淀粉樣纖維在體內(nèi)積累會導(dǎo)致多種疾病,例如阿爾茨海默氏病,Ⅱ型糖尿病和帕金森氏病等。因此,淀粉樣蛋白變性相關(guān)研究成為化學(xué),生物學(xué)和醫(yī)學(xué)交叉領(lǐng)域的重要課題之一。為了監(jiān)測淀粉樣纖維形成過程并了解纖維形成的機理,尋找高品質(zhì)的檢測蛋白質(zhì)纏結(jié)和淀粉樣蛋白斑塊的探針成為該領(lǐng)域的一項重要任務(wù)。在本論文中,我們發(fā)現(xiàn)了一種名為喹哪啶紅（QR）的近紅外熒光探針,該探針可識別淀粉樣纖維的β-折疊結(jié)構(gòu)。通過使用熒光光譜,共聚焦熒光顯微鏡和等溫滴定量熱法研究了在淀粉樣纖維存在下,QR以及其他典型淀粉樣蛋白探針的光化學(xué)和生物物理特性。此外,還用分子對接模擬方法計算了QR和胰島素纖維之間的結(jié)合位點和相互作用模式。在這些淀粉樣纖維探針中,QR顯示出較大的優(yōu)勢,包括超分子力強,近紅外發(fā)射峰,高靈敏度和抗漂白性。在存在血清的情況下,熒光信號與淀粉樣纖維樣品的濃度在1-30μM范圍內(nèi)呈線性響應(yīng),檢出限為2.31μM。該方法在血清實際樣品中的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為90.4%-99.2%和3.05%-3.47%。重要的是,QR在致病小鼠腦切片中淀粉樣蛋白斑塊的檢測中體現(xiàn)出低的生物背景和高的靈敏度。我們建議QR作為監(jiān)測淀粉樣蛋... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

淀粉樣蛋白纖維化的成核動力學(xué)[66]

第二章喹哪啶紅重要的新用途-識別淀粉樣纖維18圖2.1QR分子結(jié)構(gòu)。2.2實驗部分2.2.1試劑喹哪啶紅和牛胰島素（insulin）購自于上海瑞勇生物科技有限公司。硫磺素T，硫磺素S，尼羅紅，溶菌酶，纖維蛋白原于北京鼎國昌盛生物科技有限公司購買。實驗用水均為去離子水。PBS緩沖溶液：Na2HPO4(10mM),KH2PO4(1.8mM),NaCl(140mM),KCl(2.7mM).；

第二章喹哪啶紅重要的新用途-識別淀粉樣纖維222.3結(jié)果與討論2.3.1實驗思路設(shè)計圖圖2.2QR與淀粉樣纖維相互作用后發(fā)出近紅外熒光。QR是一種常見的pH指示劑[96,97]，可識別α-酸性糖蛋白[98,99]和核酸[100,101]。在探究過程中，我們發(fā)現(xiàn)QR自身無熒光，與α-螺旋狀態(tài)的淀粉樣纖蛋白作用無熒光產(chǎn)生，但與β-折疊狀態(tài)下的淀粉樣纖維結(jié)合時在630nm處出現(xiàn)強的熒光發(fā)射峰，在此實驗基礎(chǔ)上我們探究了QR作為淀粉樣纖維探針的潛力。通過理論模擬與實驗相結(jié)合探究了QR與淀粉樣蛋白的結(jié)合原理及QR與淀粉樣纖維結(jié)合的發(fā)光原理。經(jīng)探究發(fā)現(xiàn)QR與傳統(tǒng)淀粉樣纖維探針相比，具有斯托克斯位移較大，熱力學(xué)作用力和抗干擾性強，在實際樣品中的靈敏度高，發(fā)射處于近紅外區(qū)使得生物成像背景低等優(yōu)點，綜上，本章描述了QR作為對淀粉樣纖維的一種新的熒光探針具有潛在的應(yīng)用前景，作用示意圖見圖2.2。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Near-infrared fluorescent probes for imaging of amyloid plaques in Alzheimer’s disease[J]. Hongjuan Tong,Kaiyan Lou,Wei Wang.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2015(01)
[2]MRI分子探針在阿爾茨海默病診斷的應(yīng)用[J]. 孫文閣,李煥煥.  解剖科學(xué)進展. 2013(05)
[3]肝硬化患者纖維蛋白原結(jié)合唾液酸水平的研究[J]. 周玉貴,劉昌元,祝正觀.  臨床肝膽病雜志. 2000(01)

碩士論文
[1]硫、硒醇小分子熒光探針的設(shè)計、合成及其成像應(yīng)用[D]. 潘月.湖南大學(xué) 2017
[2]多功能納米診療劑的構(gòu)建及其在腫瘤的成像與治療中的應(yīng)用研究[D]. 丁星.吉林大學(xué) 2017
[3]基于蛋白纖維模板法貴金屬納米材料的制備及電催化研究[D]. 鮮義芬.燕山大學(xué) 2014
[4]腦MRI圖像分割方法的研究與實現(xiàn)[D]. 劉瑋.華南理工大學(xué) 2012
[5]胰島素淀粉樣纖維形成、抑制和解構(gòu)研究[D]. 劉銳.天津大學(xué) 2010



本文編號：3539628