【摘要】：甲殼素是一種天然高分子聚合物,廣泛存在于自然界中,殼聚糖是脫乙酰甲殼素。殼寡糖是殼聚糖的降解物,殼聚糖和殼寡糖均具有多種生物活性,如抑菌、抗腫瘤、抗氧化、增強免疫力等,廣泛應用于食品、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)等行業(yè)。通常,殼聚糖是從蝦、蟹等的外骨骼中提取制備的。然而,蝦蟹制備殼聚糖受到季節(jié)、地域的限制;此外,隨著近年來海洋污染的增加,蝦和螃蟹來源的殼聚糖可能對人類的健康造成一些危害;限制了殼聚糖的應用。棘孢木霉的細胞壁中含有幾丁質(zhì),但有關棘孢木霉中殼聚糖提取制備的報道很少;棘孢木霉提取制備多糖、蛋白等后剩余的菌渣通常在露天直接填埋,造成了環(huán)境污染及生物資源浪費。本文分別以蝦殼粉和棘孢木霉菌渣為原料制備殼寡糖,比較不同來源殼寡糖在結構特性及抑菌活性上的差別。主要研究方法和結果如下:分別以蝦殼粉和棘孢木霉菌渣作為原材料采用堿法制備殼聚糖,得到殼聚糖粗品,命名為CT_1和CT_2,得率為10.78±0.02%和9.53±0.02%。采用紅外光譜法得出CT_1和CT_2均有殼聚糖的特征吸收峰,說明CT_1和CT_2的均是殼聚糖。采用GB29941-2013食品安全國家標準方法測得CT_1和CT_2的脫乙酰度分別為82.40±0.57%和87.59±0.42%;黏度分別為23.25±0.02mPa·s和5.63±0.01 mPa·s。采用可見光分光光度法測得CT_1和CT_2的殼聚糖含量分別為33.90±0.09%和42.15±0.02%。采用高效液相色譜(HPLC)法測得CT_1的分子量分布范圍約為800 kDa和9 kDa;CT_2的分子量分布范圍大約為18kDa。采用單因素實驗和正交實驗,利用殼聚糖酶分別對CT_1和CT_2降解,得到殼寡糖,命名為COS_1和COS_2。COS_1的最佳制備工藝為:酶解溫度43℃,酶解時間7h,加酶量30U/g殼聚糖,底物濃度6%(w/v);殼聚糖的水解率為91.98±0.12%。COS_2的最佳制備工藝為:酶解溫度40 ℃,酶解時間6h,加酶量30U/g殼聚糖,底物濃度8%(w/v);殼聚糖的水解率為91.03±0.57%。苯酚-硫酸法測得COS_1和COS_2的糖含量分別為 88.5±1.14%和 90.2±0.97%。通過薄層色譜(TLC)、HPLC 和 MALDI-TOF質(zhì)譜分析表明:COS_1是由殼三糖、殼四糖、殼五糖、殼六糖和四乙�；瘹ち墙M成的混合物;COS_2是由殼三糖、殼五糖和殼六糖組成的混合物。抑菌性實驗結果表明:COS_1和COS_2對根霉、毛霉、青霉、曲霉均沒有抑制效果;對沙門氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌均有抑制作用且COS_2抑制效果比COS_1好。
【圖文】：

圖３－ｌ邋ＣＴ，和ＣＴ２的紅夕圈（ａ表示ＣＴ，邋，，邋ｂ表示ＣＴ２）逡逑Ｆｉｇ．邋３－１邋Ｔｈｅ邋ＦＴ－ＩＲ邋ｐｒｏｆｉｌｅ邋ｏｆ邋ＣＴ｜邋ａｎｄ邋ＣＴ］逡逑

根據(jù)高效液相色譜圖的出峰時間計算得出ＣＴ，和ＣＴ２所對應的分子質(zhì)量的大致范逡逑圍。逡逑由圖３－３可知ＣＴ，在高效液相色譜圖中的出峰時間主要為８．６４４邋ｍｉｌｌ和丨４．３５２逡逑ｍｉｎ，代入回歸方程計算得ＣＴｉ的分子質(zhì)量分布范圍約為８００邋ｋＤａ左右和９邋ｋＤａ左右。逡逑由圖３－４可知ＣＴ２在高效液相色譜圖中的出峰時間主要為１３．７％邋ｍｉｎ，代入回歸方程逡逑計算得ＣＴ２的分子質(zhì)量分布范圍約為１８邋ｋＤａ左右。說明，以蝦殼粉為原料提取制備逡逑的殼聚糖主要以大分子為主，而以棘孢木霉菌渣為原料提取制備的殼聚糖主要以小分逡逑子為主；文獻報道的以蝦殼、真菌及其菌渣制備的殼聚糖的分子量分布范圍約為５．２逡逑ｋＤａ［９９］，邋１０ｋＤａ［２１３１，邋２７ｋＤａ［２２１，１００ｋＤａｌ９９］，邋１２６ｋＤａｍ等。逡逑２７逡逑
【學位授予單位】：天津科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：O636.1

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本文編號：2657916