發(fā)布時(shí)間：2020-07-19 01:57

【摘要】：[目的]咖啡以其獨(dú)特的風(fēng)味和功能特性受到越來越多人的喜愛。烘焙溫度及烘焙時(shí)間決定了咖啡的烘焙程度,并對(duì)咖啡風(fēng)味物質(zhì)的生成及變化產(chǎn)生重要影響,咖啡主要烘焙風(fēng)味物質(zhì)是與咖啡風(fēng)味直接相關(guān)且代表性強(qiáng)的香氣成分,本文通過高效液相色譜綜合分析烘焙程度與咖啡主要風(fēng)味物質(zhì)的形成和變化規(guī)律的關(guān)系,并建立優(yōu)化咖啡中綠原酸類、生物胺類及其氨基酸類在不同烘焙溫度下的成分檢測(cè)方法,為系統(tǒng)了解和掌握精品咖啡烘焙工藝提供科學(xué)參考。[方法]首先,對(duì)高效液相色譜條件進(jìn)行優(yōu)化。其次,優(yōu)化了樣品的前處理方法,具體步驟為:準(zhǔn)確稱量咖啡樣品1.0 g于具塞試管中,先加入20 mL純水溶液提取,漩渦振蕩器混勻、超聲萃取15 min,然后5000 r/min離心10 min,取上清液于50mL容量瓶中,再在具塞試管中加入25mL純水溶液重復(fù)上述操作提取第2次,最后用純水溶液定容至刻度線。分別準(zhǔn)確吸取兩份1mL樣液,一份過0.45 μm水系微孔濾膜過濾后供HPLC測(cè)定檢測(cè)綠原酸。然后另一份于具塞試管中,加入200μL碳酸氫鈉溶液(濃度為0.4mol/L)和400μL 4-二甲胺基苯基偶氮苯磺酰氯衍生試劑(濃度為3.0mmol/L),漩渦振蕩器混勻、70 ℃水浴衍生反應(yīng)20 min后,過0.45 μm微孔濾膜過濾后供HPLC測(cè)定生物胺;再重新稱取100mg左右咖啡粉末樣品于水解消化管,加入6 mol/L鹽酸溶液,真空泵抽真空后封管,置于電熱鼓風(fēng)干燥箱中110℃消化22小時(shí)。消化管冷卻至室溫后消化液過濾至50 mL容量瓶,用蒸餾水清洗消化管2次并合并濾液,蒸餾水定容到50 mL,混勻。移液管取1mmL消化濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于50℃蒸發(fā)至干,加入0.02moL/L鹽酸溶液2mL溶解,過0.45μm濾膜備用,檢測(cè)氨基酸含量。最后,運(yùn)用所建立的方法對(duì)產(chǎn)自云南普洱三個(gè)品種的咖啡進(jìn)行檢測(cè)。[結(jié)果]本方法在1小時(shí)內(nèi)完成了6種綠原酸的分離分析。6種綠原酸在0.10～100.0 mg/L范圍內(nèi)具有良好的線性,相關(guān)系數(shù)(r)≥0.999,檢出限為0.05～0.10 mg/kg,定量限為 0.18～0.29 mg/kg。在 2000、5000、10000 mg/kg 添加水平的加標(biāo)回收率為96.3%～104.8%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD)為0.30%～2.10%之間(n=6)�；旌蠘�(biāo)準(zhǔn)樣品在10～250μg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。[結(jié)論]本研究建立了咖啡中6種綠原酸、5種生物胺的高效液相色譜(HPLC)、和18種氨基酸的離子交換色譜-茚三酮柱后衍生法氨基酸自動(dòng)分析儀分析檢測(cè)方法,含量?jī)?yōu)化了樣品的前處理?xiàng)l件,方法操作簡(jiǎn)單,靈敏度較高。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：O657.72;TS273
【圖文】：

０．００邋５．００邋１０．００邋１５．００邋２０．００邋２５．００邋３０．００邋３５．００邋４０．００逡逑分鐘逡逑圖２．３邋Ｃ１８色譜柱分離的色譜圖逡逑Ｆｉｇ．邋２．３邋Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ邋ｏｆ邋ｓａｍｐｌｅ邋ｓｅｐａｒａｔｅｄ邋ｂｙ邋Ｃｉ８逡逑１７逡逑

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當(dāng)甲醇：１％磷酸水溶液＝１２：８８（Ｖ：Ｖ）時(shí)綠原酸分離效果較好，可能是因?yàn)殄义暇G原酸顯弱酸性，所以在偏酸性的條件下更容易控制其電離狀態(tài)，使其為分子逡逑狀態(tài)，便于過柱分離，最終達(dá)到基線分離，且出峰時(shí)間較快，如圖２．邋５、２．６。逡逑１８逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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1 Tran Van Cuong;郭康權(quán);魯海霞;;咖啡中生物胺含量測(cè)定方法研究進(jìn)展[J];食品工業(yè);2015年05期

2 羅磊;楊彬;張國慶;朱文學(xué);劉云宏;衛(wèi)星;康新艷;屈政;;金銀花氣調(diào)熱泵干燥過程中綠原酸降解動(dòng)力學(xué)研究[J];食品科學(xué);2015年17期

3 呂文佳;劉云;楊剴舟;翟曉娜;劉飛;張春月;冷小京;;咖啡主要烘焙風(fēng)味物質(zhì)的形成及變化規(guī)律[J];食品工業(yè)科技;2015年03期

4 暴海霞;戴新華;;氨基酸檢測(cè)方法的進(jìn)展和現(xiàn)狀[J];化學(xué)試劑;2013年07期

5 聶雪凌;唐鴻志;許平;;綠原酸的檢測(cè)及代謝途徑研究進(jìn)展[J];廣州化工;2013年01期

6 楊麗莉;王美飛;胡恩宇;沈敏;;水中丙烯酰胺氣相色譜測(cè)定方法研究[J];中國環(huán)境監(jiān)測(cè);2012年01期

7 聶新志;蔣宗勇;林映才;鄭春田;周桂蓮;汪仕奎;王麗;;精氨酸和谷氨酰胺對(duì)豬小腸上皮細(xì)胞增殖的影響及機(jī)理探討[J];中國農(nóng)學(xué)通報(bào);2012年02期

8 于萍;;食品中丙烯酰胺檢測(cè)方法的研究進(jìn)展[J];福建分析測(cè)試;2011年06期

9 張媛媛;張加晏;遲玉明;楊光;葉祖光;;近紅外光譜法測(cè)定抗感泡騰片生產(chǎn)過程中綠原酸類化合物含量[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2011年04期

10 黃翼飛;胡靜;;液相色譜-電噴霧離子阱串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)分析煙草中的20種游離氨基酸[J];色譜;2010年06期

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1 鄭萍;氧化應(yīng)激對(duì)仔豬精氨酸代謝和需求特點(diǎn)的影響及機(jī)制研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

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1 高福久;谷氨酰胺和L-肉堿對(duì)肉羊抗低溫應(yīng)激能力影響的研究[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2761731