液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法測定嬰幼兒配方食品中左旋肉堿和膽堿含量及應(yīng)用研究
發(fā)布時間:2020-07-17 20:52
【摘要】:嬰幼兒在生長發(fā)育過程中,對維生素、蛋白質(zhì)、微量元素等營養(yǎng)元素的需求量較高,左旋肉堿和膽堿都是嬰幼兒生長發(fā)育所必須的水溶性營養(yǎng)元素,新生兒由于自身合成能力不足,所以必須依靠外源攝入來補充。母乳可以為嬰幼兒提供生長所需的左旋肉堿和膽堿,但在母乳不足的時候,則需要通過嬰幼兒配方食品,尤其是乳粉來進行補充。因此,嬰幼兒配方食品中必須添加這兩種營養(yǎng)成分。目前國標中分別采用酶顯色法和雷氏鹽比色法檢測這兩種物質(zhì),缺點是無法實現(xiàn)精準定性確證,在定量檢測過程中檢出限較高,且樣品制備過程復雜、操作時間較長,不適合快速批量檢驗;谝陨媳尘氨疚慕⒘送凰貎(nèi)標-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時檢測這兩種水溶性營養(yǎng)元素的分析方法,實驗結(jié)果如下:樣品經(jīng)溫水溶解混勻后加入同位素內(nèi)標,經(jīng)鹽酸、超聲提取后,用甲酸水-乙腈稀釋并沉淀蛋白,經(jīng)過0.2μm濾膜后,采用Agilent HILIC色譜柱(3.5μm,100 mm×2.1 mm)進行分離,柱溫為35℃,流速為0.3 mL/min,進樣量為2μL,梯度洗脫條件進行分離,采用多反應(yīng)監(jiān)測模式(MRM)進行定性、定量分析,同位素內(nèi)標進行校正。實驗結(jié)果表明,左旋肉堿及其內(nèi)標物在0.005~0.100 mg/L范圍內(nèi)、膽堿及其內(nèi)標物在0.025~0.500 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(標準品);左旋肉堿的回收率在87.7%~101.0%之間,膽堿回收率在80.6%~105.0%之間;相對標準偏差(RSD)左旋肉堿3.48%、膽堿8.58%;檢出限(LOD)左旋肉堿為1.5 mg/kg、膽堿為6.0 mg/kg;定量限(LOQ)左旋肉堿為4.5 mg/kg、膽堿為18.0 mg/kg(樣品)。采用建立的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分別對乳基和豆基嬰幼兒配方粉樣品進行含量檢測、極限運輸條件實驗和模擬沖泡實驗。被測不同品牌嬰幼兒配方粉樣品中左旋肉堿和膽堿的實際檢測值都達到了標簽上含量的80%左右;通過極限運輸條件實驗得出:嬰幼兒配方食品在運輸周期較長的情況下,最佳儲存溫度為25℃;在運輸周期較短的情況下,最佳儲存溫度為0℃~37℃;通過模擬沖泡條件實驗得出:嬰幼兒配方粉的最佳沖泡溫度為40℃,并且沖泡后應(yīng)立即飲用,若沖泡后不能立即飲用,需在冷藏條件下儲存,且存放時間不宜超過72h。
【學位授予單位】:大連工業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:TS216;O657.63
【圖文】:
圖 1-1 左旋肉堿的分子結(jié)構(gòu)Fig. 1-1Molecular structure of L-Carnitine生理功能肪代謝分解重要的功能是可以幫助脂肪代謝,促進脂肪酸氧化分為長鏈脂肪的載體,將長鏈脂肪運送到線粒體細胞膜生β-氧化進入三羧酸循環(huán),從而產(chǎn)生能量并起到降低機體耐受力的作用。整個過程需要肉堿;D(zhuǎn)移酶Ⅰ共同催化完成?衫玫孽;鈮A量決定β-氧化的速脂肪的氧化速度,提高脂肪能量的利用率[5]。近年來酸的氧化也具有一定的作用。粒體內(nèi)丙酮酸激酶的活性
確認識到膽堿的對于人類和動物生長的營養(yǎng)價膽堿列為允許添加于嬰兒食品的產(chǎn)品;1998titute of Medicine, TOM)將膽堿歸類為必需營養(yǎng)ce Intakes, DRIs)和人類適宜攝入量(Adequate 為 425 mg/d,可耐受最高攝入量(Tolerable Upp成了人類食品和動物飼料中常用的添加劑;再|(zhì) 2-羥基-N,N,N-三甲基乙銨,分子式為 C5H15N圖 1-2。膽堿主要存在于豆類、動物的腦、心色粘稠、味苦的白色漿液,不易結(jié)晶。易溶于劑。膽堿具有很強的吸濕性,暴露于空氣中能定的結(jié)晶鹽形式存在,如氯化膽堿。膽堿耐高
此在前處理過程中,樣品在經(jīng)過鹽酸和超聲提取后調(diào)節(jié)pH,通過檢測平行樣品峰面積的平均值來確定最佳前處理條件,具體條件如表2-7所示。實驗結(jié)果如圖2-1和2-2所示,在前處理過程中,樣品的pH值對左旋肉堿的檢測結(jié)果沒有顯著的影響;在對膽堿的檢測過程中發(fā)現(xiàn),將pH值調(diào)節(jié)至4后直接定容會使膽堿的檢測值明顯下降,因此為提高檢測效率,樣品在前處理過程中選擇不調(diào)節(jié)pH。
本文編號:2759924
【學位授予單位】:大連工業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:TS216;O657.63
【圖文】:
圖 1-1 左旋肉堿的分子結(jié)構(gòu)Fig. 1-1Molecular structure of L-Carnitine生理功能肪代謝分解重要的功能是可以幫助脂肪代謝,促進脂肪酸氧化分為長鏈脂肪的載體,將長鏈脂肪運送到線粒體細胞膜生β-氧化進入三羧酸循環(huán),從而產(chǎn)生能量并起到降低機體耐受力的作用。整個過程需要肉堿;D(zhuǎn)移酶Ⅰ共同催化完成?衫玫孽;鈮A量決定β-氧化的速脂肪的氧化速度,提高脂肪能量的利用率[5]。近年來酸的氧化也具有一定的作用。粒體內(nèi)丙酮酸激酶的活性
確認識到膽堿的對于人類和動物生長的營養(yǎng)價膽堿列為允許添加于嬰兒食品的產(chǎn)品;1998titute of Medicine, TOM)將膽堿歸類為必需營養(yǎng)ce Intakes, DRIs)和人類適宜攝入量(Adequate 為 425 mg/d,可耐受最高攝入量(Tolerable Upp成了人類食品和動物飼料中常用的添加劑;再|(zhì) 2-羥基-N,N,N-三甲基乙銨,分子式為 C5H15N圖 1-2。膽堿主要存在于豆類、動物的腦、心色粘稠、味苦的白色漿液,不易結(jié)晶。易溶于劑。膽堿具有很強的吸濕性,暴露于空氣中能定的結(jié)晶鹽形式存在,如氯化膽堿。膽堿耐高
此在前處理過程中,樣品在經(jīng)過鹽酸和超聲提取后調(diào)節(jié)pH,通過檢測平行樣品峰面積的平均值來確定最佳前處理條件,具體條件如表2-7所示。實驗結(jié)果如圖2-1和2-2所示,在前處理過程中,樣品的pH值對左旋肉堿的檢測結(jié)果沒有顯著的影響;在對膽堿的檢測過程中發(fā)現(xiàn),將pH值調(diào)節(jié)至4后直接定容會使膽堿的檢測值明顯下降,因此為提高檢測效率,樣品在前處理過程中選擇不調(diào)節(jié)pH。
【參考文獻】
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本文編號:2759924
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