基于微流控紙芯片的多標(biāo)志物同時(shí)檢測(cè)化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-10-25 23:32
化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的反應(yīng)過(guò)程簡(jiǎn)單且無(wú)需復(fù)雜的操作,將化學(xué)發(fā)光與免疫分析技術(shù)相結(jié)合,能夠?qū)Χ喾N生物標(biāo)志物樣品實(shí)現(xiàn)定量分析,具有線性范圍寬、檢測(cè)速度快、背景干擾小、回收率高等優(yōu)點(diǎn),因此被廣泛應(yīng)用于臨床診斷、生化分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。微流控紙芯片可以將液體進(jìn)樣、化學(xué)反應(yīng)、信號(hào)檢測(cè)等操作集成在一起,具有制作成本低、便攜、可多路分析、環(huán)境友好、生物相容性好等優(yōu)點(diǎn)。本文開(kāi)發(fā)了新型化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù),并制備了基于微流控紙芯片的多通道化學(xué)發(fā)光免疫分析裝置,成功運(yùn)用于對(duì)多種急性心肌梗死和癌癥生物標(biāo)志物的定量檢測(cè),主要研究如下:(1)制備了一種基于微流控紙芯片時(shí)間分辨型化學(xué)發(fā)光免疫分析裝置,首次實(shí)現(xiàn)了心肌肌鈣蛋白I(c Tn I)、心臟脂肪酸結(jié)合蛋白(H-FABP)以及和肽素(Copeptin)三種急性心肌梗死生物標(biāo)志物的同時(shí)測(cè)定,設(shè)計(jì)了基于功能化金納米粒子的雙重信號(hào)放大化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測(cè)體系。所開(kāi)發(fā)的基于金納米材料的化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù),以一抗功能化金納米粒子(Ab1-GNPs)作為一次信號(hào)放大探針,鈷離子、二抗和魯米諾發(fā)光試劑多功能金納米粒(Co(II)-Ab2<...
【文章來(lái)源】:合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:82 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
一種基于魯米諾來(lái)檢測(cè)兔IgG的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法
合肥工業(yè)大學(xué)專業(yè)碩士研究生學(xué)位論文6圖1.4一種基于魯米諾來(lái)檢測(cè)兔IgG的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法Fig1.4AchemiluminescentimmunoassaymethodfordetectingrabbitIgGbasedonluminolMahjoobehEhsani[18]用共價(jià)結(jié)合法制備得到CuO/MWCNT納米復(fù)合材料和CuO納米膠體,如圖1.5所示,研究了將其作為高效的納米催化劑對(duì)魯米諾化學(xué)發(fā)光體系的增強(qiáng)作用。結(jié)果表明,luminol-MWCNTs/CuONPs-H2O2和luminol-CuONPs-H2O2復(fù)合材料能顯著提高化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度。在最佳條件下,乙肝表面抗原在濃度為2.2×109~5.0×106g/mL的范圍內(nèi)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度近似線性,檢測(cè)限為0.85ng/mL。實(shí)驗(yàn)首次介紹了基于新型抗體納米材料偶聯(lián)物的魯米諾化學(xué)發(fā)光免疫分析法,為生物樣品的分析提供了更廣闊的方向。圖1.5一種基于魯米諾來(lái)檢測(cè)乙肝表面抗原的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法Fig1.5AchemiluminescentimmunoassaymethodfordetectinghepatitisBsurfaceantigenbasedonluminol1.2.3.2吖啶類化學(xué)發(fā)光在免疫分析中的應(yīng)用在吖啶類化合物中,光澤精的發(fā)光效率是最高的。但是,由于光澤精的結(jié)構(gòu)特殊性,沒(méi)有任何基團(tuán)可以與其他化合物結(jié)合,因此不能作為蛋白質(zhì)和核酸的標(biāo)記探針,也不能用于免疫檢測(cè),所以開(kāi)發(fā)穩(wěn)定性強(qiáng)、發(fā)光效率高且可作為探針的
第一章緒論7吖啶類化合物是人們一直在研究的內(nèi)容。如圖1.6所示,Zhuang[19]等人開(kāi)發(fā)了一種新型聯(lián)吡啶化合物(10,10′-二甲基-3,3′-二磺酸基-9,9′-雙吖啶,DMDSBA),與傳統(tǒng)的光澤精相比,DMDSBA的發(fā)光效率要高很多,而且還可以標(biāo)記CEA抗體,成功地建立了一種穩(wěn)定、高效地測(cè)定人血清中CEA的新型化學(xué)發(fā)光免疫分析方法(圖1.7),其檢測(cè)范圍為1~100ng/mL,檢測(cè)限為0.53ng/mL。圖1.6一種新型聯(lián)吡啶化合物DMDSBA的合成Fig1.6SynthesisofanewbiacridinecompoundDMDSBA圖1.7一種基于新型聯(lián)吡啶化合物來(lái)測(cè)定人血清中癌胚抗原CEA的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法Fig1.7AchemiluminescentimmunoassaymethodfordetectingCEAinhumanserumbasedonnewbiacridinecompound1.2.3.3過(guò)氧草酸酯類化學(xué)發(fā)光在免疫分析中的應(yīng)用在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中,運(yùn)用最廣泛的草酸脂有雙三氯苯基草酸酯(TCPO)、2,4-二硝基苯基草酸酯(DNPO)和鄰苯二甲酸二丁酯(CPPO)。典型的過(guò)氧草酸鹽化學(xué)發(fā)光反應(yīng)(PO-CL)是指活性草酸鹽反應(yīng),如在TCPO-H2O2體系中,需要加入可以釋放不同波長(zhǎng)的熒光劑,熒光劑可以標(biāo)記在酶、DNA等分子上,此方法可以
本文編號(hào):3458377
【文章來(lái)源】:合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校
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【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
一種基于魯米諾來(lái)檢測(cè)兔IgG的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法
合肥工業(yè)大學(xué)專業(yè)碩士研究生學(xué)位論文6圖1.4一種基于魯米諾來(lái)檢測(cè)兔IgG的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法Fig1.4AchemiluminescentimmunoassaymethodfordetectingrabbitIgGbasedonluminolMahjoobehEhsani[18]用共價(jià)結(jié)合法制備得到CuO/MWCNT納米復(fù)合材料和CuO納米膠體,如圖1.5所示,研究了將其作為高效的納米催化劑對(duì)魯米諾化學(xué)發(fā)光體系的增強(qiáng)作用。結(jié)果表明,luminol-MWCNTs/CuONPs-H2O2和luminol-CuONPs-H2O2復(fù)合材料能顯著提高化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度。在最佳條件下,乙肝表面抗原在濃度為2.2×109~5.0×106g/mL的范圍內(nèi)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度近似線性,檢測(cè)限為0.85ng/mL。實(shí)驗(yàn)首次介紹了基于新型抗體納米材料偶聯(lián)物的魯米諾化學(xué)發(fā)光免疫分析法,為生物樣品的分析提供了更廣闊的方向。圖1.5一種基于魯米諾來(lái)檢測(cè)乙肝表面抗原的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法Fig1.5AchemiluminescentimmunoassaymethodfordetectinghepatitisBsurfaceantigenbasedonluminol1.2.3.2吖啶類化學(xué)發(fā)光在免疫分析中的應(yīng)用在吖啶類化合物中,光澤精的發(fā)光效率是最高的。但是,由于光澤精的結(jié)構(gòu)特殊性,沒(méi)有任何基團(tuán)可以與其他化合物結(jié)合,因此不能作為蛋白質(zhì)和核酸的標(biāo)記探針,也不能用于免疫檢測(cè),所以開(kāi)發(fā)穩(wěn)定性強(qiáng)、發(fā)光效率高且可作為探針的
第一章緒論7吖啶類化合物是人們一直在研究的內(nèi)容。如圖1.6所示,Zhuang[19]等人開(kāi)發(fā)了一種新型聯(lián)吡啶化合物(10,10′-二甲基-3,3′-二磺酸基-9,9′-雙吖啶,DMDSBA),與傳統(tǒng)的光澤精相比,DMDSBA的發(fā)光效率要高很多,而且還可以標(biāo)記CEA抗體,成功地建立了一種穩(wěn)定、高效地測(cè)定人血清中CEA的新型化學(xué)發(fā)光免疫分析方法(圖1.7),其檢測(cè)范圍為1~100ng/mL,檢測(cè)限為0.53ng/mL。圖1.6一種新型聯(lián)吡啶化合物DMDSBA的合成Fig1.6SynthesisofanewbiacridinecompoundDMDSBA圖1.7一種基于新型聯(lián)吡啶化合物來(lái)測(cè)定人血清中癌胚抗原CEA的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法Fig1.7AchemiluminescentimmunoassaymethodfordetectingCEAinhumanserumbasedonnewbiacridinecompound1.2.3.3過(guò)氧草酸酯類化學(xué)發(fā)光在免疫分析中的應(yīng)用在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中,運(yùn)用最廣泛的草酸脂有雙三氯苯基草酸酯(TCPO)、2,4-二硝基苯基草酸酯(DNPO)和鄰苯二甲酸二丁酯(CPPO)。典型的過(guò)氧草酸鹽化學(xué)發(fā)光反應(yīng)(PO-CL)是指活性草酸鹽反應(yīng),如在TCPO-H2O2體系中,需要加入可以釋放不同波長(zhǎng)的熒光劑,熒光劑可以標(biāo)記在酶、DNA等分子上,此方法可以
本文編號(hào):3458377
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