氨基酸作為一種重要的生命物質(zhì),廣泛存在于生物體內(nèi),同時(shí)氨基酸還是各種食品中不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),影響著這些產(chǎn)品的味道、香氣和顏色,并且具有很復(fù)雜的生物學(xué)功能,然而,一些食品添加劑、防腐劑以及食品包裝材料的使用導(dǎo)致了在食品中出現(xiàn)了多種具有致癌性質(zhì)的氨基污染物,因此開(kāi)發(fā)高靈敏度且高選擇性的分析方法監(jiān)測(cè)這些物質(zhì)對(duì)于研究食品與人體健康之間的關(guān)系是至關(guān)重要的。高效液相色譜技術(shù)因其分辨率高,靈敏度高,通用性強(qiáng)和樣品處理簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)一直是食品與衛(wèi)生安全領(lǐng)域分析中最常用的檢測(cè)技術(shù)之一,而受限于多數(shù)氨基化合物沒(méi)有發(fā)光性質(zhì),開(kāi)發(fā)高靈敏度的標(biāo)記試劑一直是研究的重中之重,另外,食品中氨基化合物的復(fù)雜性和多樣性也對(duì)不同氨基化合物的選擇性檢測(cè)提出了更高的要求。本研究的重點(diǎn)在于設(shè)計(jì)與合成新型的熒光試劑用于標(biāo)記氨基化合物并開(kāi)發(fā)選擇性強(qiáng),靈敏度高的分析方法用于食品中不同氨基化合物的檢測(cè),具體內(nèi)容如下:第一章:簡(jiǎn)述了食品中常見(jiàn)的氨基化合物,氨基化合物常用的分析技術(shù),用于標(biāo)記氨基的衍生化試劑的研究現(xiàn)狀,選題意義及本論文主要工作。第二章:設(shè)計(jì)與合成了新型的熒光標(biāo)記試劑4-（咔唑-9-基）-芐基氯甲酸酯（CBBC-Cl）并進(jìn)行了結(jié)... 

【文章來(lái)源】：曲阜師范大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

-（咔唑-9-基）-芐基氯甲酸酯（CBBC-Cl）的合成路線(xiàn)圖

第2章新型熒光標(biāo)記試劑CBBC-Cl用于茶葉中氨基酸的高效液相色譜分析硼酸鹽緩沖液中，并通過(guò)0.45μm尼龍過(guò)濾器過(guò)濾，最后用硼酸鹽緩沖液將濃度稀釋至1.0μg/mL，并將其置于4°C的冰箱中以待分析。2.2.6衍生化反應(yīng)衍生化反應(yīng)如圖2-2所示，反應(yīng)在乙腈/水（1：1）堿性介質(zhì)溶液中進(jìn)行，簡(jiǎn)而言之，將20μL氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，200μL硼酸鹽緩沖液，50μL衍生試劑溶液和200μL乙腈依次加入2mL安瓿瓶中，將小瓶密封并振蕩30s，以使混合物在室溫下反應(yīng)6min，最后通過(guò)添加30μL淬滅劑終止衍生化反應(yīng)，在通過(guò)0.45μm尼龍膜過(guò)濾后，將樣品直接（10μL）注入儀器中進(jìn)行HPLC-FLD分析。圖2-2CBBC-Cl與氨基酸的衍生化程序：（a）單取代；（b）雙取代2.2.7色譜質(zhì)譜參數(shù)表2-1流動(dòng)相組成及梯度洗脫程序時(shí)間流動(dòng)相A%流動(dòng)相B%流動(dòng)相C%流動(dòng)相D%065350010604000204555002817830028.51708303600100037009010420080205000010055000100流動(dòng)相A為ACN/H2O（35/65）含有20mmol醋酸鹽緩沖液（pH3.7）流動(dòng)相A為ACN/H2O（60/40）含有20mmol醋酸鹽緩沖液（pH3.7）流動(dòng)相C為ACN/H2O（60/40）；流動(dòng)相D為100%ACN在反相HypersilBDS-C18色譜柱（250×4.6mm，5μm，Agilent）上于30°C以1.0mL/min的流速進(jìn)行色譜分離，流動(dòng)相和梯度洗脫程序見(jiàn)表2-1，熒光波長(zhǎng)設(shè)置為λex/λem10

第2章新型熒光標(biāo)記試劑CBBC-Cl用于茶葉中氨基酸的高效液相色譜分析＝292/370nm。MS參數(shù)如下：霧化器壓力：60psi，干氣溫度：350°C，干氣流：5.0L/min，ESI蒸氣溫度：350°C，電暈電流：4000nA，毛細(xì)電壓：3500V。2.3結(jié)果與討論2.3.14-（咔唑-9-基）-芐醇（CBBC-OH）的紫外吸收在這項(xiàng)研究中，我們實(shí)驗(yàn)室合成了用于制備CBBC-Cl的中間產(chǎn)物4-（咔唑-9-基）-芐醇（CBBC-OH），其結(jié)構(gòu)與芐基咔唑衍生物非常相似。在200-600nm的掃描范圍內(nèi)，在乙腈，乙醇，甲醇和1,4-二惡烷等不同溶劑中測(cè)定了CBBC-OH溶液（1.5×10-5mol/L）的最大吸收波長(zhǎng)，吸光度（A）和摩爾吸收系數(shù)（）。如表2-2所示，在乙腈溶液中觀察到最大吸收波長(zhǎng)為292nm，相應(yīng)的摩爾吸收系數(shù)（）為2.04×104L/mol/cm，與文獻(xiàn)報(bào)道的FMOC衍生物的摩爾吸收系數(shù)（1.7×104L/mol/cm）相比，CBBC-OH的摩爾吸收系數(shù)約強(qiáng)1.2倍[51]。我們認(rèn)為這是由于在CBBC-Cl分子的核心結(jié)構(gòu)上加入了一個(gè)叔氮原子連接的苯環(huán)，這進(jìn)一步增強(qiáng)了整個(gè)分子的共軛結(jié)構(gòu)。表2-24-（咔唑-9-基）-芐醇（CBBC-OH）的紫外吸收溶劑吸光度（A）摩爾吸收系數(shù)（）337nm326nm292nm229nmA（×104）A（×104）A（×104）A（×104）乙腈0.2961.480.3011.500.4092.040.2911.45乙醇0.2741.370.2791.390.4002.000.2831.41甲醇0.2521.260.2671.330.3611.800.2471.231,4-二惡烷0.2411.200.2561.280.2841.422.3.24-（咔唑-9-基）-芐醇（CBBC-OH）的熒光性質(zhì)圖2-3CBBC-OH的最大發(fā)射波長(zhǎng)11

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]普洱茶發(fā)酵過(guò)程中不同添加物對(duì)茶褐素及其形成機(jī)制的影響[J]. 龔加順,陳一江,彭春秀,周紅杰.  茶葉科學(xué). 2010(02)



本文編號(hào)：3594175