diǎn)(CDs...

【文章頁數(shù)】:130 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略語表
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 熒光碳點(diǎn)的簡介
        1.2.1 碳點(diǎn)的分類
        1.2.2 碳點(diǎn)的性質(zhì)
    1.3 熒光碳點(diǎn)的合成
        1.3.1 水熱法
        1.3.2 化學(xué)氧化法
        1.3.3 電化學(xué)法
    1.4 熒光碳點(diǎn)的應(yīng)用
        1.4.1 碳點(diǎn)在無機(jī)物檢測中的應(yīng)用
        1.4.2 碳點(diǎn)在有機(jī)小分子檢測中的應(yīng)用
        1.4.3 碳點(diǎn)在生物大分子檢測中的應(yīng)用
    1.5 本課題的研究意義及內(nèi)容
第二章 構(gòu)建F-PDA-Co OOH納米傳感器用于α-葡萄糖苷酶活性及其抑制劑的檢測
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.3 CoOOH納米片的制備及表征
        2.2.4 F-PDA納米粒子的制備及表征
        2.2.5 Co OOH與 F-PDA之間的猝滅效應(yīng)
        2.2.6 抗壞血酸的測定
        2.2.7 α-葡萄糖苷酶活性的測定
        2.2.8 阿卡波糖抑制率的測定
        2.2.9 傳感器的特異性測試
        2.2.10 人體血清樣品中α-葡萄糖苷酶活性的測定
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 CoOOH納米片的表征
        2.3.2 F-PDA納米粒子的表征
        2.3.3 Co OOH與 F-PDA的猝滅效應(yīng)機(jī)理探究
        2.3.4 抗壞血酸的檢測
        2.3.5 α-葡萄糖苷酶活性的定量檢測
        2.3.6 阿卡波糖抑制率的檢測
        2.3.7 傳感器的特異性
        2.3.8 人體血清樣品中的α-葡萄糖苷酶活性檢測
    2.4 本章小結(jié)
第三章 構(gòu)建碳點(diǎn)熒光納米探針用于NAG活性檢測及應(yīng)用
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.3 熒光碳點(diǎn)CDs的制備與表征
        3.2.4 熒光碳點(diǎn)CDs的量子產(chǎn)率測量
        3.2.5 NAG活性的測定
        3.2.6 傳感器的特異性測試
        3.2.7 NAG活性測定傳感器的應(yīng)用
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 熒光碳點(diǎn)CDs的表征
        3.3.2 基于內(nèi)濾波效應(yīng)的熒光猝滅機(jī)理
        3.3.3 NAG活性的定量檢測
        3.3.4 檢測方法的特異性
        3.3.5 NAG活性檢測在人體樣品中的應(yīng)用
    3.4 本章小結(jié)
第四章 構(gòu)建CDs-EPA熒光傳感器用于葡萄糖濃度檢測及應(yīng)用
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.2.3 熒光碳點(diǎn)CDs的制備與表征
        4.2.4 H2O2對EPA的氧化實(shí)驗(yàn)
        4.2.5 H2O2濃度的測定
        4.2.6 葡萄糖濃度的測定
        4.2.7 傳感器的特異性測試
        4.2.8 人體血清樣品中葡萄糖濃度的測定
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 熒光碳點(diǎn)CDs的表征
        4.3.2 H2O2對EPA的氧化實(shí)驗(yàn)
        4.3.3 熒光猝滅機(jī)理驗(yàn)證
        4.3.4 H2O2濃度的定量檢測
        4.3.5 葡萄糖濃度的定量檢測
        4.3.6 傳感器的特異性
        4.3.7 人體血清樣品中葡萄糖濃度的測定
    4.4 本章小結(jié)
第五章 構(gòu)建熒光納米碳點(diǎn)CDs傳感器用于酪氨酸酶活性和曲酸濃度的檢測及應(yīng)用
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        5.2.3 熒光碳點(diǎn)CDs的制備與表征
        5.2.4 檢測條件優(yōu)化選擇
        5.2.5 熒光探針的選擇性實(shí)驗(yàn)
        5.2.6 TYR活性的測定
        5.2.7 曲酸濃度的測定
        5.2.8 土豆和杏鮑菇中的TYR活性檢測
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 熒光碳點(diǎn)CDs的表征
        5.3.2 熒光碳點(diǎn)猝滅機(jī)理
        5.3.3 熒光探針的特異性
        5.3.4 TYR活性的檢測
        5.3.5 曲酸抑制率檢測
        5.3.6 TYR活性檢測的應(yīng)用
    5.4 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表論文
致謝



本文編號(hào):3800819

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