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Box-Behnken響應(yīng)面法優(yōu)化酶法制備α-環(huán)糊精及其分離純化

發(fā)布時間:2021-03-20 13:31
  以α-環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(α-cyclodextrin glycosyltransferase,α-CGTase)為催化劑,研究其作用于馬鈴薯淀粉產(chǎn)出α-環(huán)糊精的酶法生產(chǎn)工藝。通過單因素試驗(yàn)和Box-Behnken中心組合設(shè)計法設(shè)計響應(yīng)面試驗(yàn),分析不同條件對α-環(huán)糊精轉(zhuǎn)化率的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)α-CGTase的反應(yīng)溫度為50℃,pH值為5.5時,α-CGTase呈現(xiàn)最好的酶活性質(zhì),α-環(huán)糊精的轉(zhuǎn)化率最高。反應(yīng)體系中加入有機(jī)溶劑正癸醇,底物濃度為1.0%,加酶量為200 U/g淀粉,反應(yīng)時間為14 h時,α-環(huán)糊精的轉(zhuǎn)化率可達(dá)40.6%。通過水蒸氣蒸餾法進(jìn)一步分離純化α-環(huán)糊精產(chǎn)物,經(jīng)高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC)鑒定分析,轉(zhuǎn)化率可達(dá)到20%~40%,純度達(dá)到75%。 

【文章來源】:食品研究與開發(fā). 2020,41(13)北大核心

【文章頁數(shù)】:7 頁

【部分圖文】:

Box-Behnken響應(yīng)面法優(yōu)化酶法制備α-環(huán)糊精及其分離純化


加酶量對α-環(huán)糊精轉(zhuǎn)化率的影響

環(huán)糊精,反應(yīng)時,轉(zhuǎn)化率


反應(yīng)時間對α-環(huán)糊精轉(zhuǎn)化率的影響見圖6。由圖6可以看出,隨著反應(yīng)時間的延長α-環(huán)糊精的轉(zhuǎn)化率先上升后下降,在反應(yīng)14 h時,α-環(huán)糊精的轉(zhuǎn)化率最高,為34.1%。14 h后,α-環(huán)糊精的轉(zhuǎn)化率大幅降低,其原因可能是隨著反應(yīng)時間的延長,α-環(huán)糊精逐漸產(chǎn)生了分解。因此,選取14 h為最佳反應(yīng)時間。

環(huán)糊精,有機(jī)溶劑,轉(zhuǎn)化率,種類


有機(jī)溶劑種類對α-環(huán)糊精轉(zhuǎn)化率的影響見圖7。醇類與環(huán)糊精能夠形成包合物沉淀,促進(jìn)反應(yīng)向生成環(huán)糊精的方向不斷進(jìn)行,加快反應(yīng)速度,提高α-環(huán)糊精的轉(zhuǎn)化率[16]。試驗(yàn)中分別加入了有機(jī)溶劑乙醇、異丙醇、正丁醇和正癸醇,從圖7可以看出,反應(yīng)體系中加入正癸醇后,α-環(huán)糊精的轉(zhuǎn)化率最高,為39.7%。另外由于可溶的醇類會造成后期提取上的困難,因此綜合分析,選用正癸醇作為生產(chǎn)α-環(huán)糊精的有機(jī)溶劑。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]響應(yīng)面分析法優(yōu)化α-環(huán)糊精的酶轉(zhuǎn)化工藝[J]. 陳曉彤,黃立萍,孫謐,郝建華.  漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2018(05)
[3]α-環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá)及酶法制備AA-2G條件優(yōu)化[J]. 邢琳,張秀華,釗倩倩,劉飛,顏震,陳勉,侯重文,朱希強(qiáng),凌沛學(xué).  中國生化藥物雜志. 2016(11)
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[5]環(huán)糊精在化妝品領(lǐng)域中的應(yīng)用研究[J]. 李姝靜,周自若,鄧小鋒,羅思琦.  應(yīng)用化工. 2016(10)
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[7]環(huán)糊精的結(jié)構(gòu)特性及其在環(huán)保領(lǐng)域的研究現(xiàn)狀[J]. 張洪偉.  環(huán)境與生活. 2014(22)
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碩士論文
[1]α-環(huán)糊精以及γ-環(huán)糊精的酶轉(zhuǎn)化工藝研究[D]. 王寧.江南大學(xué) 2010
[2]環(huán)糊精測定方法及其制備工藝對產(chǎn)物組成影響的研究[D]. 劉虹.江南大學(xué) 2008



本文編號:3091083

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