細胞是生命的基本組成單位。在科學技術不斷進步的今天,研究細胞的結(jié)構(gòu)、功能與行為依然是科學工作者們不斷探索的重要課題。傳統(tǒng)的研究大多針對整個細胞群體,將細胞群體中每個細胞的平均水平作為研究依據(jù),忽略了細胞與細胞之間的差異。這類差異是由細胞自身的差異及其所處于的微環(huán)境的差異所引起的,對于充分理解生理條件下組織微環(huán)境的細胞特異性和復雜性具有重要意義,因此,從單細胞水平對細胞進行研究是當前細胞研究工作中的重要發(fā)展方向。微量元素作為生命活動中的重要組成部分,能夠影響生命活動中的各個環(huán)節(jié),也是單細胞分析的研究對象之一。電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）作為目前元素分析最為重要的手段之一,具備優(yōu)異的元素檢測能力。能夠在單細胞水平檢測細胞自身元素含量,同時也能夠分析外源性元素（如藥物吸收,元素標記等）在單個細胞上的水平。利用ICP-MS進行單細胞分析的研究近年來取得了長足的進步,有望在化學、生物領域發(fā)揮重要作用。本論文的研究目的在于考察單細胞分析過程中各條件參數(shù)對于單細胞分析結(jié)果的影響;將單細胞ICP-MS（Single cell ICP-MS,SC-ICP-MS）方法分別應用于酵母、豬精子細胞,對... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

元素標記用于單細胞多參數(shù)同時檢測（Bendalletal2011）

基于 ICP-MS 的單細胞元素分析方法研究時間分辨模式下得到連續(xù)而平穩(wěn)的信號；而對于非均相的細胞分散液而言，由于細胞相較于其分散的介質(zhì)元素含量較高，因而產(chǎn)生脈沖式的正價離子流，時間分辨模式下得到單個的脈沖信號。同時，以時間分辨 ICP-MS 對細胞進行檢測，其單細胞信號出現(xiàn)的頻率同細胞分散液中細胞的數(shù)量密度成正相關，而單細胞信號的強度，則同胞內(nèi)元素含量水平呈正相關（Mueller et al 2014）。

圖 1-3 配備高效細胞引入系統(tǒng)的 SC-ICPMS 的示意圖（Wang et al.2017）Fig 1-3 Schematic of the SC-ICPMS equipped with a high efficiency cell introductionsystem(Wang et al.2017)5.1.2 液滴發(fā)生樣品引入技術液滴發(fā)生技術是一種廣泛應用于單細胞分析的樣品引入技術。相比于將細胞分散液直接霧化，微滴發(fā)生器能夠有助于分離細胞并確保所檢測到的尖刺信號來源于單個細胞。常見的微滴發(fā)生裝置如商用微滴發(fā)生器、微滴芯片等。其通過將單個細胞包裹在小液滴中形成連續(xù)的液滴流從而保證細胞能夠逐個引入ICP-MS。相比于流式細胞術，微滴發(fā)生裝置具有體積小、操作簡便以及樣品損耗更少等優(yōu)勢。Shigeta 等（2013）利用商用微滴發(fā)生器同 ICP-MS 聯(lián)用，成功地實現(xiàn)了將單個細胞嵌入液滴中，首次得到了背景、空白及單個細胞的信號；Wang等（2017）以簡易的液滴發(fā)生芯片利用己醇作為有機相切割水相的細胞樣品從而


本文編號：3519302