核酸結(jié)構(gòu)修飾敏化的熒光配體結(jié)合特性及傳感應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2023-03-12 05:42
DNA寡核苷酸因其豐富的結(jié)構(gòu)多態(tài)性以及與熒光配體特異性結(jié)合的能力,成為開(kāi)發(fā)傳感平臺(tái)的工具。核酸的修飾能改變其原有結(jié)構(gòu),有助于加強(qiáng)與熒光配體結(jié)合的親和力,對(duì)發(fā)展基于核酸結(jié)構(gòu)的熒光探針及傳感應(yīng)用具有重要意義。本論文選用金絲桃素(Hyp)和氯化兩面針堿(NIT)作為熒光配體,以極性反轉(zhuǎn)的G-四鏈體(G4)、配體誘導(dǎo)的平行雙鏈DNA(ps-DNA)等核酸結(jié)構(gòu)類型為研究對(duì)象。根據(jù)對(duì)熒光配體與修飾的核酸分子之間相互作用的研究,我們開(kāi)發(fā)了一種基于DNA的能夠?qū)+有高耐受性的Ba2+傳感器,隨后又研制了一種基于DNA的平行超分子熒光納米組裝體。主要研究?jī)?nèi)容如下:1、極性反轉(zhuǎn)敏化具有K+耐受性的G-四鏈體Ba2+傳感器由于環(huán)境中高含量的K+以及K+誘導(dǎo)的G4具有強(qiáng)穩(wěn)定性,所以在G4基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)一種具有良好的K+耐受性且對(duì)其它金屬離子具有高選擇性的熒光傳感器是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)。在本工作中,我們發(fā)現(xiàn),即使在K+超過(guò)15000倍的情況下,...
【文章頁(yè)數(shù)】:108 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
1.1 引言
1.2 G-四鏈體
1.2.1 G-四鏈體簡(jiǎn)介
1.2.2 G-四鏈體的結(jié)構(gòu)
1.2.3 G-四鏈體的生物學(xué)活性
1.2.4 G-四鏈體的修飾方法
1.2.5 G-四鏈體與配體相互作用的研究進(jìn)展
1.2.6 G-四鏈體作為傳感器的研究進(jìn)展
1.3 平行雙鏈DNA(ps-DNA)
1.3.1 平行雙鏈DNA(ps-DNA)簡(jiǎn)介
1.3.2 平行雙鏈體(ps-DNA)的結(jié)構(gòu)
1.3.3 平行雙鏈DNA(ps-DNA)與配體相互作用的研究進(jìn)展
1.3.4 平行雙鏈DNA(ps-DNA)在傳感器方面的應(yīng)用
1.4 本課題的選題依據(jù)、研究?jī)?nèi)容以及創(chuàng)新點(diǎn)
第二章 實(shí)驗(yàn)用品及表征方法
2.1 實(shí)驗(yàn)所用的核酸序列
2.2 實(shí)驗(yàn)所用的試劑
2.3 實(shí)驗(yàn)所用的儀器設(shè)備
2.4 實(shí)驗(yàn)表征方法
2.4.1 紫外可見(jiàn)吸收光譜
2.4.2 熒光穩(wěn)態(tài)光譜
2.4.3 暗箱式紫外透射儀
2.4.4 DNA熔解實(shí)驗(yàn)
2.4.5 圓二色性光譜實(shí)驗(yàn)
2.4.6 等溫滴定量熱法的實(shí)驗(yàn)測(cè)定
第三章 極性反轉(zhuǎn)敏化具有K+耐受性的G-四鏈體Ba2+傳感器
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)部分
3.2.1 材料與試劑
3.2.2 熒光光譜測(cè)定
3.2.3 DNA熔解溫度(Tm)的測(cè)定
3.2.4 圓二色性(CD)光譜測(cè)量
3.2.5 等溫滴定量熱法測(cè)量
3.2.6 樣品分析
3.3 結(jié)果及討論
3.3.1 Ba2+在點(diǎn)亮Hyp-G4 熒光和極性反轉(zhuǎn)敏化響應(yīng)中的特異性
3.3.2 Ba2+與G4s的結(jié)合特異性的熱力學(xué)表征
3.3.3 CD研究Ba(結(jié)合后的G4構(gòu)象
3.3.4 Ba2+的選擇性實(shí)驗(yàn)和樣品分析
3.4 結(jié)論
第四章 配體誘導(dǎo)富T-DNA的自結(jié)構(gòu)化為平行的超分子熒光納米組裝體
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)部分
4.2.1 材料與試劑
4.2.2 熒光穩(wěn)態(tài)光譜測(cè)定
4.2.3 DNA熔解溫度的測(cè)定
4.2.4 圓二色性(CD)譜的測(cè)定
4.2.5 等溫滴定量熱法的實(shí)驗(yàn)測(cè)定
4.2.6 AuNPs比色實(shí)驗(yàn)的測(cè)定
4.3 結(jié)果及討論
4.3.1 探究配體誘導(dǎo)ployT組裝的能力
4.3.2 分析NIT對(duì) ploy T熱穩(wěn)定性的影響
4.3.3 NIT與 ploy T組裝體結(jié)構(gòu)的分析
4.3.4 探究NIT的發(fā)光機(jī)制
4.3.5 鏈極性研究
4.3.6 平行超分子熒光納米組裝體的調(diào)控
4.4 結(jié)論
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
本文編號(hào):3761064
【文章頁(yè)數(shù)】:108 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
1.1 引言
1.2 G-四鏈體
1.2.1 G-四鏈體簡(jiǎn)介
1.2.2 G-四鏈體的結(jié)構(gòu)
1.2.3 G-四鏈體的生物學(xué)活性
1.2.4 G-四鏈體的修飾方法
1.2.5 G-四鏈體與配體相互作用的研究進(jìn)展
1.2.6 G-四鏈體作為傳感器的研究進(jìn)展
1.3 平行雙鏈DNA(ps-DNA)
1.3.1 平行雙鏈DNA(ps-DNA)簡(jiǎn)介
1.3.2 平行雙鏈體(ps-DNA)的結(jié)構(gòu)
1.3.3 平行雙鏈DNA(ps-DNA)與配體相互作用的研究進(jìn)展
1.3.4 平行雙鏈DNA(ps-DNA)在傳感器方面的應(yīng)用
1.4 本課題的選題依據(jù)、研究?jī)?nèi)容以及創(chuàng)新點(diǎn)
第二章 實(shí)驗(yàn)用品及表征方法
2.1 實(shí)驗(yàn)所用的核酸序列
2.2 實(shí)驗(yàn)所用的試劑
2.3 實(shí)驗(yàn)所用的儀器設(shè)備
2.4 實(shí)驗(yàn)表征方法
2.4.1 紫外可見(jiàn)吸收光譜
2.4.2 熒光穩(wěn)態(tài)光譜
2.4.3 暗箱式紫外透射儀
2.4.4 DNA熔解實(shí)驗(yàn)
2.4.5 圓二色性光譜實(shí)驗(yàn)
2.4.6 等溫滴定量熱法的實(shí)驗(yàn)測(cè)定
第三章 極性反轉(zhuǎn)敏化具有K+耐受性的G-四鏈體Ba2+傳感器
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)部分
3.2.1 材料與試劑
3.2.2 熒光光譜測(cè)定
3.2.3 DNA熔解溫度(Tm)的測(cè)定
3.2.4 圓二色性(CD)光譜測(cè)量
3.2.5 等溫滴定量熱法測(cè)量
3.2.6 樣品分析
3.3 結(jié)果及討論
3.3.1 Ba2+在點(diǎn)亮Hyp-G4 熒光和極性反轉(zhuǎn)敏化響應(yīng)中的特異性
3.3.2 Ba2+與G4s的結(jié)合特異性的熱力學(xué)表征
3.3.3 CD研究Ba(結(jié)合后的G4構(gòu)象
3.3.4 Ba2+的選擇性實(shí)驗(yàn)和樣品分析
3.4 結(jié)論
第四章 配體誘導(dǎo)富T-DNA的自結(jié)構(gòu)化為平行的超分子熒光納米組裝體
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)部分
4.2.1 材料與試劑
4.2.2 熒光穩(wěn)態(tài)光譜測(cè)定
4.2.3 DNA熔解溫度的測(cè)定
4.2.4 圓二色性(CD)譜的測(cè)定
4.2.5 等溫滴定量熱法的實(shí)驗(yàn)測(cè)定
4.2.6 AuNPs比色實(shí)驗(yàn)的測(cè)定
4.3 結(jié)果及討論
4.3.1 探究配體誘導(dǎo)ployT組裝的能力
4.3.2 分析NIT對(duì) ploy T熱穩(wěn)定性的影響
4.3.3 NIT與 ploy T組裝體結(jié)構(gòu)的分析
4.3.4 探究NIT的發(fā)光機(jī)制
4.3.5 鏈極性研究
4.3.6 平行超分子熒光納米組裝體的調(diào)控
4.4 結(jié)論
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
本文編號(hào):3761064
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