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核酸結(jié)構(gòu)修飾敏化的熒光配體結(jié)合特性及傳感應(yīng)用

發(fā)布時間:2023-03-12 05:42
  DNA寡核苷酸因其豐富的結(jié)構(gòu)多態(tài)性以及與熒光配體特異性結(jié)合的能力,成為開發(fā)傳感平臺的工具。核酸的修飾能改變其原有結(jié)構(gòu),有助于加強與熒光配體結(jié)合的親和力,對發(fā)展基于核酸結(jié)構(gòu)的熒光探針及傳感應(yīng)用具有重要意義。本論文選用金絲桃素(Hyp)和氯化兩面針堿(NIT)作為熒光配體,以極性反轉(zhuǎn)的G-四鏈體(G4)、配體誘導(dǎo)的平行雙鏈DNA(ps-DNA)等核酸結(jié)構(gòu)類型為研究對象。根據(jù)對熒光配體與修飾的核酸分子之間相互作用的研究,我們開發(fā)了一種基于DNA的能夠?qū)+有高耐受性的Ba2+傳感器,隨后又研制了一種基于DNA的平行超分子熒光納米組裝體。主要研究內(nèi)容如下:1、極性反轉(zhuǎn)敏化具有K+耐受性的G-四鏈體Ba2+傳感器由于環(huán)境中高含量的K+以及K+誘導(dǎo)的G4具有強穩(wěn)定性,所以在G4基礎(chǔ)上開發(fā)一種具有良好的K+耐受性且對其它金屬離子具有高選擇性的熒光傳感器是一個巨大的挑戰(zhàn)。在本工作中,我們發(fā)現(xiàn),即使在K+超過15000倍的情況下,...

【文章頁數(shù)】:108 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 G-四鏈體
        1.2.1 G-四鏈體簡介
        1.2.2 G-四鏈體的結(jié)構(gòu)
        1.2.3 G-四鏈體的生物學(xué)活性
        1.2.4 G-四鏈體的修飾方法
        1.2.5 G-四鏈體與配體相互作用的研究進展
        1.2.6 G-四鏈體作為傳感器的研究進展
    1.3 平行雙鏈DNA(ps-DNA)
        1.3.1 平行雙鏈DNA(ps-DNA)簡介
        1.3.2 平行雙鏈體(ps-DNA)的結(jié)構(gòu)
        1.3.3 平行雙鏈DNA(ps-DNA)與配體相互作用的研究進展
        1.3.4 平行雙鏈DNA(ps-DNA)在傳感器方面的應(yīng)用
    1.4 本課題的選題依據(jù)、研究內(nèi)容以及創(chuàng)新點
第二章 實驗用品及表征方法
    2.1 實驗所用的核酸序列
    2.2 實驗所用的試劑
    2.3 實驗所用的儀器設(shè)備
    2.4 實驗表征方法
        2.4.1 紫外可見吸收光譜
        2.4.2 熒光穩(wěn)態(tài)光譜
        2.4.3 暗箱式紫外透射儀
        2.4.4 DNA熔解實驗
        2.4.5 圓二色性光譜實驗
        2.4.6 等溫滴定量熱法的實驗測定
第三章 極性反轉(zhuǎn)敏化具有K+耐受性的G-四鏈體Ba2+傳感器
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 熒光光譜測定
        3.2.3 DNA熔解溫度(Tm)的測定
        3.2.4 圓二色性(CD)光譜測量
        3.2.5 等溫滴定量熱法測量
        3.2.6 樣品分析
    3.3 結(jié)果及討論
        3.3.1 Ba2+在點亮Hyp-G4 熒光和極性反轉(zhuǎn)敏化響應(yīng)中的特異性
        3.3.2 Ba2+與G4s的結(jié)合特異性的熱力學(xué)表征
        3.3.3 CD研究Ba(結(jié)合后的G4構(gòu)象
        3.3.4 Ba2+的選擇性實驗和樣品分析
    3.4 結(jié)論
第四章 配體誘導(dǎo)富T-DNA的自結(jié)構(gòu)化為平行的超分子熒光納米組裝體
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 熒光穩(wěn)態(tài)光譜測定
        4.2.3 DNA熔解溫度的測定
        4.2.4 圓二色性(CD)譜的測定
        4.2.5 等溫滴定量熱法的實驗測定
        4.2.6 AuNPs比色實驗的測定
    4.3 結(jié)果及討論
        4.3.1 探究配體誘導(dǎo)ployT組裝的能力
        4.3.2 分析NIT對 ploy T熱穩(wěn)定性的影響
        4.3.3 NIT與 ploy T組裝體結(jié)構(gòu)的分析
        4.3.4 探究NIT的發(fā)光機制
        4.3.5 鏈極性研究
        4.3.6 平行超分子熒光納米組裝體的調(diào)控
    4.4 結(jié)論
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果



本文編號:3761064

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