乳品中牛乳鐵蛋白及乳果糖的定量檢測方法研究
發(fā)布時間:2021-08-13 08:27
乳品是由生牛乳或生羊乳等鮮乳經(jīng)加工后,加入適量維生素、礦物質(zhì)及其他營養(yǎng)物質(zhì)制成的產(chǎn)品,營養(yǎng)成分極高,滿足人體健康需求,尤其是嬰兒健康成長所需的所有營養(yǎng)素。隨著人們生活水平的提高,對食品尤其是具高營養(yǎng)價值的乳品要求越來越高,因此國內(nèi)外對乳品從奶場到貨架都建立了較為完善的法律法規(guī)和檢測技術(shù)。乳品中的功能性營養(yǎng)成分越來越受消費者喜歡,而乳品質(zhì)量及潛在風(fēng)險與其加工方式密切相關(guān),牛乳鐵蛋白與乳果糖分別作為兩項可靠指標(biāo)受到關(guān)注,但尚無簡便、適用性強的檢測平臺。針對乳品中牛乳鐵蛋白及乳果糖建立快速、靈敏、可靠的檢測技術(shù),為消費者健康保駕護航具有重要意義。本文分別采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)與液相色譜-蒸發(fā)光檢測技術(shù)(LC-EL SD)建立了乳品中牛乳鐵蛋白及乳果糖定量檢測方法,主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1.基于LC-MS/MS建立了乳品中牛乳鐵蛋白定量檢測方法。樣品經(jīng)冷凍離心脫脂、胰蛋白酶水解后,使用超高效液相色譜-四極桿/靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜(UPLC-Q/Exactive-HRMS)系統(tǒng),在數(shù)據(jù)依賴采集(Date-dependent MS2)模式下,結(jié)合Pro...
【文章來源】:上海大學(xué)上海市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:88 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
牛乳鐵蛋白空間結(jié)構(gòu)[4]
上海大學(xué)碩士學(xué)位論文7圖1-2β-半乳糖苷酶催化乳糖轉(zhuǎn)化為乳果糖的反應(yīng)[45]Fig.1-2β-galactosidase-catalyzedtransgalactosylationreactionoflactosetolactulose[45]表1-1乳果糖、乳糖化合物信息Table1-1Informationoflactuloseandlactose中文通用名英文通用名CAS號分子量分子式結(jié)構(gòu)式理化性質(zhì)乳果糖Lactulose4618-18-2243.2C12H22O11白色不規(guī)則的粉末,易溶于水。乳糖Lactose5989-81-1243.2C12H22O11白色晶體或結(jié)晶粉末,微溶于乙醇,溶于乙醚和氯仿。農(nóng)業(yè)部奶及奶制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心建立了奶產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測數(shù)據(jù)庫,同時結(jié)合國際研究進展綜合分析發(fā)現(xiàn),乳果糖是牛奶熱加工的副產(chǎn)物,結(jié)合糠氨酸含量,能夠科學(xué)區(qū)分生乳、巴氏殺菌乳、滅菌乳和復(fù)原乳,是規(guī)范奶產(chǎn)品市場的科學(xué)指標(biāo)[45-58]。美國[49]、CAC[50]、歐盟[51]等均明確規(guī)定了巴氏殺菌乳和滅菌乳的工藝條件。牛奶中常見的熱加工工藝見表
上海大學(xué)碩士學(xué)位論文12定量限較高。Yuan等[88]基于特征肽ETTVFENLPEK定量牛乳鐵蛋白,經(jīng)Blast表明該肽段非牛乳鐵蛋白特征肽段,還存在于羊奶中。Chen等[89]結(jié)合UPLC-Q-TOF-MS和CESI-Q-TOF-MS兩種方法檢測牛乳鐵蛋白肽段,有效展現(xiàn)乳鐵蛋白序列,對特征肽段的搜尋提供一定幫助,但未進行乳鐵蛋白的定量研究。因此,LC-MS/MS方法測定蛋白含量的關(guān)鍵是找出酶解后肽段的特異性,先采用高分辨質(zhì)譜對蛋白標(biāo)準(zhǔn)品及實際樣品酶解后肽段進行全掃,通過匹配數(shù)據(jù)庫確證蛋白,獲得特征肽段,進一步建立肽段的多反應(yīng)監(jiān)測方法(圖1-3)[90-92]。圖1-3特征肽段的選擇Fig.1-3Selectionofmarkerpeptides3.2乳品中乳果糖的檢測方法乳果糖可作為衡量巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳等熱處理程度的敏感指標(biāo),鑒別各種不同加工工藝液態(tài)乳。這一指標(biāo)早已得到國際認(rèn)可,歐洲現(xiàn)行法規(guī)規(guī)定經(jīng)熱處理的乳品必須滿足食品衛(wèi)生要求,該法規(guī)制定了巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳的溫度和時間條件。巴氏殺菌乳可通過短時間內(nèi)高溫處理(至少72℃加熱15s)、低溫處理長時間段(至少63℃加熱30min)或者其他等效的時間-溫度處理情況;UHT滅菌乳可通過短時間內(nèi)超高溫處理(至少135℃以上保持3-5s)。根據(jù)歐盟和國際乳業(yè)聯(lián)盟(InternationalDairyFederation,IDF)的規(guī)定將UHT滅菌乳中乳果糖的最大濃度是600mg/L。我國農(nóng)業(yè)部奶及奶制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心建立了奶產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測數(shù)據(jù)庫,同時結(jié)合國際研究進展綜合分析發(fā)現(xiàn),乳果糖是牛奶熱加工的副產(chǎn)物,結(jié)合糠氨酸含量,能夠科學(xué)區(qū)分生乳、巴氏殺菌乳、滅菌乳和復(fù)原乳,是規(guī)范奶產(chǎn)品市場的科學(xué)指標(biāo)。農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)NYT939-2016巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳中復(fù)原乳的鑒定以乳果糖和糠氨酸的比值判定巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳中是否含有復(fù)原乳,并
【參考文獻】:
期刊論文
[1]用乳果糖、莫沙必利聯(lián)合生物反饋療法對老年功能性便秘患者進行治療的效果分析[J]. 黨雅榮,秦慧. 當(dāng)代醫(yī)藥論叢. 2019(21)
[2]高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定肉制品和調(diào)味料中7種水產(chǎn)品過敏原[J]. 孟佳,古淑青,方真,鈕冰,鄧曉軍,郭德華,朱堅,韓芳. 色譜. 2019(07)
[3]酶聯(lián)免疫法檢測奶粉樣本中的乳鐵蛋白及其均勻度的探索[J]. 鄭云鵬,趙紅杰,郭靖宇,呂肖楠. 中國乳品工業(yè). 2019(06)
[4]基于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的肉類特征肽段鑒別及摻假測定[J]. 古淑青,詹麗娜,趙超敏,鄭江,蔡一村,鄧曉軍. 色譜. 2018(12)
[5]高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定乳制品中的莫奈太爾及其代謝物[J]. 吳映璇,林峰,陳思敏. 食品科學(xué). 2019(10)
[6]高效液相色譜蒸發(fā)光散射檢測法測定乳制品中乳果糖[J]. 劉萌萌,宋戈. 中國乳品工業(yè). 2018(03)
[7]酶聯(lián)免疫吸附法快速檢測嬰兒配方奶粉中乳鐵蛋白含量[J]. 吳春香,劉志楠,趙源,宋曉東,喻東威,劉萍萍,王俊英,莎日娜,張利珍. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報. 2018(04)
[8]超高效液相色譜-四極桿/靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜檢測食品中的牛奶過敏原酪蛋白[J]. 詹麗娜,陳沁,古淑青,鄧曉軍. 色譜. 2017(04)
[9]高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法與酶法檢測UHT滅菌乳中乳果糖含量的對比研究[J]. 劉洋,岳虹,趙貞,劉麗君,李翠枝,邵建波. 乳業(yè)科學(xué)與技術(shù). 2017(01)
[10]乳果糖聯(lián)合雙歧桿菌四聯(lián)活菌片對慢性重型乙型肝炎患者腸黏膜屏障功能的保護作用[J]. 厲慧琴. 中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2016(04)
碩士論文
[1]牛奶中乳果糖的研究及檢測方法的開發(fā)[D]. 田瑤.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
本文編號:3340093
【文章來源】:上海大學(xué)上海市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:88 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
牛乳鐵蛋白空間結(jié)構(gòu)[4]
上海大學(xué)碩士學(xué)位論文7圖1-2β-半乳糖苷酶催化乳糖轉(zhuǎn)化為乳果糖的反應(yīng)[45]Fig.1-2β-galactosidase-catalyzedtransgalactosylationreactionoflactosetolactulose[45]表1-1乳果糖、乳糖化合物信息Table1-1Informationoflactuloseandlactose中文通用名英文通用名CAS號分子量分子式結(jié)構(gòu)式理化性質(zhì)乳果糖Lactulose4618-18-2243.2C12H22O11白色不規(guī)則的粉末,易溶于水。乳糖Lactose5989-81-1243.2C12H22O11白色晶體或結(jié)晶粉末,微溶于乙醇,溶于乙醚和氯仿。農(nóng)業(yè)部奶及奶制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心建立了奶產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測數(shù)據(jù)庫,同時結(jié)合國際研究進展綜合分析發(fā)現(xiàn),乳果糖是牛奶熱加工的副產(chǎn)物,結(jié)合糠氨酸含量,能夠科學(xué)區(qū)分生乳、巴氏殺菌乳、滅菌乳和復(fù)原乳,是規(guī)范奶產(chǎn)品市場的科學(xué)指標(biāo)[45-58]。美國[49]、CAC[50]、歐盟[51]等均明確規(guī)定了巴氏殺菌乳和滅菌乳的工藝條件。牛奶中常見的熱加工工藝見表
上海大學(xué)碩士學(xué)位論文12定量限較高。Yuan等[88]基于特征肽ETTVFENLPEK定量牛乳鐵蛋白,經(jīng)Blast表明該肽段非牛乳鐵蛋白特征肽段,還存在于羊奶中。Chen等[89]結(jié)合UPLC-Q-TOF-MS和CESI-Q-TOF-MS兩種方法檢測牛乳鐵蛋白肽段,有效展現(xiàn)乳鐵蛋白序列,對特征肽段的搜尋提供一定幫助,但未進行乳鐵蛋白的定量研究。因此,LC-MS/MS方法測定蛋白含量的關(guān)鍵是找出酶解后肽段的特異性,先采用高分辨質(zhì)譜對蛋白標(biāo)準(zhǔn)品及實際樣品酶解后肽段進行全掃,通過匹配數(shù)據(jù)庫確證蛋白,獲得特征肽段,進一步建立肽段的多反應(yīng)監(jiān)測方法(圖1-3)[90-92]。圖1-3特征肽段的選擇Fig.1-3Selectionofmarkerpeptides3.2乳品中乳果糖的檢測方法乳果糖可作為衡量巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳等熱處理程度的敏感指標(biāo),鑒別各種不同加工工藝液態(tài)乳。這一指標(biāo)早已得到國際認(rèn)可,歐洲現(xiàn)行法規(guī)規(guī)定經(jīng)熱處理的乳品必須滿足食品衛(wèi)生要求,該法規(guī)制定了巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳的溫度和時間條件。巴氏殺菌乳可通過短時間內(nèi)高溫處理(至少72℃加熱15s)、低溫處理長時間段(至少63℃加熱30min)或者其他等效的時間-溫度處理情況;UHT滅菌乳可通過短時間內(nèi)超高溫處理(至少135℃以上保持3-5s)。根據(jù)歐盟和國際乳業(yè)聯(lián)盟(InternationalDairyFederation,IDF)的規(guī)定將UHT滅菌乳中乳果糖的最大濃度是600mg/L。我國農(nóng)業(yè)部奶及奶制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心建立了奶產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測數(shù)據(jù)庫,同時結(jié)合國際研究進展綜合分析發(fā)現(xiàn),乳果糖是牛奶熱加工的副產(chǎn)物,結(jié)合糠氨酸含量,能夠科學(xué)區(qū)分生乳、巴氏殺菌乳、滅菌乳和復(fù)原乳,是規(guī)范奶產(chǎn)品市場的科學(xué)指標(biāo)。農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)NYT939-2016巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳中復(fù)原乳的鑒定以乳果糖和糠氨酸的比值判定巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳中是否含有復(fù)原乳,并
【參考文獻】:
期刊論文
[1]用乳果糖、莫沙必利聯(lián)合生物反饋療法對老年功能性便秘患者進行治療的效果分析[J]. 黨雅榮,秦慧. 當(dāng)代醫(yī)藥論叢. 2019(21)
[2]高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定肉制品和調(diào)味料中7種水產(chǎn)品過敏原[J]. 孟佳,古淑青,方真,鈕冰,鄧曉軍,郭德華,朱堅,韓芳. 色譜. 2019(07)
[3]酶聯(lián)免疫法檢測奶粉樣本中的乳鐵蛋白及其均勻度的探索[J]. 鄭云鵬,趙紅杰,郭靖宇,呂肖楠. 中國乳品工業(yè). 2019(06)
[4]基于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的肉類特征肽段鑒別及摻假測定[J]. 古淑青,詹麗娜,趙超敏,鄭江,蔡一村,鄧曉軍. 色譜. 2018(12)
[5]高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定乳制品中的莫奈太爾及其代謝物[J]. 吳映璇,林峰,陳思敏. 食品科學(xué). 2019(10)
[6]高效液相色譜蒸發(fā)光散射檢測法測定乳制品中乳果糖[J]. 劉萌萌,宋戈. 中國乳品工業(yè). 2018(03)
[7]酶聯(lián)免疫吸附法快速檢測嬰兒配方奶粉中乳鐵蛋白含量[J]. 吳春香,劉志楠,趙源,宋曉東,喻東威,劉萍萍,王俊英,莎日娜,張利珍. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報. 2018(04)
[8]超高效液相色譜-四極桿/靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜檢測食品中的牛奶過敏原酪蛋白[J]. 詹麗娜,陳沁,古淑青,鄧曉軍. 色譜. 2017(04)
[9]高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法與酶法檢測UHT滅菌乳中乳果糖含量的對比研究[J]. 劉洋,岳虹,趙貞,劉麗君,李翠枝,邵建波. 乳業(yè)科學(xué)與技術(shù). 2017(01)
[10]乳果糖聯(lián)合雙歧桿菌四聯(lián)活菌片對慢性重型乙型肝炎患者腸黏膜屏障功能的保護作用[J]. 厲慧琴. 中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2016(04)
碩士論文
[1]牛奶中乳果糖的研究及檢測方法的開發(fā)[D]. 田瑤.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
本文編號:3340093
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