血栓疾病是心腦血管疾病發(fā)生的主要誘因,全世界每年因為血栓疾病死亡達數(shù)百萬人。納豆激酶（NK）是一類來自天然枯草桿菌的細菌性堿性絲氨酸蛋白酶,它具有較強的纖維蛋白溶解活性,可以直接斷裂交聯(lián)的纖維蛋白,催化血纖維蛋白酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w溶酶或鈍化纖維蛋白溶解抑制劑,具有安全性好、價格便宜、容易提取和副作用小等優(yōu)點。然而,NK是一類蛋白質(zhì),在外界溫度和pH影響下容易失活,此外,它沒有靶向溶血栓的性能。因此,設(shè)計和制備NK的藥物傳輸載體不僅可以保護NK的酶活,而且可以賦予其靶向溶血栓的性能。聚谷氨酸肽類樹狀大分子具有可控的尺寸、優(yōu)異的水溶性、良好的生物降解性、良好的生物相容性和較低的細胞毒性等特點,另外,其表面具有大量的可功能化官能團,因此可以被用于保護和傳輸藥物的理想載體。基于以上考慮,本學(xué)位論文使用聚谷氨酸肽類樹狀大分子作為傳輸和保護納豆激酶的藥物載體,制備了一系列肽類樹狀大分子,考察了其負載納豆激酶前后的化學(xué)和生物性能。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:1.制備了二代、三代和四代的聚谷氨酸肽類樹狀大分子（G_n,n=2、3、4）,然后制備了聚乙二醇-不同代數(shù)聚谷氨酸肽類樹狀大分子（G<... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 前言
    1.2 肽類樹狀大分子的合成方法
        1.2.1 固相法
        1.2.2 液相法
        1.2.3 “Clickchemistry”合成法
        1.2.4 交聯(lián)合成法
    1.3 肽類樹狀大分子的合成策略
        1.3.1 發(fā)散式
        1.3.2 收斂式
        1.3.3 發(fā)散收斂結(jié)合式
    1.4 肽類樹狀大分子的主要合成原料
        1.4.1 聚賴氨酸樹狀大分子
        1.4.2 聚谷氨酸樹狀大分子
        1.4.3 聚脯氨酸樹狀大分子
    1.5 肽類樹狀大分子與藥物的作用機制及其應(yīng)用
        1.5.1 肽類樹狀大分子與藥物的作用機制
        1.5.2 肽類樹狀大分子在藥物傳輸系統(tǒng)中的應(yīng)用
    1.6 溶血栓藥物的種類及其作用機制
        1.6.1 第一代溶血栓藥物
        1.6.2 第二代溶血栓藥物
        1.6.3 第三代溶血栓藥物
        1.6.4 第四代溶血栓藥物
    1.7 靶向溶血栓藥物載體的分類
        1.7.1 被動靶向作用的藥物載體
        1.7.2 主動靶向作用的藥物載體
        1.7.3 物理化學(xué)靶向作用的藥物載體
        1.7.4 主動靶向和物理化學(xué)靶向雙重作用的藥物載體
    1.8 本學(xué)位論文選題指導(dǎo)思想
    參考文獻
第二章 聚乙二醇-不同代數(shù)聚谷氨酸肽類樹狀大分子的制備及其溶血栓性能研究
    2.1 前言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 主要原料及儀器設(shè)備
        2.2.2 聚乙二醇-不同代數(shù)聚谷氨酸肽類樹狀大分子(G_n-PEG-G_n,n=2、3、4)的制備
        2.2.3 納米材料結(jié)構(gòu)的表征
        2.2.4 G_n-PEG-G_n/NK納米復(fù)合物的制備和表征
        2.2.5 G_n-PEG-G_n/NK(n=2、3、4)納米復(fù)合物中NK酶活的測定
        2.2.6 G_3-PEG-G_3/NK納米復(fù)合物的體外溶栓實驗
        2.2.7 G_3-PEG-G_3/NK納米復(fù)合物的體外酶活穩(wěn)定性
        2.2.8 G_3-PEG-G_3納米材料的細胞毒性
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 G_n(n=2、3、4)的結(jié)構(gòu)分析
        2.3.2 N_3-PEG-N_3的合成及表征
        2.3.3 G_n-PEG-G_n/NK(n=2、3、4)的合成
        2.3.4 不同比例G_n-PEG-G_n/NK(n=2、3、4)的酶活分析
        2.3.5 G_3-PEG-G_3/NK(6/1)的粒徑和形貌表征
        2.3.6 不同溫度儲存條件下G_3-PEG-G_3/NK(6/1)的酶活變化
        2.3.7 G_3-PEG-G_3的細胞毒性
        2.3.8 體外溶血栓性能分析
    2.4 本章小結(jié)
    參考文獻
第三章 多臂聚乙二醇-聚谷氨酸肽類樹狀大分子的制備及其溶血栓性能研究
    3.1 前言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 主要原料及儀器設(shè)備
        3.2.2 多臂聚乙二醇-聚谷氨酸肽類樹狀大分子(x-PEG(G_3)_x,x=2、4、6、8)的制備
        3.2.3 納米材料結(jié)構(gòu)的表征
        3.2.4 x-PEG(G_3)_x/NK(x=2、4、6、8)納米復(fù)合物的制備和表征
        3.2.5 x-PEG(G_3)_x/NK(x=2、4、6、8)納米復(fù)合物中NK酶活測定
        3.2.6 4-PEG(G3_)_4/NK(1/1)納米復(fù)合物的體外溶栓實驗
        3.2.7 4-PEG(G_3)_4/NK(1/1)納米復(fù)合物的體外酶活穩(wěn)定性
        3.2.8 4-PEG(G_3)_4納米材料的細胞毒性
        3.2.9 體內(nèi)溶栓實驗
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 端疊氮基多臂聚乙二醇(x-PEG(N_3)_x,x=2、4、6、8)的合成及表征
        3.3.2 多臂聚乙二醇-聚谷氨酸肽類樹狀大分子(x-PEG(G_3)_x,x=2、4、6、8)的合成及表征
        3.3.3 不同比例x-PEG(G_3)_x/NK(x=2、4、6、8)的酶活分析
        3.3.4 4-PEG(G_3)_4/NK(1/1)的粒徑和形貌表征
        3.3.5 不同溫度和pH儲存條件下4-PEG(G_3)_4/NK(1/1)的酶活變化
        3.3.6 4-PEG(G_3)_4的細胞存活率
        3.3.7 體外溶血栓性能分析
        3.3.8 體內(nèi)溶血栓性能分析
    3.4 本章小結(jié)
    參考文獻
第四章 Fe_3O_4/多臂聚乳酸-聚谷氨酸肽類樹狀大分子的制備及其靶向溶血栓性能研究
    4.1 前言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 主要原料及儀器設(shè)備
        4.2.2 多臂聚乳酸-聚谷氨酸肽類樹狀大分子(x-PLA(G_3)_x,x=3、4、6)的制備
        4.2.3 納米材料結(jié)構(gòu)的表征
        4.2.4 x-PLA(G_3)_x/NK(x=3、4、6)納米復(fù)合物的制備和表征
        4.2.5 x-PLA(G_3)_x(x=3、4、6)納米復(fù)合物中NK酶活的測定
        4.2.6 Fe_3O_4-4-PLA(G_3)_4-RGD納米材料的細胞毒性
        4.2.7 體外溶栓實驗
        4.2.8 體內(nèi)溶血栓實驗
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 多臂聚乳酸(x-PLA(OH)_x,x=3、4、6)的制備及表征
        4.3.2 端疊氮基多臂聚乳酸(x-PLA(N_3)_x,x=3、4、6)的制備及表征
        4.3.3 多臂聚乳酸-聚谷氨酸肽類樹狀大分子(x-PLA(G_3)_x,x=3、4、6)的制備及表征
        4.3.4 不同比例x-PLA(G_3)_x/NK(x=3、4、6)的酶活分析
        4.3.5 Fe_3O_4-4-PLA(G_3)_4-RGD的形貌和磁性表征
        4.3.6 Fe_3O_4-4-PLA(G_3)_4-RGD的細胞存活率
        4.3.7 體外溶血栓性能分析
        4.3.8 體內(nèi)溶血栓性能分析
    4.4 本章小結(jié)
    參考文獻
第五章 Fe_3O_4/二氧化硅-聚谷氨酸肽類樹狀大分子的制備及其靶向溶血栓性能研究
    5.1 前言
    5.2 實驗部分
        5.2.1 主要原料及儀器設(shè)備
        5.2.2 磁性介孔二氧化硅納米粒子(M-MSNs)的制備
        5.2.3 具有雙重靶向的二氧化硅-聚谷氨酸肽類樹狀大分子(M-MSNs-G_3-RGD)的制備
        5.2.4 納米材料結(jié)構(gòu)的表征
        5.2.5 M-MSNs-G_3-RGD/NK納米復(fù)合物的制備和表征
        5.2.6 M-MSNs-G_3-RGD納米復(fù)合物中NK酶活的測定
        5.2.7 M-MSNs-G_3-RGD納米材料的細胞毒性
        5.2.8 體外溶栓實驗
        5.2.9 體內(nèi)溶血栓實驗
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 M-MSNS-G_3-RGD的制備及其對NK的負載
        5.3.2 M-MSNS-G_3的表征
        5.3.3 M-MSNS-G_3-RGD的表征
        5.3.4 不同比例M-MSNS-G_3-RGD/NK的酶活分析
        5.3.5 M-MSNS-G_3-RGD的細胞存活率
        5.3.6 體外溶血栓性能分析
        5.3.7 體內(nèi)溶血栓性能分析
    5.4 本章小結(jié)
    參考文獻
全文總結(jié)
攻讀博士學(xué)位期間已發(fā)表和待發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]蚓激酶的提取工藝改進研究[J]. 涂清波,蘇鵬亮,林穎,陸冬鶯,王賽男,馬宇凡,徐丹.  天津中醫(yī)藥. 2018(01)
[2]肽類樹狀大分子的合成及其在藥物傳輸系統(tǒng)中的應(yīng)用[J]. 張少飛,楊建東,柳明珠,呂少瑜,高春梅,吳燦,朱召彥.  化學(xué)學(xué)報. 2016(05)
[3]使用新型耦合活化劑Oxyma高效合成利拉魯肽[J]. 王風(fēng)亮,許玲,儲國超,石景,郭慶祥.  有機化學(xué). 2016(01)
[4]Synthesis of peptide dendrimers with polyhedral oligomeric silsesquioxane cores via click chemistry[J]. Yu-Ji Pu,Hui Yuan,Ming Yang,Bin He,Zhong-Wei Gu.  Chinese Chemical Letters. 2013(10)
[5]點擊化學(xué)在拓撲結(jié)構(gòu)聚合物合成中的應(yīng)用[J]. 胡健,何金林,張明祖,倪沛紅.  高分子學(xué)報. 2013(03)
[6]肽類樹狀大分子及其生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用[J]. 佘汶川,徐翔暉,王剛,羅奎,顧忠偉.  中國材料進展. 2012(05)
[7]Polypeptide dendrimers: Self-assembly and drug delivery[J]. XU XiangHui, LI CaiXia, LI HaiPing, LIU Rong, JIANG Chao, WU Yao, HE Bin* & GU ZhongWei* National Engineering Research Center for Biomaterials, Sichuan University, Chengdu 610064, China.  Science China（Chemistry）. 2011(02)
[8]新型生物醫(yī)用材料:肽類樹枝狀大分子及其生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用[J]. 顧忠偉,羅奎,佘汶川,吳堯,何斌.  中國科學(xué):化學(xué). 2010(03)
[9]聚乙二醇支載的雜環(huán)化合物庫的液相合成[J]. 林旭鋒,王彥廣.  有機化學(xué). 2005(10)
[10]纖溶酶原激活劑的抑制劑與動脈粥樣硬化關(guān)系的研究進展[J]. 梁偉,焦?jié)嵢?  國外醫(yī)學(xué)(老年醫(yī)學(xué)分冊). 2001(01)



本文編號：3432620