基質(zhì)輔助激光解析電離質(zhì)譜（matrix-assisted laser desorption ionization-mass spectrometry,MALDI-MS）成像技術(shù)近年來(lái)引起廣泛關(guān)注并得到快速發(fā)展,該技術(shù)在分子水平上對(duì)生物組織切片進(jìn)行多組分“直接”分析,經(jīng)過(guò)圖像重建軟件獲得組織中目標(biāo)成分的分布,提供可視化的組織樣品中組分分布的定位、定性和定量信息。其中基質(zhì)的選擇和覆蓋方法對(duì)于該技術(shù)的應(yīng)用至關(guān)重要。本論文使用傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜（FT-ICR-MS）儀器,從基質(zhì)和基質(zhì)覆蓋方法兩方面,研究改進(jìn)MALDI-MS成像中遇到的基質(zhì)分布不均勻及定量重復(fù)性差等問(wèn)題。（1）采用離子液體基質(zhì)2,5-二羥基苯甲酸丁胺,改進(jìn)MALDI-MS分析寡糖的定量重復(fù)性,并用于大豆和豆葉中寡糖的質(zhì)譜成像研究。實(shí)驗(yàn)中采用將離子液體2,5-二羥基苯甲酸丁胺甲醇溶液（20%,v/v）直接覆蓋樣品的簡(jiǎn)單加基質(zhì)方法,使用正離子檢測(cè)模式,考察寡糖樣品分析的MALDI-MS定量重復(fù)性,并用于大豆和豆葉寡糖成分的MALDI-MS成像。結(jié)果顯示,MALDI-MS使用離子液體2,5-二羥基苯甲酸丁胺基質(zhì)可以顯著改善定量... 

【文章來(lái)源】：上海應(yīng)用技術(shù)大學(xué)上海市

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

基質(zhì)輔助激光解析電離質(zhì)譜的示意圖

MALDI-MS 成像實(shí)驗(yàn)：質(zhì)譜成像的過(guò)程如圖 1 所示。首先將樣品薄片用雙面膠直接貼在不銹鋼靶板上（或者貼在成像玻片上并裝入成像靶板），然后采用干滴法，用移液槍取制備好的離子液體基質(zhì)滴在樣品薄片上，待溶劑揮發(fā)后，放入質(zhì)譜儀。在 CompasssolariX control 質(zhì)譜操作軟件中設(shè)置采集參數(shù)如表 2.1，保存方法后，打開(kāi) Hystar 軟件，選擇 MALDI Imaging workflow，在 flexImaging 中創(chuàng)建新序列（設(shè)置 Raster width 為 150μm），標(biāo)定測(cè)量區(qū)域，選取在 Compass solariX control 設(shè)置好的方法到 autoXecute method中，最后點(diǎn)擊 HyStar 上的 Start 進(jìn)行成像分析。成像結(jié)果由 Hystar Version 3.4（Build 8））軟件處理得到。

應(yīng)則比較差如圖 A 所示，相比較四種基質(zhì) DHB-BuN，其信號(hào)響應(yīng)是最好的，如此，在本實(shí)驗(yàn)中，選擇 DHB-BuN 基質(zhì)作為研究的對(duì)象。用于 3 種寡糖樣品測(cè)響應(yīng)如圖 2.2 所示，其中 DHB- BUN 作為基質(zhì)對(duì) 3 種寡糖的響應(yīng)均較好。因此B-BuN 基質(zhì)作為進(jìn)一步研究的基質(zhì)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3441443