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硫酸馬錢子堿抑菌活性及促成骨細(xì)胞增殖機(jī)理研究

發(fā)布時(shí)間:2021-04-19 16:16
  隨著我國(guó)交通及體育等事業(yè)的不斷發(fā)展,創(chuàng)傷、感染、腫瘤等引起的骨缺損病例逐年增加,臨床上對(duì)骨損傷治療的要求日益迫切。骨損傷治療的藥物主要解決損傷修復(fù)及預(yù)防術(shù)后感染這兩大問(wèn)題,目前臨床用藥雖然療效良好,但受藥理作用單一等因素的影響,需多種藥物聯(lián)合應(yīng)用同時(shí),也增加不良反應(yīng)等用藥風(fēng)險(xiǎn)。若一種藥物既能修復(fù)骨損傷,又能預(yù)防術(shù)后感染,這將為臨床治療骨損傷提供新的思路,F(xiàn)代藥理研究表明,中藥馬錢子提取物具有鎮(zhèn)痛抗炎、抗菌、抗腫瘤及促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖等作用。馬錢子堿作為馬錢子的主要有效成分,是否進(jìn)一步抗臨床耐藥菌及能否促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖?目前尚未深入研究。故本文旨在探索馬錢子堿的硫酸鹽硫酸馬錢子堿(brucine sulfate,BS)的體外抑菌活性及對(duì)成骨細(xì)胞增殖的影響。研究?jī)?nèi)容主要包括以下兩個(gè)方面:第一部分,首先通過(guò)回流、酸提、萃取、純化及結(jié)晶等步驟制備BS,用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)BS進(jìn)行定性及定量分析。其次,采用牛津杯法初步考察BS對(duì)大腸桿菌(E.coli)和金黃色葡萄球菌(S.aureus)抑制作用,比濁法研究BS對(duì)E.coli和S.aureus(標(biāo)準(zhǔn)株及耐藥株)的抑菌濃度曲線及時(shí)間曲線,同... 

【文章來(lái)源】:湘潭大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 細(xì)菌感染及治療
        1.1.1 中藥抑菌的有效部位
        1.1.2 中藥抑菌機(jī)制
    1.2 骨組織損傷及治療
        1.2.1 骨損傷的修復(fù)過(guò)程
        1.2.2 中藥促成骨細(xì)胞增殖機(jī)制
    1.3 馬錢子的研究
        1.3.1 馬錢子的性質(zhì)及應(yīng)用
        1.3.2 馬錢子堿的藥理活性
    1.4 本課題研究思路
第2章 硫酸馬錢子堿的制備及抑菌活性研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 儀器與設(shè)備
        2.1.2 藥品與試劑
        2.1.3 細(xì)菌來(lái)源
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 硫酸馬錢子堿的制備
        2.2.2 硫酸馬錢子堿的鑒定
        2.2.3 硫酸馬錢子堿抑菌作用
    2.3 硫酸馬錢子堿的提取鑒定及抑菌活性的結(jié)果
        2.3.1 硫酸馬錢子堿的鑒定結(jié)果分析
        2.3.2 硫酸馬錢子堿抑菌圈結(jié)果
        2.3.3 硫酸馬錢子堿抑菌濃度曲線
        2.3.4 硫酸馬錢子堿抑菌時(shí)間曲線
        2.3.5 硫酸馬錢子堿抑菌機(jī)制
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第3章 硫酸馬錢子堿促成骨細(xì)胞增殖機(jī)理研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 儀器與耗材
        3.1.2 藥品與試劑
        3.1.3 qPCR主要引物信息
        3.1.4 蛋白免疫印跡主要抗體信息
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 主要溶液配置
        3.2.2 hFOB1.19成骨細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.3 CCK8實(shí)驗(yàn)
        3.2.4 細(xì)胞免疫熒光
        3.2.5 蛋白免疫印跡
        3.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 硫酸馬錢子堿促進(jìn)hFOB1.19成骨細(xì)胞分裂增殖
        3.3.2 硫酸馬錢子堿促進(jìn)β-catenin蛋白累積及入核
        3.3.3 硫酸馬錢子堿上調(diào)Wnt/β-catenin信號(hào)通路蛋白表達(dá)
        3.3.4 硫酸馬錢子堿上調(diào)Wnt/β-catenin信號(hào)通路基因表達(dá)
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
第4章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷、碩士期間科研成果



本文編號(hào):3147888

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