淀粉樣纖維在體內積累會導致多種疾病,例如阿爾茨海默氏病,Ⅱ型糖尿病和帕金森氏病等。因此,淀粉樣蛋白變性相關研究成為化學,生物學和醫(yī)學交叉領域的重要課題之一。為了監(jiān)測淀粉樣纖維形成過程并了解纖維形成的機理,尋找高品質的檢測蛋白質纏結和淀粉樣蛋白斑塊的探針成為該領域的一項重要任務。在本論文中,我們發(fā)現(xiàn)了一種名為喹哪啶紅（QR）的近紅外熒光探針,該探針可識別淀粉樣纖維的β-折疊結構。通過使用熒光光譜,共聚焦熒光顯微鏡和等溫滴定量熱法研究了在淀粉樣纖維存在下,QR以及其他典型淀粉樣蛋白探針的光化學和生物物理特性。此外,還用分子對接模擬方法計算了QR和胰島素纖維之間的結合位點和相互作用模式。在這些淀粉樣纖維探針中,QR顯示出較大的優(yōu)勢,包括超分子力強,近紅外發(fā)射峰,高靈敏度和抗漂白性。在存在血清的情況下,熒光信號與淀粉樣纖維樣品的濃度在1-30μM范圍內呈線性響應,檢出限為2.31μM。該方法在血清實際樣品中的回收率和相對標準偏差分別為90.4%-99.2%和3.05%-3.47%。重要的是,QR在致病小鼠腦切片中淀粉樣蛋白斑塊的檢測中體現(xiàn)出低的生物背景和高的靈敏度。我們建議QR作為監(jiān)測淀粉樣蛋... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

淀粉樣蛋白纖維化的成核動力學[66]

第二章喹哪啶紅重要的新用途-識別淀粉樣纖維18圖2.1QR分子結構。2.2實驗部分2.2.1試劑喹哪啶紅和牛胰島素（insulin）購自于上海瑞勇生物科技有限公司。硫磺素T，硫磺素S，尼羅紅，溶菌酶，纖維蛋白原于北京鼎國昌盛生物科技有限公司購買。實驗用水均為去離子水。PBS緩沖溶液：Na2HPO4(10mM),KH2PO4(1.8mM),NaCl(140mM),KCl(2.7mM).；

第二章喹哪啶紅重要的新用途-識別淀粉樣纖維222.3結果與討論2.3.1實驗思路設計圖圖2.2QR與淀粉樣纖維相互作用后發(fā)出近紅外熒光。QR是一種常見的pH指示劑[96,97]，可識別α-酸性糖蛋白[98,99]和核酸[100,101]。在探究過程中，我們發(fā)現(xiàn)QR自身無熒光，與α-螺旋狀態(tài)的淀粉樣纖蛋白作用無熒光產生，但與β-折疊狀態(tài)下的淀粉樣纖維結合時在630nm處出現(xiàn)強的熒光發(fā)射峰，在此實驗基礎上我們探究了QR作為淀粉樣纖維探針的潛力。通過理論模擬與實驗相結合探究了QR與淀粉樣蛋白的結合原理及QR與淀粉樣纖維結合的發(fā)光原理。經探究發(fā)現(xiàn)QR與傳統(tǒng)淀粉樣纖維探針相比，具有斯托克斯位移較大，熱力學作用力和抗干擾性強，在實際樣品中的靈敏度高，發(fā)射處于近紅外區(qū)使得生物成像背景低等優(yōu)點，綜上，本章描述了QR作為對淀粉樣纖維的一種新的熒光探針具有潛在的應用前景，作用示意圖見圖2.2。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]硫、硒醇小分子熒光探針的設計、合成及其成像應用[D]. 潘月.湖南大學 2017
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[3]基于蛋白纖維模板法貴金屬納米材料的制備及電催化研究[D]. 鮮義芬.燕山大學 2014
[4]腦MRI圖像分割方法的研究與實現(xiàn)[D]. 劉瑋.華南理工大學 2012
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本文編號：3539628