本文關(guān)鍵詞：新型檢測重金屬汞、鉛離子的生物傳感器研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：重金屬在現(xiàn)代工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥等領(lǐng)域有著普遍的應(yīng)用。隨著科技的迅猛發(fā)展,重金屬的污染問題也越來越嚴(yán)重。重金屬不容易被降解,只能由一種形態(tài)轉(zhuǎn)化為另一種形態(tài),最終在人體內(nèi)聚集,危害人類身體健康。因此,對環(huán)境和農(nóng)產(chǎn)品中的重金屬殘留進行檢測是尤為重要的。本文對常見的重金屬汞、鉛離子,設(shè)計了幾種檢測的新方法,以滿足日常生活中對重金屬檢測的需求。工作重點主要涉及以下幾個方面:1、基于T-Hg2+-T結(jié)構(gòu)的熒光傳感器特異性檢測汞離子在第二章中,基于實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-q PCR)技術(shù)與T-Hg2+-T特異性結(jié)合作用,提出了一個高靈敏度和高選擇性檢測汞離子的新方法。利用實時熒光定量PCR對于模板DNA的特異性擴增產(chǎn)生的熒光信號作為檢測信號。該傳感體系Hg2+離子濃度在0.05 n M到100 n M范圍內(nèi),Hg2+離子的濃度與Ct值有很好的線性關(guān)系,該方法Hg2+離子的檢測限為30 p M。此方法還具有良好的選擇性,可以應(yīng)用于水溶液或其它樣品中Hg2+離子的檢測。2、基于GR-5 DNA酶的鉛離子檢測新方法在第三章中,我們介紹一個檢測鉛離子的簡便方法,該方法是利用對鉛離子特異性識別的GR-5 DNA酶和實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)實現(xiàn)對鉛離子的準(zhǔn)確檢測。在鉛離子存在的情況下,模板DNA將會被GR-5 DNA酶在核糖核苷酸處切斷,可用于PCR的模板DNA的數(shù)量也會降低,同時檢測結(jié)果Ct值也會發(fā)生改變。在1-500 n M范圍內(nèi)鉛離子的濃度與Ct值有很好的線性關(guān)系。標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)為0.99,檢測限是0.7 n M。此外,該方法具有很好的選擇性。3、基于核酸外切酶Ⅲ的熒光分析法超靈敏檢測汞離子在第四章中,我們基于實時熒光定量PCR的指數(shù)式擴增和定量效應(yīng),結(jié)合核酸外切酶Ⅲ能夠剪切3'端閉合的雙鏈DNA,開發(fā)一種簡單、快速地檢測汞離子的新型生物傳感器,檢測水中的汞離子的含量。在汞離子存在的情況下,模板DNA與互補DNA會通過T-Hg2+-T特異性結(jié)合作用形成3'端閉合的雙鏈DNA,在核酸外切酶Ⅲ的作用下,模板DNA被剪斷。通過加入汞離子的數(shù)量影響用于擴增的模板DNA的數(shù)量,最終通過實時熒光定量PCR的實驗結(jié)果Ct值反映出來,實現(xiàn)對水溶液中汞離子的濃度定量分析。汞離子檢測的線性范圍為0.05-20n M,檢測限為0.03 n M。實際樣品添加實驗中,汞離子的回收率在94%-105%之間,標(biāo)準(zhǔn)差小于4.65%,可以用于水樣品中汞離子濃度的檢測。
【關(guān)鍵詞】：汞離子 鉛離子 核酸外切酶Ⅲ T-Hg2+-T GR-5 DNA酶 Ct值
【學(xué)位授予單位】：中國礦業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：O657.3;TP212
【目錄】：

• 致謝4-5
• 摘要5-6
• Abstract6-16
• 變量注釋表16-17
• 1 緒論17-27
• 1.1 重金屬的污染17-18
• 1.2 儀器方法18-19
• 1.3 核酸適配體在重金屬檢測中的應(yīng)用19-25
• 1.4 本論文研究的目的及意義25-27
• 2 基于T-Hg~(2+)-T結(jié)構(gòu)的熒光傳感器特異性檢測汞離子27-40
• 2.1 引言27-28
• 2.2 實驗部分28-30
• 2.3 結(jié)果與討論30-39
• 2.4 本章小結(jié)39-40
• 3 基于GR-5 DNA酶的鉛離子檢測新方法40-53
• 3.1 引言40-41
• 3.2 實驗部分41-43
• 3.3 結(jié)果與討論43-52
• 3.4 本章小結(jié)52-53
• 4 基于核酸外切酶Ⅲ的熒光分析法超靈敏檢測汞離子53-64
• 4.1 引言53
• 4.2 實驗部分53-56
• 4.3 結(jié)果與討論56-63
• 4.4 本章小結(jié)63-64
• 5 總結(jié)與展望64-66
• 5.1 總結(jié)64-65
• 5.2 展望65-66
• 參考文獻66-72
• 作者簡歷72-75
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集75

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 葉存玲,樊靜,馮素玲,黃曉意;流動注射催化光度法測定香煙中汞(Ⅱ)[J];分析化學(xué);2000年09期

2 萬益群,劉江磷,陳衛(wèi)玲;新型固相分光光度法測定茶葉中痕量錳的研究[J];分析科學(xué)學(xué)報;2000年05期

3 朱桃玉;鄭艷明;羅海英;彭榮飛;郭新東;吳玉鑾;;電感耦合等離子體質(zhì)譜法測定食品接觸材料中可溶性鉛、鎘、砷、汞[J];現(xiàn)代食品科技;2008年08期

4 汪曉冬;齊紅革;;微波消解-電感耦合等離子質(zhì)譜法檢測葡萄酒中重金屬[J];食品研究與開發(fā);2010年08期

5 戴潔;瞿建國;;鉛的電感耦合等離子體質(zhì)譜分析[J];現(xiàn)代科學(xué)儀器;2008年05期

6 杭雅娟;王軍;李世雨;申磊;;電感耦合等離子體-質(zhì)譜法測定番茄醬中多種重金屬元素含量[J];現(xiàn)代儀器;2011年05期

7 趙曦曦;羅勇;張立科;趙飛;;介孔分子篩富集紫外可見法測定廢水中重金屬汞[J];許昌學(xué)院學(xué)報;2013年02期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 楊娟;濁點萃取與紫外—可見分光光度法聯(lián)用在銅離子測定中的應(yīng)用[D];華中師范大學(xué);2008年

2 常_g;固相光度法檢測食品中微量鎘的研究[D];天津科技大學(xué);2008年

3 崔明慧;銅（Ⅱ）離子紫外可見化學(xué)傳感器的研制及性質(zhì)研究[D];吉林大學(xué);2014年

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本文編號：359484