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新型SERS納米探針的構(gòu)建及細胞中Caspase-3和CN~-的檢測研究

發(fā)布時間:2020-08-24 15:23
【摘要】:近年來,表面增強拉曼散射(SERS)愈發(fā)的發(fā)展成熟,在化學(xué)、光學(xué)以及生命科學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用也越來越多。SERS技術(shù)可以正確識別分析物或分析物混合物,并具有高靈敏度和選擇性。SERS納米探針,作為新興的光學(xué)納米探針,通過結(jié)合不同類型的金屬納米材料,有機拉曼報告子和功能化部分合成。大量的SERS標(biāo)記的SERS納米探針研究主要應(yīng)用于分子多重檢測或在細胞,組織,微生物和活體水平上的生物成像。因此,SERS是一個真正的多學(xué)科領(lǐng)域交叉的研究,這得益于化學(xué)家、物理學(xué)家以及工程師之間的相互交流。令人興奮的新發(fā)展的呈現(xiàn),也預(yù)示著廣泛利用SERS的巨大潛力,并將促進SERS從實驗室研究轉(zhuǎn)向臨床診斷,生物醫(yī)學(xué)傳感,和現(xiàn)場應(yīng)用。本文制備了兩種不同類型的SERS納米探針,主要開展了以下兩個工作:(1)基于炔基的新型比率型SERS納米探針用于活細胞和組織內(nèi)細胞凋亡因子caspase-3的拉曼成像檢測研究本章成功構(gòu)建了一種基于炔基的SERS納米探針,用于檢測活細胞和組織中的caspase-3,具有高靈敏度和良好的信號重現(xiàn)性;谌不诩毎o默區(qū)(1800~2800 cm-1)的抗干擾能力,選用具有不同拉曼散射信號的炔基分子分別作為拉曼報告分子(標(biāo)記于caspase-3的底物肽鏈)和內(nèi)參分子,并與金納米棒(GNR)自組裝來構(gòu)建獨特的比率型納米探針。被caspase-3特異性識別切割的肽鏈上的分子PEB(3-(4-(2-苯基乙炔基)芐硫基)丙酸)的拉曼信號(2218 cm-1)會減弱,而作為內(nèi)參的炔基分子TPA(4-巰基苯乙炔)的拉曼信號(2027 cm-1)不發(fā)生改變,從而利用兩種炔基拉曼信號強度的比值(I2027/2218)實現(xiàn)對caspase-3的比率型成像檢測。(2)基于氧化石墨烯(GO)/金銀納米顆粒復(fù)合納米材料的的新型SERS復(fù)合納米探針用于CN-的檢測研究本章選擇石墨烯/金銀納米顆粒復(fù)合納米材料作為SERS基底,即通過簡單的GO、氯高鐵血紅素(Hemin)和HAuC14 一鍋合成法即可得到初步探針rGO/Hemin/AuNPs,根據(jù)文獻報道,銀的SERS增強效果遠高于金,但穩(wěn)定性差,故在合成rGO/Hemin/AuNPs的基礎(chǔ)上,在金上包銀,隨后又在銀上包金,最終得到我們的SERS納米探針rGO/Hemin/AuAgAuNPs用于檢測CN-。所制備的SERS納米探針對CN-有很好的響應(yīng),并能實現(xiàn)對其的定量檢測。
【學(xué)位授予單位】:湖南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:O657.37;Q2-33
【圖文】:

拉曼光譜圖,實驗裝置,拉曼效應(yīng),電報


以萬計的美元,而在當(dāng)時Raman的整套裝置計算下來也就200盧比,即大約50美元。逡逑他的整套實驗裝置由五個部分組成:光源汞燈、適宜的光過濾器、玻璃凝縮透鏡、逡逑一燒瓶的苯和一個直視的“口袋”型分光儀。圖1.1和圖1.2分別是他早年間的一些實逡逑驗M設(shè)備。逡逑1928年3月16日,在班加羅爾舉辦的南印度科學(xué)協(xié)會的開幕式上Raman進行了逡逑一個名為“新型輻射”的關(guān)于該項研究的詳細講話。距離首次發(fā)現(xiàn)拉曼效應(yīng)不到三逡逑個周的時間,他闡述了關(guān)于拉曼效應(yīng)的主要特點。整個講話以及苯的拉曼光譜圖逡逑作為印度物理學(xué)雜志的特刊于192邋8年3月31日發(fā)表[3邋]。逡逑1928年3月22日,Raman和Krishnan向Nature雜志發(fā)送了名為“康普頓效應(yīng)的光逡逑學(xué)模擬”的第三份電報,并于5月5日發(fā)表[4]。距離發(fā)送第一次電報僅36天時間,這逡逑也表明Raman的實驗進展及對其結(jié)果的理解程度的速度之快。逡逑I逡逑圖1.1邋Raman的原始實驗裝置逡逑-2-逡逑

拉曼光譜圖,拉曼光譜儀


以萬計的美元,而在當(dāng)時Raman的整套裝置計算下來也就200盧比,即大約50美元。逡逑他的整套實驗裝置由五個部分組成:光源汞燈、適宜的光過濾器、玻璃凝縮透鏡、逡逑一燒瓶的苯和一個直視的“口袋”型分光儀。圖1.1和圖1.2分別是他早年間的一些實逡逑驗M設(shè)備。逡逑1928年3月16日,在班加羅爾舉辦的南印度科學(xué)協(xié)會的開幕式上Raman進行了逡逑一個名為“新型輻射”的關(guān)于該項研究的詳細講話。距離首次發(fā)現(xiàn)拉曼效應(yīng)不到三逡逑個周的時間,他闡述了關(guān)于拉曼效應(yīng)的主要特點。整個講話以及苯的拉曼光譜圖逡逑作為印度物理學(xué)雜志的特刊于192邋8年3月31日發(fā)表[3邋]。逡逑1928年3月22日,Raman和Krishnan向Nature雜志發(fā)送了名為“康普頓效應(yīng)的光逡逑學(xué)模擬”的第三份電報,并于5月5日發(fā)表[4]。距離發(fā)送第一次電報僅36天時間,這逡逑也表明Raman的實驗進展及對其結(jié)果的理解程度的速度之快。逡逑I逡逑圖1.1邋Raman的原始實驗裝置逡逑-2-逡逑

能級躍遷,瑞利散射,拉曼,過程


逡逑頻率,這被稱為反斯托克斯位移,或者上移。具體的能級躍遷如圖1.3所示。逡逑Virtual邋邐r邐逡逑energy逡逑states邋邐j邐邐逡逑八逡逑Vibrational逡逑energy邋states逡逑畫?.邋11邐r.......................-I.......kj逡逑Infrared邐Rayleigh邐Stokes邋Anti-Stokes逡逑absorption邋scattering邐Raman邋Raman逡逑scattering邋scattering逡逑圖1.3拉曼及瑞利散射過程的能級躍遷逡逑對于分子要展現(xiàn)拉曼效應(yīng),必須改變其電偶極子-電極極化率即振動狀態(tài)的振逡逑動坐標(biāo)。拉曼散射的強度與極化率的改變成正比。因此,拉曼光譜,散射強度作逡逑為頻率轉(zhuǎn)移的功能,取決于分子的振動狀態(tài)。逡逑拉曼效應(yīng)是基于樣品的電子云與外部電場之間單色光的相互作用,它可以根逡逑據(jù)分子的極化率在分子內(nèi)產(chǎn)生誘導(dǎo)偶極矩。由于激光不會激發(fā)分子,因此在能級逡逑之間不會有真正的轉(zhuǎn)移[5]。拉曼效應(yīng)不應(yīng)與發(fā)射光(熒光或磷光)混淆,即激發(fā)逡逑電子狀態(tài)的分子發(fā)射光子并返回到基態(tài)電子狀態(tài),在許多情況下是在基態(tài)電子狀逡逑態(tài)勢能面的振動激發(fā)態(tài)。拉曼散射也與紅外(IR)吸收形成鮮明對比

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本文編號:2802626

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