基于衍生化與電位傳感的氨基酸檢測(cè)方法
發(fā)布時(shí)間:2022-10-19 11:12
氨基酸廣泛分布于各種生物體液,參與各種各樣的生物過程。生物體液及組織中氨基酸的種類和含量是診斷代謝疾病的重要指標(biāo)。同時(shí)食品中氨基酸的含量與種類也會(huì)影響食品的口感、芳香性及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。氨基酸的檢測(cè)一直是人們研究的熱點(diǎn),目前現(xiàn)有的氨基酸檢測(cè)方法都有一些不足,例如分析成本高、檢測(cè)限高與測(cè)試速度慢等,因此開發(fā)新的低成本的氨基酸檢測(cè)方法就迫在眉睫。本文針對(duì)氨基酸分子的特點(diǎn),開發(fā)基于衍生化與電位傳感兩種氨基酸的檢測(cè)方法,具體內(nèi)容如下:(1)由于大部分氨基酸無紫外吸收且極性很大,因此在紫外檢測(cè)模式下必須對(duì)其進(jìn)行衍生化。以異硫氰酸苯酯作為衍生試劑對(duì)氨基酸進(jìn)行化學(xué)衍生,研究了色譜柱類型、流動(dòng)相組成與檢測(cè)波長(zhǎng)等色譜條件對(duì)不同氨基酸衍生物分離分析的影響。結(jié)果表明,采用C18色譜柱,以乙腈與0.1 mol/L的醋酸鈉作為流動(dòng)相,在254 nm的檢測(cè)波長(zhǎng)下各氨基酸衍生物均能得到較好的分離。對(duì)上述建立的方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證,結(jié)果表明,氨基酸衍生物峰面積與氨基酸濃度之間呈線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)均大于0.99,日內(nèi)與日間精密度在1.26%-6.66%之間,加標(biāo)回收率在在80.14%-111.85%之間,均符合方法學(xué)驗(yàn)證的要求...
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 引言
1.2 紫外檢測(cè)
1.2.1 無衍生化的紫外檢測(cè)
1.2.2 衍生化的紫外檢測(cè)
1.3 熒光檢測(cè)
1.4 質(zhì)譜檢測(cè)
1.4.1 反相色譜-質(zhì)譜法
1.4.2 親水作用色譜-質(zhì)譜法
1.5 氣相色譜法
1.6 蒸發(fā)光散射檢測(cè)
1.7 電化學(xué)檢測(cè)
1.8 微流控芯片
1.9 主要內(nèi)容與研究思路
2 苯異硫氰酸酯柱前衍生化檢測(cè)氨基酸
2.1 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 溶液的配制
2.2.2 衍生方法
2.2.3 水解方法
2.2.4 色譜條件
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 水解方法的選擇
2.3.2 衍生方法的選擇
2.3.3 色譜柱的選擇
2.3.4 梯度洗脫程序的選擇
2.3.5 紫外檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇
2.3.6 精密度
2.3.7 回收率
2.4 枸杞中全氨基酸的測(cè)定
2.4.1 枸杞樣品的分析
2.5 本章小結(jié)
3 枸杞中游離氨基酸含量的測(cè)定
3.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 溶液的配制
3.2.2 衍生方法
3.2.3 游離氨基酸提取方法
3.2.4 色譜條件
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 游離氨基酸提取方法的選擇
3.3.2 提取溫度的篩選
3.3.3 提取溶劑組成的篩選
3.3.4 料液比的選擇
3.4 枸杞樣品分析
3.5 色譜峰的識(shí)別
3.6 本章小結(jié)
4 基于電位傳感的氨基酸電化學(xué)檢測(cè)
4.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
4.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
4.2 檢測(cè)原理
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 溶液配制
4.3.2 離子選擇性膜的制備
4.3.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.4 結(jié)果與討論
4.4.1 電極的能斯特響應(yīng)
4.4.2 電極的重現(xiàn)性
4.4.3 內(nèi)充液濃度的選擇
4.4.4 緩沖液濃度的選擇
4.4.5 有機(jī)相比例的篩選
4.5 氨基酸的檢測(cè)
4.6 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝
本文編號(hào):3693261
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 引言
1.2 紫外檢測(cè)
1.2.1 無衍生化的紫外檢測(cè)
1.2.2 衍生化的紫外檢測(cè)
1.3 熒光檢測(cè)
1.4 質(zhì)譜檢測(cè)
1.4.1 反相色譜-質(zhì)譜法
1.4.2 親水作用色譜-質(zhì)譜法
1.5 氣相色譜法
1.6 蒸發(fā)光散射檢測(cè)
1.7 電化學(xué)檢測(cè)
1.8 微流控芯片
1.9 主要內(nèi)容與研究思路
2 苯異硫氰酸酯柱前衍生化檢測(cè)氨基酸
2.1 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 溶液的配制
2.2.2 衍生方法
2.2.3 水解方法
2.2.4 色譜條件
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 水解方法的選擇
2.3.2 衍生方法的選擇
2.3.3 色譜柱的選擇
2.3.4 梯度洗脫程序的選擇
2.3.5 紫外檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇
2.3.6 精密度
2.3.7 回收率
2.4 枸杞中全氨基酸的測(cè)定
2.4.1 枸杞樣品的分析
2.5 本章小結(jié)
3 枸杞中游離氨基酸含量的測(cè)定
3.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 溶液的配制
3.2.2 衍生方法
3.2.3 游離氨基酸提取方法
3.2.4 色譜條件
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 游離氨基酸提取方法的選擇
3.3.2 提取溫度的篩選
3.3.3 提取溶劑組成的篩選
3.3.4 料液比的選擇
3.4 枸杞樣品分析
3.5 色譜峰的識(shí)別
3.6 本章小結(jié)
4 基于電位傳感的氨基酸電化學(xué)檢測(cè)
4.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
4.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
4.2 檢測(cè)原理
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 溶液配制
4.3.2 離子選擇性膜的制備
4.3.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.4 結(jié)果與討論
4.4.1 電極的能斯特響應(yīng)
4.4.2 電極的重現(xiàn)性
4.4.3 內(nèi)充液濃度的選擇
4.4.4 緩沖液濃度的選擇
4.4.5 有機(jī)相比例的篩選
4.5 氨基酸的檢測(cè)
4.6 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝
本文編號(hào):3693261
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