右旋糖酐作為典型的多糖類藥物之一,其分子量大小及其分布與其性質(zhì)及藥理活性息息相關(guān),傳統(tǒng)制備右旋糖酐的方法“菌體發(fā)酵-酸降解-乙醇沉降”對分子量控制效果不理想,很大程度上限制了右旋糖酐在醫(yī)藥領(lǐng)域的推廣應(yīng)用;也有利用超聲波的空化效應(yīng)降解大分子右旋糖酐的研究,但超聲降解存在一個“極限”,即超聲一般只對極限分子量以上的右旋糖酐有較明顯的降解作用;利用雙酶（Dextransucrase合成酶和Dextranase分解酶）法定向合成藥用右旋糖酐可以很好地對其分子量進行控制,大量獲得臨床藥用所需分子量分布范圍的系列右旋糖酐制劑,且產(chǎn)物更均一,產(chǎn)率更高,有很好的產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用前景。目前,極少有商品級的Dextransucrase合成酶,且合成酶對合成產(chǎn)物右旋糖酐分子量的控制也沒有體現(xiàn)專一性。雙酶法定向合成對產(chǎn)物分子量及均一性有很好地控制,但這一合成過程的規(guī)律還不明確,過程調(diào)控與機理還有待深入了解。本課題以Dextransucrase合成酶（DS）為聚合催化劑、Dextranase分解酶（DN）為聚合調(diào)控劑、蔗糖為聚合底物構(gòu)建生物體外右旋糖酐的合成路線,量化研究右旋糖酐聚合過程,探索聚合重復單元、聚合模式及... 

【文章來源】：廣西大學廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１右旋糖酐的結(jié)構(gòu)??

）和Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌｇｌｕｃａｎ－ｂｉｎｄｉｎｇｄｏｍａｉｎ（Ｃ－端葡聚糖結(jié)合域）四部分組成，其中，Ｓｉｇｎａｌ??ｅｐｔｉｄｅ主要作用是引導Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶分泌到細胞膜外，Ｎ－ｔｅｒｍｉｎａｌ?ｃａｔａｌｙｔｉｃ??ｏｍａｉｎ的主要作用是使供體鹿糖分子催化裂解，Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ?ｇｌｕｃａｎ－ｂｉｎｄｉｎｇ?ｄｏｍａｉｎ的主??作用是使酶在合成過程中與葡聚糖緊密結(jié)合［１３，２４，５３，５４］。??Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶同時具有鹿糖酶和轉(zhuǎn)移酶兩種活性，Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶與??物鹿糖共價聯(lián)結(jié)，薦糖分子被催化裂解釋放出果糖分子，形成??中，酶催化的反應(yīng)主要有聚合形成右旋糖酐鏈，與Ｈ２０作用生成葡萄糖，與外界受體??用生成低聚糖和逆向反應(yīng)等四個方向其中，只有蔗糖作為底物時，將蔗糖催化分??成Ｄ－葡萄糖基（與酶連接）和果糖，接著將Ｄ－葡萄糖基轉(zhuǎn)移到右旋糖酐殘基的Ｃ３／Ｃ６??置或水分子上，聚合生成右旋糖酐糖鏈或水解蔗糖催化合成機制如圖１－２所示［５１］。??ｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶除了能合成右旋糖酐外，當有可識別外源受體（如麥芽糖）存在時，??ｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶還可以將Ｄ－葡萄糖基轉(zhuǎn)移到外源受體上聚合生成各種糖基化產(chǎn)物??（如功能性低聚糖等）Ｐ４，５６Ｌ??

的流速為１．０?ｍＬ／ｍｉｎ；進樣量為２０?｜ｉＬ。??２．２．５?Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶酶活力測定中果糖標準曲線的構(gòu)建??基于課題組前期研究進行構(gòu)建如圖２－１所示：??０．５１?７—??■?ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ??０?４?－?——ｌｉｎｅａｒ?ｆｉｔ??ｉ?ｘ??０．３－?Ｚ??ｓ?ｚ??Ｉｏ，?／??〇．〇：??－０．１?０．０?０．１?０．２?０．３?０．４?０．５?０．６?０．７?０．８??Ｆｒｕｃｔｏｓｅ?（ｍｇ）??圖２－１果糖（Ｆｒｕｃｔｏｓｅ）的標準曲線??Ｆｉｇ．?２－１?Ｔｈｅ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｆｒｕｃｔｏｓｅ??１２??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]酶法耦合兩級膜定向制備右旋糖酐及其機理研究[D]. 侯殿志.廣西大學 2017
[2]固定化雙酶法定向合成右旋糖酐及其調(diào)控機理研究[D]. 張義平.廣西大學 2015
[3]右旋糖酐酶與右旋糖酐蔗酶的共固定化和右旋糖酐發(fā)酵生產(chǎn)中酶解新工藝的研究[D]. 宋丹丹.合肥工業(yè)大學 2013



本文編號：3432299