超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（UHPLC-MS/MS）技術(shù)廣泛應(yīng)用于食品安全、醫(yī)藥檢測分析、環(huán)境分析、生命科學(xué)以及石油化工等各個領(lǐng)域。該技術(shù)既具有超高效液相色譜的高分離能力、分析速度快以及檢測靈敏度高等優(yōu)勢又含有質(zhì)譜的高特異性、準(zhǔn)確定性定量的優(yōu)勢,對分析檢測復(fù)雜生物樣本十分友好。穩(wěn)定同位素標(biāo)記衍生化（SILD）通過修飾分子結(jié)構(gòu)來提高分析檢測的靈敏度和質(zhì)譜響應(yīng)信號來實現(xiàn)準(zhǔn)確定性、定量。但是在實際的分析工作中,分析樣本量巨大,多通路穩(wěn)定同位素標(biāo)記衍生化（MSILD）技術(shù)可以解決上述問題,提高分析通量。同時衍生化帶來了新問題,過量的衍生試劑對色譜-質(zhì)譜的分析檢測工作帶來嚴(yán)重的干擾。磁分散固相萃取技術(shù)（MDSPE）與氧化石墨烯以及分子印跡聚合物等吸附劑相結(jié)合而應(yīng)用于樣品前處理過程,具有操作簡便,速度快,吸附效率高等優(yōu)點。本論文主要完成了三個工作,具體內(nèi)容如下:第一章:簡述了超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)、化學(xué)衍生化技術(shù)、穩(wěn)定同位素標(biāo)記衍生化技術(shù)、多通路穩(wěn)定同位素標(biāo)記衍生化技術(shù)及磁分散固相萃取技術(shù)的進展。第二章:首次設(shè)計并合成了一系列新型的基于吡哌酸為核心的多標(biāo)簽衍生試劑——穩(wěn)定同位素質(zhì)量標(biāo)簽（SIMT... 

【文章來源】：曲阜師范大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

羥基多環(huán)芳烴(OH-PAHs)的分子結(jié)構(gòu)

第二章9-PlexMSILD-MDSPE-UHPLC-MS/MS測定人血漿和尿液中的游離羥基多環(huán)芳烴7圖2.2MSILD-MDSPE與UHPLC-MS/MS相結(jié)合的策略原理圖Figure2.2TheschematicoftheproposedMSILD-MDSPEcombinedwithUHPLC-MS/MSstrategy和UHPLC-MS/MS作為開發(fā)的方法用于一次UHPLC進樣是實現(xiàn)9重通量檢測人尿液或血漿中的游離OH-PAHs。圖2.2是此工作已開發(fā)MSILD-MDSPE-UHPLC-MS/MS策略的示意圖。該方法可以實現(xiàn)高靈敏度，高精度和高通量的對游離OH-PAHs進行快速檢測。有望將其用于評估人類多環(huán)芳烴的暴露，并為實施多環(huán)芳烴的污染預(yù)防和控制提供一些幫助。2.2實驗部分2.2.1化學(xué)藥品和試劑1-羥基芘（1-OH-Pyr）（98％），1-萘酚（1-OH-Nap）（98％），2-萘酚（2-OH-Nap）（99％），碳酸鉀（GR），碘甲烷-d3（99％），溴乙烷（98％），溴乙烷-d5、1-溴丙烷（CP），正丁基溴（99％）和石墨烯（95％）購自阿拉丁生化科技有限公司（中國上海）。2-羥基芴（2-OH-Flu）（98％），吡哌酸和HP-2β-葡糖醛酸糖苷酶由Sigma-Aldrich（USA）提供。4-羥基菲（4-OH-Phe）購自多倫多研究化學(xué)公司（加拿大）。9-羥基菲（9-OH-Phe）從麥克林生化技術(shù)有限公司（中國）獲得。碘甲烷（99％）購自百靈威生化科技股份有限公司（中國）。3-羥基菲（3-OH-Phe）（在乙腈中為10ng/μL）由Dr.EhrenstorferGmbH（德國）提供。FeCl3·6H2O和FeCl2·4H2O由國藥集團化學(xué)試劑有限公司（中國上海）提供。HPLC級的甲醇（MeOH），乙腈（ACN）和甲酸（FA）購自大茂化學(xué)試劑有限公司（中國）。其他試劑均為市售的HPLC級或分析級。

第二章9-PlexMSILD-MDSPE-UHPLC-MS/MS測定人血漿和尿液中的游離羥基多環(huán)芳烴12圖2.3（A）為穩(wěn)定同位素質(zhì)量標(biāo)簽（SIMTs）SIMT-332和SIMT-338的合成過程；（B）穩(wěn)定同位素質(zhì)量標(biāo)簽（SIMTs）SIMT-346，SIMT-349，SIMT-351，SIMT-354，SIMT-360，SIMT-363，SIMT-374和SIMT-377的合成。Fig.2.3(A)Synthesisprocedureofstableisotopemasstags(SIMTs)ofSIMT-332andSIMT-338;(B)Synthesisprocedureofstableisotopemasstags(SIMTs)ofSIMT-346,SIMT-349,SIMT-351,SIMT-354,SIMT-360,SIMT-363,SIMT-374andSIMT-377.圖2.4用SIMTs對OH-PAHs的衍生化反應(yīng)Fig.2.4DerivatizationreactionsforOH-PAHsusingSIMTs2.2.4OH-PAHs與SIMTs的標(biāo)記反應(yīng)如圖2.4所示，在SIMTs和7個OH-PAHs的活性羥基之間進行了穩(wěn)定的同位素標(biāo)記衍生化反應(yīng)。簡而言之，將9等份的血漿，尿液或標(biāo)準(zhǔn)品在氮氣下干燥，然后用20μL的乙腈重新溶解。然后加入100μLpH值為9.2的碳酸氫鈉緩沖溶液。渦旋振蕩15s，在血漿，尿液或標(biāo)準(zhǔn)液中添加200μLSIMTs（SIMT-332/338/349/351/354/360/363/374/377）乙腈溶液以標(biāo)記OH-PAHs，并將200μLSIMT-346乙腈溶液添加到標(biāo)準(zhǔn)溶液中以標(biāo)記OH-PAHs。將所得溶液密封，并在40℃下反應(yīng)5分鐘。然后將SIMT-346標(biāo)記的標(biāo)準(zhǔn)品和其他9種標(biāo)記的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品在1.0mL試管中均勻混合，隨后用于MDSPE程序。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]QuEChERS/超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定土壤中19種氟喹諾酮類抗生素殘留[J]. 陳磊,吳赟琦,趙志勇,趙曉燕,周昌艷.  分析測試學(xué)報. 2019(02)
[2]Deciphering nucleic acid modifications by chemical derivatization-mass spectrometry analysis[J]. Meng-Dan Lan,Bi-Feng Yuan,Yu-Qi Feng.  Chinese Chemical Letters. 2019(01)



本文編號：3521535