生物傳感與生物分析是通過特定的生物識(shí)別元件和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方式將目標(biāo)物的識(shí)別轉(zhuǎn)換為可測(cè)量的信號(hào)報(bào)告出來,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)生物分子含量或功能的評(píng)估,不僅推進(jìn)了分析化學(xué)與生命科學(xué)的科學(xué)研究,而且大大的推動(dòng)了以分子特征變化為基礎(chǔ)的臨床診斷的發(fā)展。由于具有多元化的識(shí)別機(jī)制、靈活的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和信號(hào)輸出方式,一系列多重功能化的核酸探針已經(jīng)被構(gòu)建,并在生物傳感與生物分析領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。在眾多信號(hào)輸出方式中,熒光信號(hào)由于靈敏性高以及便于細(xì)胞內(nèi)生物分子的原位分析而受到研究者們的重視。本論文致力于基于新型功能化核酸探針的設(shè)計(jì)及其熒光生物傳感應(yīng)用,通過對(duì)已經(jīng)報(bào)道的核酸探針進(jìn)行總結(jié),發(fā)現(xiàn)隨著核酸探針的深入應(yīng)用,逐漸的暴露出了一些不足和新的挑戰(zhàn):1)如何克服需要熒光團(tuán)和淬滅團(tuán)雙重標(biāo)記或染料的非特異性吸附引起的假陽性響應(yīng);2)如何避免一個(gè)傳感系統(tǒng)中需要設(shè)計(jì)多個(gè)核酸探針及伴隨的非特異性擴(kuò)增問題;3)如何滿足復(fù)雜體系中痕量生物分子的分析,尤其是單細(xì)胞水平的分析;4)如何構(gòu)建活細(xì)胞內(nèi)生物分子響應(yīng)的邏輯分析平臺(tái),用于不同表型癌細(xì)胞的準(zhǔn)確分型?本論文基于以上問題和挑戰(zhàn),開發(fā)了一系列新型的功能化核酸探針,并將其用于疾病相關(guān)的DNA片段... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：167 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．２分子信標(biāo)的工作原理６??

取代探針??取代探針通常是由兩條互補(bǔ)的ＤＮＡ序列組成的雙鏈雜交體，如圖１．５光團(tuán)和淬滅團(tuán)分別標(biāo)記在兩條ＤＮＡ序列的末端，并且相互靠近，熒狀態(tài)。當(dāng)目標(biāo)物存在時(shí)，目標(biāo)序列與熒光團(tuán)標(biāo)記的ＤＮＡ序列雜交，通，形成更穩(wěn)定的雙鏈雜交體，同時(shí)將淬滅團(tuán)標(biāo)記的ＤＮＡ序列置換下光團(tuán)和淬滅團(tuán)遠(yuǎn)離，熒光恢復(fù)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)序列的檢測(cè)８，３７，３８。??取代探針的工作原理是基于競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，通過更穩(wěn)定的復(fù)合物的形成，改構(gòu)成，產(chǎn)生信號(hào)。因此，人們將核酸適體與特定分子的識(shí)別與鏈取代探理結(jié)合，開發(fā)了核酸適體鏈取代探針，并將其用于蛋白質(zhì)、小分子等生檢測(cè)Ｉ２，３Ｗ２。如圖１．６所示，Ｌｉ課題組１２設(shè)計(jì)了一種核酸適體鏈取代探針了該探針能夠用于蛋白質(zhì)和小分子的檢測(cè)。該探針由三條ＤＮＡ鏈組核酸適體序列和延伸序列組成，適體序列與另一條淬滅團(tuán)標(biāo)記的ＤＮＡ

取代探針??取代探針通常是由兩條互補(bǔ)的ＤＮＡ序列組成的雙鏈雜交體，如圖１．５光團(tuán)和淬滅團(tuán)分別標(biāo)記在兩條ＤＮＡ序列的末端，并且相互靠近，熒狀態(tài)。當(dāng)目標(biāo)物存在時(shí)，目標(biāo)序列與熒光團(tuán)標(biāo)記的ＤＮＡ序列雜交，通，形成更穩(wěn)定的雙鏈雜交體，同時(shí)將淬滅團(tuán)標(biāo)記的ＤＮＡ序列置換下光團(tuán)和淬滅團(tuán)遠(yuǎn)離，熒光恢復(fù)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)序列的檢測(cè)８，３７，３８。??取代探針的工作原理是基于競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，通過更穩(wěn)定的復(fù)合物的形成，改構(gòu)成，產(chǎn)生信號(hào)。因此，人們將核酸適體與特定分子的識(shí)別與鏈取代探理結(jié)合，開發(fā)了核酸適體鏈取代探針，并將其用于蛋白質(zhì)、小分子等生檢測(cè)Ｉ２，３Ｗ２。如圖１．６所示，Ｌｉ課題組１２設(shè)計(jì)了一種核酸適體鏈取代探針了該探針能夠用于蛋白質(zhì)和小分子的檢測(cè)。該探針由三條ＤＮＡ鏈組核酸適體序列和延伸序列組成，適體序列與另一條淬滅團(tuán)標(biāo)記的ＤＮＡ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Sensitive detection of DNA methyltransferase activity based on rolling circle amplification technology[J]. Pei Liu,Xiao-Hai Yang,Qing Wang,Jing Huang,Jian-Bo Liu,Ying Zhu,Lei-Liang He,Ke-Min Wang.  Chinese Chemical Letters. 2014(07)



本文編號(hào)：2910800