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轉(zhuǎn)子型探針?lè)肿拥脑O(shè)計(jì)、合成及其在線粒體黏度成像中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2021-08-27 12:15
  線粒體是一種存在于大多數(shù)細(xì)胞中的由兩層膜包被的細(xì)胞器,是細(xì)胞中提供能量的結(jié)構(gòu),是細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸的主要場(chǎng)所。當(dāng)人體患有一些疾。ㄈ缗两鹕。⿻r(shí),這些疾病會(huì)造成線粒體膜黏度的改變。線粒體黏度與三羧酸循環(huán)相關(guān),呼吸作用產(chǎn)生的分子可以誘導(dǎo)線粒體的黏度變化,反過(guò)來(lái)線粒體黏度的變化也可以調(diào)節(jié)呼吸過(guò)程中的代謝物擴(kuò)散。此外,黏度的變化可以降低膜流動(dòng)性從而抑制線粒體的功能。因此,原位實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)線粒體黏度,對(duì)于生物學(xué)和病理學(xué)研究是非常重要。由于熒光探針在用于生物樣品成像時(shí)具有無(wú)創(chuàng),易操作,以及原位和實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞微環(huán)境的能力,已成為廣泛應(yīng)用的檢測(cè)工具。通常,熒光探針可以分為單熒光峰強(qiáng)度變化的turn-on型探針和雙通道強(qiáng)度變化的比率型探針。turn-on型探針通常容易受其他較差量化或可變因素影響,如濃度,激發(fā)強(qiáng)度和染料周?chē)h(huán)境(pH,極性,溫度等)。相對(duì)而言,比例探針可以通過(guò)雙峰比值消除背景干擾,提供更精確的定量檢測(cè),避免染料濃度和光漂白的等因素帶來(lái)的影響。與細(xì)胞內(nèi)離子和溶酶體等實(shí)體的成像相比,比率型探針的優(yōu)勢(shì)在成像細(xì)胞內(nèi)的物理參數(shù)如pH值,溫度,黏度等等。借助于比例型探針,通過(guò)雙峰的熒光強(qiáng)度比可以得到靶標(biāo)... 

【文章來(lái)源】:山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:105 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

轉(zhuǎn)子型探針?lè)肿拥脑O(shè)計(jì)、合成及其在線粒體黏度成像中的應(yīng)用


圖1-1.?Jab丨onski圖

發(fā)光過(guò)程,性質(zhì),振動(dòng)基態(tài),激發(fā)態(tài)分子


山東大學(xué)碩士學(xué)位論文??(ii)她豫過(guò)程。如圖1-1所示,馳豫過(guò)程激發(fā)態(tài)分子通過(guò)調(diào)整自身構(gòu)型使能量達(dá)到??Si態(tài)振動(dòng)基態(tài)的過(guò)程。這個(gè)過(guò)程持續(xù)時(shí)間約為(icr1G?10_12S)。完成馳豫后,分子??時(shí)間不會(huì)立即返回激發(fā)態(tài),滯留時(shí)間的長(zhǎng)短決定了激發(fā)態(tài)壽命的長(zhǎng)短。??(m)熒光發(fā)射過(guò)程。焚光發(fā)射過(guò)程是熒光分子從s!態(tài)回到s〇態(tài)的輻射躍遷過(guò)程。??熒光發(fā)射過(guò)程與吸收過(guò)程相似,躍遷速率很快,躍遷過(guò)程中分子構(gòu)型不會(huì)發(fā)生改??變,因此分子在躍遷完成后并非一定達(dá)到So態(tài)的振動(dòng)基態(tài),而是遵循Fmnk-??Condon原則,躍遷到某一振動(dòng)態(tài)的幾率由該振動(dòng)態(tài)與Si振動(dòng)基態(tài)的重疊積分大??小決定。??激發(fā)態(tài)分子返回基態(tài)也有可能不通過(guò)輻射躍遷過(guò)程而是經(jīng)歷其他過(guò)程,例如??通過(guò)與其它分子的碰撞或內(nèi)轉(zhuǎn)換直接返回基態(tài),導(dǎo)致熒光淬滅;激發(fā)態(tài)分子也有??可能經(jīng)歷系間竄越過(guò)程

過(guò)程圖,熒光團(tuán),過(guò)程,熒光共振能量轉(zhuǎn)移


?I??Ut?i??圖1-4.熒光共振能量轉(zhuǎn)移的一般過(guò)程。?_??Figure?1-5.?FRET?process.??如圖14所示,當(dāng)兩個(gè)熒光團(tuán)(D,A)間距非常。ǎ保埃睿硪?xún)?nèi))時(shí),如果熒光團(tuán)??D的發(fā)射光譜與熒光團(tuán)A的吸收光譜有重疊部分,則熒光團(tuán)D的激發(fā)態(tài)能量可??能會(huì)通過(guò)非輻射的庫(kù)侖作用轉(zhuǎn)移給熒光團(tuán)A,從而使熒光團(tuán)A達(dá)到激發(fā)態(tài),同??時(shí)熒光團(tuán)D退激回到基態(tài)。其中熒光團(tuán)D因?yàn)榻o予A激發(fā)態(tài)能量,被稱(chēng)為能量??給體(Donor),而焚光團(tuán)A接受了?D的能量達(dá)到激發(fā)態(tài),被稱(chēng)為能量受體(Acceptor),??這個(gè)過(guò)程就是熒光共振能量轉(zhuǎn)移(F6rster?resonance?energy?transfer,?FRET)。??FRET的效率由熒光團(tuán)D的發(fā)射光譜與A的吸收光譜的重疊度的大小以及??兩者之間的距離決定。對(duì)于給定的兩個(gè)熒光團(tuán),FRET的效率就取決于兩個(gè)熒光??團(tuán)的間距了。如果將FRET效率在50%時(shí)的D、A間距定義為為R〇

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]線粒體熒光探針最新研究進(jìn)展[J]. 姜娜,樊江莉,楊洪寶,彭孝軍.  化工學(xué)報(bào). 2016(01)
[2]聚集誘導(dǎo)發(fā)光機(jī)理研究[J]. 張雙,秦安軍,孫景志,唐本忠.  化學(xué)進(jìn)展. 2011(04)
[3]中位醛基取代Cy5的光譜性能及作為粘度熒光探針的研究[J]. 楊志剛,和艷霞,戴彬,竇柏蕊,王靜云,彭孝軍.  化學(xué)學(xué)報(bào). 2011(04)
[4]雙光子吸收截面的測(cè)量方法[J]. 何國(guó)華,王剛,葉莉華,崔一平.  激光雜志. 2003(06)



本文編號(hào):3366335

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