四種不同重組GH11木聚糖酶的分子改造及催化特性研究
發(fā)布時間:2021-10-09 02:42
木聚糖酶作為一種應(yīng)用性較強(qiáng)的糖苷水解酶,廣泛應(yīng)用于食品與非食品工業(yè)生產(chǎn)中,為了滿足應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)的要求,有關(guān)木聚糖酶性能的研究越來越廣泛。本論文著重關(guān)注了四種不同重組GH11木聚糖酶N端區(qū)域的變化對其催化特性所產(chǎn)生的影響,主要包括以下五個部分:第一,嗜熱踝節(jié)菌F1208重組GH11木聚糖酶T-Xyn的分子改造及水解特性的研究。通過N端序列FPTGNTTELEKRQTTP(1-16)→AFTVGNGQ替換及C端Phe(193)Ser替換構(gòu)建突變體T-XynFM。在T-XynFM水解木三糖、木四糖和木五糖的產(chǎn)物中,木糖均沒被檢出。當(dāng)水解多聚木聚糖(櫸木、樺木和燕麥木聚糖)時,T-XynFM的產(chǎn)物中木糖生成量遠(yuǎn)低于T-Xyn,最大減少量約為90.22%(燕麥木聚糖)。T-XynFM水解木三糖的產(chǎn)物中出現(xiàn)木四糖,其生成量多于60%,表明T-XynFM具有較強(qiáng)的轉(zhuǎn)糖苷酶活性,該活性對生產(chǎn)低聚木糖具有較強(qiáng)的吸引力。第二,婁徹氏鏈霉菌L10904重組GH11木聚糖酶Srxyn的分子改造及水解特性的研究。通過N端替換ATTITT(1-6)→AFTVGNGQ及“Cord”結(jié)構(gòu)上的Ile(99)Thr替換...
【文章來源】:北京工商大學(xué)北京市
【文章頁數(shù)】:117 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
木聚糖酶的催化機(jī)制Fig.1.1Themechanismofxylanase(1)單置換反應(yīng)機(jī)制;(2)雙置換反應(yīng)機(jī)制(1)Singledisplacementmechanism;(2)Doubledisplacementmechanism
圖 1.2 GH11 木聚糖酶的結(jié)構(gòu)示意圖Fig. 1.2 The structure of GH11 xylanaseA 和 C:GH11 木聚糖酶的三維折疊結(jié)構(gòu);B:GH11 木聚糖酶的二級結(jié)構(gòu)。A and C: three dimensional structure of GH11 xylanase; B: secondary structure of GH11 xylanas
4圖 1.3 GH11 木聚糖酶的催化結(jié)合位點(diǎn)分布Fig. 1.3 The map of catalytic binding sites of GH11 xylanase1.4 木聚糖酶基因的克隆與表達(dá)隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展,越來越多的木聚糖酶基因被克隆并成功表達(dá)。HideTanaka 等從 Aureobasidium pullulans 中克隆得到木聚糖酶基因 xynI,長度為 663 b含有一個59 bp的內(nèi)含子,信號肽為34個氨基酸,編碼成熟肽187個氨基酸[17]。Tets
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]木聚糖酶的開發(fā)與應(yīng)用[J]. 慕娟,問清江,黨永,李葉昕,張爍,李文柯,李慧惠. 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(01)
[2]嗜熱酶耐熱機(jī)制及提高酶熱穩(wěn)定性的研究進(jìn)展[J]. 吳穗潔,吳文林,劉斌. 亞熱帶農(nóng)業(yè)研究. 2006(04)
[3]中性木聚糖酶在面包制作中的應(yīng)用[J]. 張勤良,王璋,許時嬰. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2004(07)
本文編號:3425474
【文章來源】:北京工商大學(xué)北京市
【文章頁數(shù)】:117 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
木聚糖酶的催化機(jī)制Fig.1.1Themechanismofxylanase(1)單置換反應(yīng)機(jī)制;(2)雙置換反應(yīng)機(jī)制(1)Singledisplacementmechanism;(2)Doubledisplacementmechanism
圖 1.2 GH11 木聚糖酶的結(jié)構(gòu)示意圖Fig. 1.2 The structure of GH11 xylanaseA 和 C:GH11 木聚糖酶的三維折疊結(jié)構(gòu);B:GH11 木聚糖酶的二級結(jié)構(gòu)。A and C: three dimensional structure of GH11 xylanase; B: secondary structure of GH11 xylanas
4圖 1.3 GH11 木聚糖酶的催化結(jié)合位點(diǎn)分布Fig. 1.3 The map of catalytic binding sites of GH11 xylanase1.4 木聚糖酶基因的克隆與表達(dá)隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展,越來越多的木聚糖酶基因被克隆并成功表達(dá)。HideTanaka 等從 Aureobasidium pullulans 中克隆得到木聚糖酶基因 xynI,長度為 663 b含有一個59 bp的內(nèi)含子,信號肽為34個氨基酸,編碼成熟肽187個氨基酸[17]。Tets
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]木聚糖酶的開發(fā)與應(yīng)用[J]. 慕娟,問清江,黨永,李葉昕,張爍,李文柯,李慧惠. 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(01)
[2]嗜熱酶耐熱機(jī)制及提高酶熱穩(wěn)定性的研究進(jìn)展[J]. 吳穗潔,吳文林,劉斌. 亞熱帶農(nóng)業(yè)研究. 2006(04)
[3]中性木聚糖酶在面包制作中的應(yīng)用[J]. 張勤良,王璋,許時嬰. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2004(07)
本文編號:3425474
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