食品污染物嚴(yán)重的威脅著人類的身體健康,同時(shí)食品安全問題也引起了越來越多的關(guān)注,對(duì)食品污染物的檢測(cè)是十分必要的,尋找更靈敏、更快捷、更方便的食品污染物檢測(cè)方法是迫在眉睫的事情。本文構(gòu)建適體傳感器利用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)食品中的污染物。主要檢測(cè)的物質(zhì)是食品中的真菌毒素赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)、食品中殘留的抗生素氯霉素(Chloramphenicol,CAP)以及食品中污染細(xì)菌體內(nèi)的三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)。(1)高效液相色譜法結(jié)合熒光檢測(cè)器檢測(cè)OTA主要利用高效液相色譜法結(jié)合熒光檢測(cè)器(HPLC-FLD)檢測(cè)OTA,首先用HPLC面積歸一化法對(duì)OTA的標(biāo)準(zhǔn)品建立峰面積(μV)與OTA濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過C18固相萃取小柱對(duì)經(jīng)過前處理啤酒中加標(biāo)OTA樣品進(jìn)行純化提取,進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明:峰面積和OTA濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,最低檢測(cè)限為0.1 ng/mL,平均的回收率在98.3%~102.1%之間,具有良好的精密度和靈敏度。(2)金標(biāo)記羥胺放大化學(xué)發(fā)光檢測(cè)OTA利用納米金催化魯米諾化學(xué)發(fā)光體系起到增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光信號(hào)的作用,建立納米金-適體生物傳感器,以及NH_2OH/HAuCl_4對(duì)傳感器具有放大作用,從而對(duì)OTA進(jìn)行間接的定量檢測(cè)。在優(yōu)化的條件下,建立化學(xué)發(fā)光值和OTA濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線,同時(shí)對(duì)生物傳感器進(jìn)行了特異性考察,最后將生物傳感器用來檢測(cè)加標(biāo)啤酒和谷物玉米中的OTA。結(jié)果表明:化學(xué)發(fā)光值(△CL)和OTA濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,最低檢測(cè)限為1.58×10~(-3) ng/m L,而且生物傳感器的特異性強(qiáng),平均的回收率在95.9%~107.7%之間。相比第二章的HPLC法檢測(cè)OTA,本實(shí)驗(yàn)方法的線性范圍和最低檢測(cè)限都優(yōu)于HPLC,且本實(shí)驗(yàn)方法中實(shí)際的食品樣品前處理比較簡單,節(jié)約了大量的時(shí)間和成本。(3)基于適體傳感器無標(biāo)記化學(xué)發(fā)光同時(shí)檢測(cè)ATP和CAP本實(shí)驗(yàn)利用羧基磁性微球和羧基聚苯乙烯微球建立ATP/CAP適體傳感器,用于ATP/CAP混合物的檢測(cè)。同時(shí)對(duì)ATP/CAP適體傳感器進(jìn)行了特異性考察,最后將ATP/CAP適體傳感器應(yīng)用于加標(biāo)牛奶和啤酒中的ATP和CAP檢測(cè)。結(jié)果表明:化學(xué)發(fā)光值(△CL)和ATP和CAP濃度都呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,ATP和CAP的最低檢測(cè)限為3.76×10~(-8) mol/L和2.48×10~(-8) mol/L。本方法對(duì)ATP和CAP具有較強(qiáng)的特異性,平均加標(biāo)回收率在95.1%~106.3%之間。
【學(xué)位單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：TS207.5;O657.3
【部分圖文】：

第一章 緒論1.5 化學(xué)發(fā)光技術(shù)在食品污染中的研究與應(yīng)用1.5.1 化學(xué)發(fā)光化學(xué)發(fā)光（Chemiluminescence，CL）是指化學(xué)物質(zhì)受熱產(chǎn)生熱輻射而產(chǎn)生的發(fā)光。其發(fā)光機(jī)理主要是[54]：在化學(xué)反應(yīng)過程中體系內(nèi)的反應(yīng)物、中間體或熒光物質(zhì)等分子吸收了反應(yīng)所釋放的能量，這些物質(zhì)分子由基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)后又從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)的過程中能量被以光輻射的形式釋放出來，出現(xiàn)了化學(xué)發(fā)光，過程主要如圖 1.4 所示。

第一章 緒論1.5.2 常見的化學(xué)發(fā)光體系及其應(yīng)用（1）魯米諾化學(xué)發(fā)光體系及其應(yīng)用魯米諾（Luminol），又稱發(fā)光氨，化學(xué)結(jié)構(gòu)為 5-氨基-2,3-二氫-1,4-二雜氮萘二酮，是發(fā)光效率較高、容易合成以及無毒無害的環(huán)境友好型化學(xué)發(fā)光試劑。由于魯米諾以及其相關(guān)物質(zhì)在不同反應(yīng)介質(zhì)中產(chǎn)生差異較大的化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象，關(guān)于魯米諾產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的機(jī)理說法比較多，比較簡單統(tǒng)一的機(jī)理是[56]：在堿性條件下，魯米諾以陰離子的形式存在溶液中，當(dāng)加入氧化劑時(shí)，魯米諾陰離子被氧化成陰離子自由基，然后自由基和溶液中的活性氧生成六元環(huán)過氧化物，當(dāng)六元環(huán)過氧化物分解時(shí)，生成激發(fā)態(tài)的 3-氨基鄰苯二甲酸根陰離子，激發(fā)態(tài)物質(zhì)返回基態(tài)，產(chǎn)生輻射光和 3-氨基鄰苯二甲酸根陰離子，其化學(xué)發(fā)光反應(yīng)機(jī)理如圖 1.5 所示。

圖 1.12 鳥嘌呤與 PG 化學(xué)發(fā)光反應(yīng)原理圖Figure 1.12 Chemiluminescence mechanism between guanine bases and phenylglyoxal1.6 主要研究內(nèi)容及創(chuàng)新.6.1 主要研究內(nèi)容本文主要的研究內(nèi)容是構(gòu)建適體傳感器利用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)食品中的污。主要檢測(cè)的物質(zhì)是食品中的真菌毒素 OTA、食品中殘留的抗生素氯霉素食品中致病菌體內(nèi)含有的 ATP。實(shí)驗(yàn)主要包括三個(gè)部分：（1）用高效液相色譜法對(duì) OTA 的標(biāo)準(zhǔn)品建立峰面積（μV）與 OTA 濃度準(zhǔn)曲線，然后使用 C18 固相萃取小柱對(duì)啤酒中的 OTA 樣品純化提取，通過液相色譜法進(jìn)行對(duì)加標(biāo)樣品檢測(cè)，計(jì)算加標(biāo)回收率。（2）我們利用金納米粒子可以催化加速魯米諾化學(xué)發(fā)光體系的原理，金納米生物傳感器，再此基礎(chǔ)上加入羥胺/氯金酸在較小粒徑的金納米粒子聚集形成更大顆粒的金粒子，來進(jìn)行化學(xué)發(fā)光放大檢測(cè) OTA。首先，我們
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2866486