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金顆粒和磁珠構(gòu)建SERS傳感用于豬流行性腹瀉病毒的檢測(cè)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-05-22 02:03
  豬流行性腹瀉病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是六大豬冠狀病毒之一,仔豬感染致死率可高達(dá)100%。該病毒在蝙蝠等野生動(dòng)物體內(nèi)、在臨床癥狀消失數(shù)周的豬欄中亦有發(fā)現(xiàn),說明其傳播途徑廣,潛伏時(shí)間長(zhǎng)。試紙條和酶聯(lián)免疫吸附(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)存在定量困難或假陽性問題。因此,開發(fā)便攜、精確的PEDV檢測(cè)方法,對(duì)于解決食品和環(huán)境問題十分有意義。表面增強(qiáng)拉曼散射(Surface enhanced Raman Scattering,SERS)具有指紋圖譜、免水干擾等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品安全和生物分析等領(lǐng)域。本研究以“三明治”夾心傳感模型為基礎(chǔ),以生物素功能化的金納米粒子(Bio-Au NP)和負(fù)載金納米粒子的磁珠(Magnetic bead modified with gold nanoparticles,MB@Au NP)構(gòu)建SERS信號(hào)探針,分別結(jié)合鏈霉親和素-生物素(SA-Bio)放大系統(tǒng)和磁分離富集技術(shù),設(shè)計(jì)了兩種分別檢測(cè)PEDV抗體的SERS傳感平臺(tái)。本文研究主要內(nèi)容和結(jié)果如... 

【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 PEDV的歷史與危害
    1.2 PEDV的檢測(cè)方法
        1.2.1 傳統(tǒng)的PEDV檢測(cè)方法
        1.2.2 近來的納米分析方法檢測(cè)PEDV
    1.3 SERS概述
        1.3.1 SERS的發(fā)展、機(jī)理和優(yōu)勢(shì)
        1.3.2 SERS探針
    1.4 SERS的分析檢測(cè)應(yīng)用
        1.4.1 SERS檢測(cè)離子、分子
        1.4.2 SERS檢測(cè)生物標(biāo)志物
        1.4.3 SERS檢測(cè)病毒
    1.5 論文設(shè)計(jì)思路和技術(shù)路線圖
        1.5.1 設(shè)計(jì)思路
        1.5.2 技術(shù)路線圖
第二章 金顆粒信號(hào)標(biāo)簽(AuNP tag)結(jié)合鍍金玻片傳感平臺(tái)用于PEDV的檢測(cè)
    2.1 前言
    2.2 主要儀器與試劑
        2.2.1 主要儀器
        2.2.2 主要試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 AuNP tag制備及傳感平臺(tái)構(gòu)建
        2.3.2 AuNP tag制備過程的表征實(shí)驗(yàn)
        2.3.3 可行性實(shí)驗(yàn)
        2.3.4 條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
        2.3.5 傳感器中單一器件缺失實(shí)驗(yàn)
        2.3.6 傳感平臺(tái)信號(hào)空間穩(wěn)定性試驗(yàn)
        2.3.7 線性實(shí)驗(yàn)
        2.3.8 特異性實(shí)驗(yàn)
        2.3.9 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 AuNP tag制備過程的表征
        2.4.2 實(shí)驗(yàn)可行性驗(yàn)證
        2.4.3 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化
        2.4.4 每個(gè)傳感器件對(duì)SERS強(qiáng)度影響
        2.4.5 信號(hào)均一性
        2.4.6 線性結(jié)果
        2.4.7 特異性結(jié)果
        2.4.8 血清樣品中的Ab_1加標(biāo)回收
    2.5 本章小結(jié)
第三章 磁珠信號(hào)標(biāo)簽(MB tag)結(jié)合玻碳電極傳感平臺(tái)用于PEDV的檢測(cè)
    3.1 前言
    3.2 主要儀器和試劑
        3.2.1 主要儀器
        3.2.2 主要試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 MB tag及傳感平臺(tái)構(gòu)建過程
        3.3.2 可行性和信標(biāo)對(duì)比實(shí)驗(yàn)
        3.3.3 信號(hào)來源驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
        3.3.4 條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
        3.3.5 無探針傳感平臺(tái)信號(hào)的空間分布實(shí)驗(yàn)
        3.3.6 完整傳感平臺(tái)信號(hào)的空間分布實(shí)驗(yàn)
        3.3.7 傳感平臺(tái)信號(hào)隨時(shí)間變化實(shí)驗(yàn)
        3.3.8 單個(gè)器件缺失實(shí)驗(yàn)
        3.3.9 線性實(shí)驗(yàn)
        3.3.10 特異性實(shí)驗(yàn)
        3.3.11 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 MB tag的表征
        3.4.2 實(shí)驗(yàn)可行性和優(yōu)勢(shì)
        3.4.3 信號(hào)來源驗(yàn)證
        3.4.4 條件優(yōu)化
        3.4.5 GCE傳感信號(hào)均一性
        3.4.6 完整GCE傳感平臺(tái)信號(hào)均一性
        3.4.7 傳感的信號(hào)重現(xiàn)性
        3.4.8 單一器件缺失證明GSH等的作用
        3.4.9 線性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.10 特異性結(jié)果
        3.4.11 加標(biāo)回收
    3.5 本章小結(jié)
第四章 總結(jié)及展望
    4.1 全文總結(jié)
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉病毒的免疫電鏡診斷的研究[J]. 王繼科,劉長(zhǎng)明,馬思奇,王明,魏鳳祥,于文濤,周金法.  中國(guó)畜禽傳染病. 1991(02)



本文編號(hào):3200771

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