【摘要】：牛乳面臨著微生物污染等食品安全方面的威脅。傳統(tǒng)的細菌學培養(yǎng)方法檢測牛乳中微生物耗時費力,無法適應(yīng)市場的需求。本研究旨在利用流式分析技術(shù)快速定量檢測牛乳中的細菌總數(shù)和大腸桿菌0157:H7。結(jié)果如下:1.牛乳中細菌總數(shù)檢測:選用大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌作為代表菌株進行研究,用SYTO 9和PI對細菌熒光標記,進行流式檢測。結(jié)果顯示,此方法的準確性良好,對PBS中的細菌總數(shù)的檢測范圍為103～108 CFU/mL,對牛乳中細菌總數(shù)的檢測靈敏度可達到102CFU/mL。2.牛乳中大腸桿菌0157:H7的檢測:用熒光抗體聯(lián)合PI對其進行熒光標記,進行流式檢測。結(jié)果顯示,流式檢測方法的準確性和特異性良好,在PBS中的檢測范圍為103～108CFU/mL,對牛乳中大腸桿菌O157:H7檢測的靈敏度可達到 101 CFU/mL。3.檢測牛乳中的細菌時,需要對牛乳中的雜質(zhì)粒子的干擾進行排除。流式分析儀的散射光功能可以準確區(qū)分牛奶中的細菌和體細胞;牛奶的細菌純化操作可以有效消除牛乳中的蛋白和脂肪顆粒。4.培養(yǎng)富集的方法可以提高流式分析技術(shù)檢測細菌時的靈敏度。在營養(yǎng)肉湯中37℃培養(yǎng)6.5h后,大腸桿菌0157:H7濃度大約提高967±143倍。營養(yǎng)肉湯中37℃培養(yǎng)4.5h后,大腸桿菌的濃度大約提高92±25倍,金黃色葡萄球菌的濃度大約提高44±9倍,枯草芽孢桿菌的濃度大約提高372 ± 67倍。5.建立了流式分析技術(shù)檢測牛乳中大腸桿菌0157:H7和細菌總數(shù)的方法,流程為:純化——培養(yǎng)富集——熒光標記——流式檢測分析。結(jié)論:流式分析技術(shù)能夠極大程度上縮短檢測時間,且能夠達到牛乳樣品快速定量檢測的要求。
【圖文】：

并通過流式分析技術(shù)檢逡逑測其實際死活菌的濃度。圖２－３為實際測得的大腸桿菌死活菌濃度和比例，結(jié)果逡逑顯示測得的死活菌所占的百分比與理論值基本相符。逡逑因此，流式分析技術(shù)檢測細菌總數(shù)的方法可以應(yīng)用于檢測大腸桿菌。逡逑９逡逑Ｓ邐８邐ｙ邋＝邋０．９３邋ｌｌｘ＋０．５８５１邋｜Ｓ！逡逑ｇ邐Ｒ＇邋＝邋０．９９４１邋Ｚ逡逑Ｓ邐７邐＾逡逑Ｉｄ邋６邐Ｘ逡逑ｐ邋４邐ｙ逡逑和ｃ逡逑１＾邋３邋，，－逡逑＜￡邐２逡逑０逡逑０邐２邐４邐６邐８邐１０逡逑平板ｉｌ數(shù)法測得的大腸＋ｆ？菌的濃度（ｌｏｇＣＦＵ／ｍＬ）逡逑圖２－２大腸桿菌的平板計數(shù)結(jié)果與流式檢測結(jié)果的線性關(guān)系逡逑ＦＩＧ邋２－２邋Ｌｉｎｅａｒ邋ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ邋ｂｅｔｗｅｅｎ邋ｖｉａｂｌｅ邋Ｅ．邋ｃｏｌｉ邋ｕｓｅｄ邋ｆｏｒ邋ｐｌａｔｅ邋ｃｏｕｎｔｉｎｇ邋ａｎｄ邋ｔｈｏｓｅ邋ａｎａｌｙｓｅｄ邋ｂｙ逡逑ＦＣＭ逡逑１００。，。邐你７逡逑１７４５邋Ｓ逡逑Ｑ邋９０％邐則

本文編號：2702325