木果楝（Xylocarpus granatum Koenig）為楝科木果楝屬喬木或灌木,是紅樹林主要樹種之一,分布于印度、越南、中國和馬來西亞沿海地帶,在我國只有海南省有生長。木果楝作為民間藥物,主要用來治療痢疾、霍亂、發(fā)熱以及用作抗蟲劑。國內(nèi)外學者對木果楝化學成分進行了系統(tǒng)的研究,而木果楝內(nèi)生真菌相關(guān)研究報道較少,為了進一步開發(fā)和利用瀕危木果楝資源,本文以木果楝內(nèi)生真菌作為研究對象,期望從中得到結(jié)構(gòu)新穎、活性顯著的先導化合物。本論文以兩株海南藥用紅樹林來源的內(nèi)生真菌Talaromyces flavus TGGP35和Phomopsis sp.MGF222為研究對象,綜合運用現(xiàn)代色譜分離方法和鑒定技術(shù)從其次級代謝產(chǎn)物中分離并鑒定了57個單體化合物的結(jié)構(gòu)。從T.flavus TGGP35中分離得到42個單體化合物（1-42）:11個異香豆素類化合物（1-11）,3個混元萜類化合物（12-14）,5個內(nèi)酯類化合物（15-19）,4個甾酮類化合物（20-23）,7個苯類衍生物（24-30）,7個含氮類化合物（31-37）,5個其它類化合物（38-42）;其中1和2為新化合物。從Phomops... 

【文章來源】：海南大學海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

菌株TGGP35（左）與菌株MGF222（右）的形態(tài)特征

海南大學碩士學位論文2.3木果楝來源內(nèi)生真菌T.flavusTGGP35次級代謝產(chǎn)物研究2.3.1菌株發(fā)酵菌株T.flavusTGGP35經(jīng)過活化后，接種到液體培養(yǎng)基（300mL/1000mL）中以獲得種子培養(yǎng)液，恒溫（28℃）震蕩培養(yǎng)72h。采用大米海鹽固體培養(yǎng)基進行發(fā)酵培養(yǎng)（每個三角瓶中含大米60mL、65mL海水、1.3g葡萄糖、200mL蒸餾水）。高溫滅菌后，在紫外滅菌30min的超凈工作臺上，使用移液槍將5mL種子液分別加入到培養(yǎng)基中，室溫靜置發(fā)酵培養(yǎng)25天。圖2-2菌株TGGP35發(fā)酵產(chǎn)物HPLC指紋圖譜Fig.2-2HPLCfingerprintoffermentationproductfromT.flavusTGGP352.3.2菌株發(fā)酵產(chǎn)物的提取與分離將真菌T.flavusTGGP35發(fā)酵得到的菌絲體用乙酸乙酯（浸沒即可）進行浸泡三次，每次72小時，將萃取物進行濃縮合并，稱量得到180g總浸膏。將浸膏與100-200目的正向硅膠(約為浸膏質(zhì)量的2倍)混合充分碾磨，以石油醚-乙酸乙酯(VPE:VEtOAc=100:0-0:100）和乙酸乙酯-甲醇（VEtOAc:VMeOH=100:0-0:100）為洗脫劑，洗脫劑以2極性從小到大的梯度進行減壓柱層析，經(jīng)TLC點板后合并得到9個組分(Fr.1-Fr.9)。Fr.4經(jīng)過正向硅膠柱，經(jīng)TLC點板合并得到4個組分Fr.4.1-Fr.4.4。Fr.4.1經(jīng)ODS梯度洗脫得到Fr.4.1.1和Fr.4.1.2，F(xiàn)r.4.1.1經(jīng)HPLC(VMeOH:VH2O=75:25,流速:2mL/min)純化得到化合物22(12.1mg)和29(15.4mg)，F(xiàn)r.4.1.2經(jīng)HPLC(VCN:VH2O=72:28)純化得到化合物39(5.2mg)；Fr.4.2經(jīng)ODS梯度洗脫得到Fr.4.2.1和Fr.4.2.2，F(xiàn)r.4.2.1經(jīng)HPLC(VMeOH:VH2O=69:31)得到化合物23(2.9mg)，F(xiàn)r.4.2.2經(jīng)HPLC(VMeOH:VH2O=65:35)純化得到化合物3(6mg),16(9mg),25(3mg),42(3.4mg)；Fr.4.313

海南大學碩士學位論文圖2-9菌株MGF222發(fā)酵產(chǎn)物HPLC指紋圖譜Fig.2-9HPLCfingerprintoffermentationproductfromPhomopsissp.MGF2222.4.2菌株發(fā)酵產(chǎn)物的提取與分離將真菌Phomopsissp.MGF222發(fā)酵得到的菌絲體用乙酸乙酯（具體步驟見2.3.2節(jié)）稱量得到10.2g總浸膏。真菌Phomopsissp.MGF222經(jīng)過減壓柱層析，經(jīng)TLC點板合并共得到7個組分(Fr.1-Fr.7)（具體操作步驟見2.3.2節(jié)）。分離流程圖見下頁：47

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3313052