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基于纖維素酶功能的熒光探針分子的構(gòu)建及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2021-11-12 10:41
  近年來,隨著化石燃料的日漸枯竭及環(huán)境污染的日益嚴(yán)重,生物質(zhì)原料的資源化、能源化利用受到人們廣泛關(guān)注。木質(zhì)纖維素是地球上最豐富的可再生生物質(zhì),其通過生物轉(zhuǎn)化可獲得多種燃料和化學(xué)品,而木質(zhì)纖維素細(xì)胞壁的復(fù)雜多糖網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)及其主要化學(xué)組分(如木質(zhì)素、半纖維素、纖維素、果膠等)的交互作用,使其成為抵抗生物質(zhì)降解的天然屏障,降低了生物質(zhì)纖維素的可及性,進(jìn)而影響木質(zhì)纖維素生物質(zhì)的酶解轉(zhuǎn)化率。影響木質(zhì)纖維素生物質(zhì)可及性因素可分為直接因子和間接因子。直接因子即為纖維素的可及表面積(CASA),其是決定纖維素酶解性能的直接因素;間接因素包括化學(xué)組成(木質(zhì)素,半纖維素,纖維素,乙;鶊F(tuán),胞壁蛋白等)、基質(zhì)物理結(jié)構(gòu)因素(孔隙率、孔徑、粒徑、比表面積等)以及纖維素本身結(jié)構(gòu)因素(結(jié)晶度、聚合度等)。因此,準(zhǔn)確定量分析纖維素可及度對(duì)于研究和強(qiáng)化木質(zhì)纖維素的生物轉(zhuǎn)化具有重要意義。然而,傳統(tǒng)用于表征木質(zhì)纖維素生物質(zhì)可及表面積的分析方法還存在一些不足之處。其一,所用探針分子大小往往與纖維素酶分子大小相差較大,導(dǎo)致所測(cè)得的可及表面積與“真實(shí)值”存在較大偏差;其二,所用探針分子對(duì)底物識(shí)別特異性較差或無特異性識(shí)別;其三,通常... 

【文章來源】:福建師范大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】:131 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

基于纖維素酶功能的熒光探針分子的構(gòu)建及應(yīng)用


圖1木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)示意圖t5]??Fig?1?Schematic?diagram?of?lignocellulose?structure??

電泳圖,基因序列,電泳圖,產(chǎn)物


Linkcr-TrCBM基因序列PCRoduct?of?HistagLinkcr-TrCBMNA?Marker?;?Land?and?Lane2丨蛋白構(gòu)建及表達(dá)??酶切位點(diǎn),雙酶切將pE接將HistagLinker-TrCB得表達(dá)質(zhì)粒pET-28a-Hist及測(cè)序比對(duì)均與原始目

電泳圖,蛋白純化,電泳圖,表達(dá)質(zhì)粒


pET-28a-HistagLinker-CBM??5514bp??圖1-8表達(dá)質(zhì)粒pET-28a-HistagLinker-TrCBMI構(gòu)建示意圖??Fig?1-8?Diagram?of?pET-28a-HistagLinkcr-TrCBM?I?plasmid?construction??(2)質(zhì)粒富集??將構(gòu)建完成的表達(dá)質(zhì)粒pET-28a-Histag-Linker-TrCBM通過熱激的方法(參照第??一章2.2.9)轉(zhuǎn)化入大腸桿菌(£>〇//?DH5a),用添加有50ug/mL卡那霉素的LB平??板篩選轉(zhuǎn)化成功的菌株,將該菌株接種至5mL液體LB培養(yǎng)基中(卡那抗性),置于??42??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
[1]木腐真菌分泌的低分子量物質(zhì)在木素生物降解中的作用機(jī)制[D]. 王璐.山東大學(xué) 2008



本文編號(hào):3490751

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