一直以來(lái),蛋白質(zhì)都是生物體生命活動(dòng)的核心物質(zhì),在生物體內(nèi)扮演著催化、運(yùn)輸、免疫調(diào)節(jié)等角色。也正因此,蛋白質(zhì)的分離與檢測(cè)越來(lái)越受人關(guān)注。傳統(tǒng)單一的蛋白質(zhì)檢測(cè)手段由于其特異性差、操作繁瑣等局限性的存在,促使越來(lái)越多的科研工作者投入到蛋白質(zhì)檢測(cè)領(lǐng)域中�？捡R斯亮藍(lán)蛋白質(zhì)檢測(cè)法由于其檢測(cè)速度快等優(yōu)點(diǎn)而備受關(guān)注,但色素與蛋白質(zhì)作用時(shí)所缺少的特異性作用是該方法的不足之處。而常用蛋白質(zhì)檢測(cè)手段中,具有良好特異性的免疫印跡法又由于抗體的制備與保存問(wèn)題導(dǎo)致成本過(guò)高、推廣困難。源于生物免疫作用的分子印跡技術(shù)能夠制備出名為分子印跡聚合物的抗體類似物,利用該技術(shù)制備聚合物具有操作簡(jiǎn)便、材料易保存等優(yōu)點(diǎn)。該技術(shù)的出現(xiàn)能夠很好的解決免疫印跡法的不足之處。因此,為了將兩種技術(shù)結(jié)合起來(lái),本文研究了考馬斯亮藍(lán)與蛋白質(zhì)的作用機(jī)理,并用于指導(dǎo)考馬斯亮藍(lán)蛋白檢測(cè)法與分子印跡技術(shù)的聯(lián)用,制備出分子印跡顯色水凝膠。首先,我們研究了pH對(duì)考馬斯亮藍(lán)溶液顏色、吸收峰及其與蛋白質(zhì)作用的影響。通過(guò)改變考馬斯亮藍(lán)與蛋白質(zhì)的濃度,考察顯色的規(guī)律。證明了考馬斯亮藍(lán)分子存在的三種形態(tài)均能與牛血清白蛋白發(fā)生作用,作用后得到的締合物吸收峰在610 n... 

【文章來(lái)源】：福州大學(xué)福建省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２考馬斯亮藍(lán)分子結(jié)構(gòu)式??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃｏｏｍａｓｓｉｅ?ｂｒｉｌｌｉａｎｔ?ｂｌｕｅ??

圳、傳感器疾病檢測(cè)［７１，７＼人造抗體［７３，７？等各個(gè)領(lǐng)域。??分子印跡聚合物的基本制備過(guò)程［７５］可用圖１－３表示。首先，讓模板分子與功??能單體預(yù)組裝；其次，加入適當(dāng)?shù)慕宦?lián)劑并引發(fā)單體間的聚合；之后用適當(dāng)?shù)南??脫劑破壞模板分子與功能單體間的相互作用，將模板分子從聚合物上洗脫下來(lái)，??便可得到分子印跡聚合物。ＭＩＰｓ可選擇性吸附目標(biāo)分子，而且可以能夠反復(fù)洗??脫與再次吸附，次數(shù)由材料的性質(zhì)決定。??？?ＳｒｆＩ．ｗＬ．ｌｙ?Ａ??＾?ｍＷ?■??Ｔｅｎ＾ｌａｌｅ?ｊ??———－■?Ｗ??ｋＪ?ｍＺＭ??圖１－３分子印跡技術(shù)原理示意圖??Ｆｉｇ．?１－３?Ｔｈｅ?ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｏｆ?ｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｉｍｐｒｉｎｔｉｎｇ?ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ??分子印跡技術(shù)按單體與模板分子在溶劑中的作用方式的不同，大致可以分為??四種，共價(jià)鍵法、非共價(jià)鍵法和半共價(jià)鍵法。??８??

?蛋白印跡考馬斯亮藍(lán)顯色水凝膠對(duì)目標(biāo)分子的特異性識(shí)別???１）共價(jià)鍵法又稱為預(yù)組裝法（見(jiàn)圖１－４），由＼＾１扭７６］團(tuán)隊(duì)提出。功能單體??與模板分子之間的結(jié)合位點(diǎn)依靠共價(jià)鍵完成，聚合后，再斷裂共價(jià)鍵以洗脫模板??分子。共價(jià)鍵法所用的物質(zhì)有硼酸酯、縮醛酮、螯合物、席夫堿、酯等［７７］。該??方法的不足之處在于識(shí)別能力不高，不適用于快速識(shí)別。因?yàn)楣矁r(jià)鍵的作用力強(qiáng)、??解離速度慢，所形成復(fù)合物的過(guò)程速度緩慢。Ｇｕ［７８］等以多巴胺為模板，將聚合??物涂于玻璃碳電極上，通過(guò)硼氫化學(xué)鍵與空間位阻的雙識(shí)別性能來(lái)設(shè)計(jì)分子印跡??傳感器，并將該傳感器成功應(yīng)用于檢測(cè)人血漿樣本中的多巴胺。??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]牛血清白蛋白表面印跡材料的制備及其大分子識(shí)別特性之研究[D]. 史楠.中北大學(xué) 2015

碩士論文
[1]分子印跡技術(shù)及其研究進(jìn)展[D]. 韓霜.東北石油大學(xué) 2014



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