氨基酸廣泛分布于各種生物體液,參與各種各樣的生物過程。生物體液及組織中氨基酸的種類和含量是診斷代謝疾病的重要指標。同時食品中氨基酸的含量與種類也會影響食品的口感、芳香性及營養(yǎng)價值。氨基酸的檢測一直是人們研究的熱點,目前現有的氨基酸檢測方法都有一些不足,例如分析成本高、檢測限高與測試速度慢等,因此開發(fā)新的低成本的氨基酸檢測方法就迫在眉睫。本文針對氨基酸分子的特點,開發(fā)基于衍生化與電位傳感兩種氨基酸的檢測方法,具體內容如下:（1）由于大部分氨基酸無紫外吸收且極性很大,因此在紫外檢測模式下必須對其進行衍生化。以異硫氰酸苯酯作為衍生試劑對氨基酸進行化學衍生,研究了色譜柱類型、流動相組成與檢測波長等色譜條件對不同氨基酸衍生物分離分析的影響。結果表明,采用C18色譜柱,以乙腈與0.1 mol/L的醋酸鈉作為流動相,在254 nm的檢測波長下各氨基酸衍生物均能得到較好的分離。對上述建立的方法進行方法學驗證,結果表明,氨基酸衍生物峰面積與氨基酸濃度之間呈線性關系,相關系數均大于0.99,日內與日間精密度在1.26%-6.66%之間,加標回收率在在80.14%-111.85%之間,均符合方法學驗證的要求... 

【文章頁數】：81 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 引言
    1.2 紫外檢測
        1.2.1 無衍生化的紫外檢測
        1.2.2 衍生化的紫外檢測
    1.3 熒光檢測
    1.4 質譜檢測
        1.4.1 反相色譜-質譜法
        1.4.2 親水作用色譜-質譜法
    1.5 氣相色譜法
    1.6 蒸發(fā)光散射檢測
    1.7 電化學檢測
    1.8 微流控芯片
    1.9 主要內容與研究思路
2 苯異硫氰酸酯柱前衍生化檢測氨基酸
    2.1 實驗試劑及儀器
        2.1.1 實驗儀器
        2.1.2 實驗試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 溶液的配制
        2.2.2 衍生方法
        2.2.3 水解方法
        2.2.4 色譜條件
    2.3 結果與討論
        2.3.1 水解方法的選擇
        2.3.2 衍生方法的選擇
        2.3.3 色譜柱的選擇
        2.3.4 梯度洗脫程序的選擇
        2.3.5 紫外檢測波長的選擇
        2.3.6 精密度
        2.3.7 回收率
    2.4 枸杞中全氨基酸的測定
        2.4.1 枸杞樣品的分析
    2.5 本章小結
3 枸杞中游離氨基酸含量的測定
    3.1 實驗儀器及試劑
        3.1.1 實驗儀器
        3.1.2 實驗試劑
    3.2 實驗方法
        3.2.1 溶液的配制
        3.2.2 衍生方法
        3.2.3 游離氨基酸提取方法
        3.2.4 色譜條件
    3.3 結果與討論
        3.3.1 游離氨基酸提取方法的選擇
        3.3.2 提取溫度的篩選
        3.3.3 提取溶劑組成的篩選
        3.3.4 料液比的選擇
    3.4 枸杞樣品分析
    3.5 色譜峰的識別
    3.6 本章小結
4 基于電位傳感的氨基酸電化學檢測
    4.1 實驗試劑與儀器
        4.1.1 實驗試劑
        4.1.2 實驗儀器
    4.2 檢測原理
    4.3 實驗方法
        4.3.1 溶液配制
        4.3.2 離子選擇性膜的制備
        4.3.3 實驗方法
    4.4 結果與討論
        4.4.1 電極的能斯特響應
        4.4.2 電極的重現性
        4.4.3 內充液濃度的選擇
        4.4.4 緩沖液濃度的選擇
        4.4.5 有機相比例的篩選
    4.5 氨基酸的檢測
    4.6 本章小結
結論
參考文獻
攻讀碩士學位期間發(fā)表學術論文情況
致謝



本文編號：3693261