由于生物學(xué)反應(yīng)的復(fù)雜性,傳統(tǒng)的體相檢測技術(shù)可以檢測到反應(yīng)過程的總體變化,但很難對(duì)生物反應(yīng)的分子過程和瞬時(shí)狀態(tài)進(jìn)行直觀的檢測。近些年來興起并逐漸成熟的單分子技術(shù)包括單分子熒光共振能量轉(zhuǎn)移、磁鑷等提高了人們實(shí)時(shí)研究生物大分子行為和機(jī)理的能力;本文利用體相和單分子熒光技術(shù)研究蛋白質(zhì)和DNA相互作用過程和機(jī)制,我們可以全面地了解到生物反應(yīng)的過程,極大地增強(qiáng)了人們理解復(fù)雜生命過程的能力。含有鐵-硫團(tuán)簇大腸桿菌的Din G蛋白（Ec Din G）能夠使Cy3熒光染料發(fā)生淬滅,但具體機(jī)理不太清楚。通過加入氧化劑過氧化氫、還原劑DTT探究鐵-硫團(tuán)簇和Cy3之間可能發(fā)生的電子轉(zhuǎn)移,證明了Cy3淬滅可作為研究解旋酶與DNA具體運(yùn)動(dòng)的特異性和靈敏探針。核酸是遺傳信息的載體,由脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）組成,已知所有生物體的生命活動(dòng)都離不開核酸的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制、翻譯等一系列反應(yīng),而這其中需要解旋酶打開核酸間的氫鍵。一旦解旋過程出現(xiàn)問題,生物體將出現(xiàn)疾病而不能正常生存,因此研究和理解解旋酶解旋不同核酸結(jié)構(gòu)的解旋行為和潛在的機(jī)制尤為重要。細(xì)胞在受到外部條件干擾時(shí),核酸結(jié)構(gòu)很容易遭到破壞。耐輻射奇球菌具... 

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 解旋酶
        1.2.1 解旋酶簡介
        1.2.2 解旋酶性質(zhì)
    1.3 DNA熒光修飾
    1.4 G4結(jié)構(gòu)DNA
        1.4.1 G4結(jié)構(gòu)DNA的研究方法
    1.5 選題背景與科學(xué)意義
    參考文獻(xiàn)
第二章 實(shí)驗(yàn)技術(shù)與方法
    2.1 引言
    2.2 熒光和熒光壽命測試
    2.3 全內(nèi)反射熒光顯微鏡
        2.3.1 全內(nèi)反射熒光顯微鏡基本原理
        2.3.2 全內(nèi)反射熒光顯微鏡基本應(yīng)用
    2.4 磁性鑷子
    2.5 FRET技術(shù)
    參考文獻(xiàn)
第三章 FeS團(tuán)簇與熒光標(biāo)記DNA相互作用光學(xué)性質(zhì)的研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
        3.2.1 DNA底物的制備
    3.3 實(shí)驗(yàn)過程
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.5 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第四章 DrRecD2蛋白對(duì)DNA解旋行為機(jī)制的研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
        4.2.1 反應(yīng)小室的制備
        4.2.2 蛋白質(zhì)表達(dá)和純化
        4.2.3 DNA制備
    4.3 實(shí)驗(yàn)過程
        4.3.1 單分子熒光共振能量轉(zhuǎn)移數(shù)據(jù)采集
        4.3.2 磁鑷數(shù)據(jù)采集
        4.3.3 圓二色性(CD)的表征
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 DrRecD2解旋較短鏈長DNA
        4.4.2 DrRecD2解旋較長鏈長DNA
        4.4.3 DrRecD2解旋G4結(jié)構(gòu)DNA
    4.5 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第五章 工作總結(jié)與展望
縮略詞表
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
致謝



本文編號(hào)：3652335