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液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定嬰幼兒配方食品中左旋肉堿和膽堿含量及應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-17 20:52
【摘要】:嬰幼兒在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,對(duì)維生素、蛋白質(zhì)、微量元素等營(yíng)養(yǎng)元素的需求量較高,左旋肉堿和膽堿都是嬰幼兒生長(zhǎng)發(fā)育所必須的水溶性營(yíng)養(yǎng)元素,新生兒由于自身合成能力不足,所以必須依靠外源攝入來(lái)補(bǔ)充。母乳可以為嬰幼兒提供生長(zhǎng)所需的左旋肉堿和膽堿,但在母乳不足的時(shí)候,則需要通過(guò)嬰幼兒配方食品,尤其是乳粉來(lái)進(jìn)行補(bǔ)充。因此,嬰幼兒配方食品中必須添加這兩種營(yíng)養(yǎng)成分。目前國(guó)標(biāo)中分別采用酶顯色法和雷氏鹽比色法檢測(cè)這兩種物質(zhì),缺點(diǎn)是無(wú)法實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)定性確證,在定量檢測(cè)過(guò)程中檢出限較高,且樣品制備過(guò)程復(fù)雜、操作時(shí)間較長(zhǎng),不適合快速批量檢驗(yàn);谝陨媳尘氨疚慕⒘送凰貎(nèi)標(biāo)-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)檢測(cè)這兩種水溶性營(yíng)養(yǎng)元素的分析方法,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:樣品經(jīng)溫水溶解混勻后加入同位素內(nèi)標(biāo),經(jīng)鹽酸、超聲提取后,用甲酸水-乙腈稀釋并沉淀蛋白,經(jīng)過(guò)0.2μm濾膜后,采用Agilent HILIC色譜柱(3.5μm,100 mm×2.1 mm)進(jìn)行分離,柱溫為35℃,流速為0.3 mL/min,進(jìn)樣量為2μL,梯度洗脫條件進(jìn)行分離,采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM)進(jìn)行定性、定量分析,同位素內(nèi)標(biāo)進(jìn)行校正。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,左旋肉堿及其內(nèi)標(biāo)物在0.005~0.100 mg/L范圍內(nèi)、膽堿及其內(nèi)標(biāo)物在0.025~0.500 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(標(biāo)準(zhǔn)品);左旋肉堿的回收率在87.7%~101.0%之間,膽堿回收率在80.6%~105.0%之間;相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)左旋肉堿3.48%、膽堿8.58%;檢出限(LOD)左旋肉堿為1.5 mg/kg、膽堿為6.0 mg/kg;定量限(LOQ)左旋肉堿為4.5 mg/kg、膽堿為18.0 mg/kg(樣品)。采用建立的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分別對(duì)乳基和豆基嬰幼兒配方粉樣品進(jìn)行含量檢測(cè)、極限運(yùn)輸條件實(shí)驗(yàn)和模擬沖泡實(shí)驗(yàn)。被測(cè)不同品牌嬰幼兒配方粉樣品中左旋肉堿和膽堿的實(shí)際檢測(cè)值都達(dá)到了標(biāo)簽上含量的80%左右;通過(guò)極限運(yùn)輸條件實(shí)驗(yàn)得出:嬰幼兒配方食品在運(yùn)輸周期較長(zhǎng)的情況下,最佳儲(chǔ)存溫度為25℃;在運(yùn)輸周期較短的情況下,最佳儲(chǔ)存溫度為0℃~37℃;通過(guò)模擬沖泡條件實(shí)驗(yàn)得出:嬰幼兒配方粉的最佳沖泡溫度為40℃,并且沖泡后應(yīng)立即飲用,若沖泡后不能立即飲用,需在冷藏條件下儲(chǔ)存,且存放時(shí)間不宜超過(guò)72h。
【學(xué)位授予單位】:大連工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類(lèi)號(hào)】:TS216;O657.63
【圖文】:

分子結(jié)構(gòu)圖,分子結(jié)構(gòu),β-氧化,長(zhǎng)鏈


圖 1-1 左旋肉堿的分子結(jié)構(gòu)Fig. 1-1Molecular structure of L-Carnitine生理功能肪代謝分解重要的功能是可以幫助脂肪代謝,促進(jìn)脂肪酸氧化分為長(zhǎng)鏈脂肪的載體,將長(zhǎng)鏈脂肪運(yùn)送到線粒體細(xì)胞膜生β-氧化進(jìn)入三羧酸循環(huán),從而產(chǎn)生能量并起到降低機(jī)體耐受力的作用。整個(gè)過(guò)程需要肉堿;D(zhuǎn)移酶Ⅰ共同催化完成?衫玫孽;鈮A量決定β-氧化的速脂肪的氧化速度,提高脂肪能量的利用率[5]。近年來(lái)酸的氧化也具有一定的作用。粒體內(nèi)丙酮酸激酶的活性

膽堿,分子結(jié)構(gòu)式


確認(rèn)識(shí)到膽堿的對(duì)于人類(lèi)和動(dòng)物生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)膽堿列為允許添加于嬰兒食品的產(chǎn)品;1998titute of Medicine, TOM)將膽堿歸類(lèi)為必需營(yíng)養(yǎng)ce Intakes, DRIs)和人類(lèi)適宜攝入量(Adequate 為 425 mg/d,可耐受最高攝入量(Tolerable Upp成了人類(lèi)食品和動(dòng)物飼料中常用的添加劑;再|(zhì) 2-羥基-N,N,N-三甲基乙銨,分子式為 C5H15N圖 1-2。膽堿主要存在于豆類(lèi)、動(dòng)物的腦、心色粘稠、味苦的白色漿液,不易結(jié)晶。易溶于劑。膽堿具有很強(qiáng)的吸濕性,暴露于空氣中能定的結(jié)晶鹽形式存在,如氯化膽堿。膽堿耐高

優(yōu)化實(shí)驗(yàn),膽堿,處理過(guò)程


此在前處理過(guò)程中,樣品在經(jīng)過(guò)鹽酸和超聲提取后調(diào)節(jié)pH,通過(guò)檢測(cè)平行樣品峰面積的平均值來(lái)確定最佳前處理?xiàng)l件,具體條件如表2-7所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2-1和2-2所示,在前處理過(guò)程中,樣品的pH值對(duì)左旋肉堿的檢測(cè)結(jié)果沒(méi)有顯著的影響;在對(duì)膽堿的檢測(cè)過(guò)程中發(fā)現(xiàn),將pH值調(diào)節(jié)至4后直接定容會(huì)使膽堿的檢測(cè)值明顯下降,因此為提高檢測(cè)效率,樣品在前處理過(guò)程中選擇不調(diào)節(jié)pH。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2759924

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