【摘要】：針對(duì)甘草酸(GL)和甘草次酸(GA)均不能發(fā)揮最佳生物功效的問(wèn)題,以定向催化GL生成單葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的產(chǎn)紫青霉菌(Penicillium purpurogenum Li-3)為對(duì)象,研究磁性負(fù)載離子液體海藻酸鈣凝膠珠固定化產(chǎn)紫青霉細(xì)胞、磁性負(fù)載離子液體多層海藻酸鈣微囊化產(chǎn)紫青霉細(xì)胞制備條件及其催化性能,主要研究工作和結(jié)果如下:(1)制備殼聚糖包覆四氧化三鐵(Fe3O4/CS)納米粒子和磁性負(fù)載1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽([BMIM]PF6)凝膠珠,材料表征表明,在加入[BMIM]PF6后的磁性凝膠珠表面的部分凸起增多;Fe3O4納米粒子被殼聚糖包覆后,其晶型結(jié)構(gòu)沒(méi)有改變,而磁性負(fù)載[BMIM]PF6凝膠珠的晶型結(jié)構(gòu)減弱;Fe3O4/CS和磁性凝膠珠具有良好的磁性能,在外加磁場(chǎng)作用下,Fe3O4/CS和磁性負(fù)載離子液體凝膠珠均能夠?qū)崿F(xiàn)有效分離。(2)制備磁性負(fù)載[BMIM]PF6凝膠珠固定化產(chǎn)紫青霉細(xì)胞,優(yōu)化制備條件,最優(yōu)制備條件為:海藻酸鈉濃度為2.0%,CaC12濃度為2.0%,[BMIM]PF6加入量為9.0%,Fe3O4/CS加入比例為4:300,加菌量為6.0%;考察其催化性能表明,含離子液體細(xì)胞體系中GAMG產(chǎn)率高于不含離子液體細(xì)胞體系;此條件下,固定化細(xì)胞重復(fù)利用9次后,相對(duì)活性達(dá)到59.2%。(3)針對(duì)(2)中制備磁性負(fù)載[BMIM]PF6凝膠珠固定化產(chǎn)紫青霉細(xì)胞存在離子液體損失率較大的問(wèn)題,在(2)優(yōu)選條件基礎(chǔ)上,制備磁性負(fù)載[BMIM]PF6多層海藻酸鈣微囊化產(chǎn)紫青霉細(xì)胞,優(yōu)選海藻酸鈉覆膜濃度最佳為1.2%,最適覆膜層數(shù)為2層;在通過(guò)覆膜之后,[BMIM]PF6的損失率減小;考察覆膜2層微囊化細(xì)胞催化性能,結(jié)果表明,覆膜2層的微囊化細(xì)胞體系中GAMG產(chǎn)率比不覆膜凝膠珠固定化細(xì)胞體系高8.8%;磁性負(fù)載[BMIM]PF6雙層海藻酸鈣微囊化細(xì)胞重復(fù)利用9次后,相對(duì)活性達(dá)到81.5%。
【圖文】：

圖１．２生物微膠囊的制備方法逡逑Ｆｉｇ．邋１．２邋Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ邋ｍｅｔｈｏｄｓ邋ｏｆ邋ｂｉｏｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌｅｓ逡逑微膠囊的制備方法（見(jiàn)圖１．２）主要有化學(xué)法、物理法和物理化學(xué)法［４５＿４７］，隨逡逑著微膠囊制備技術(shù)研究的不斷擴(kuò)展，，出現(xiàn)了許多的制備新方法，例如微通道乳化逡逑法、快速膨脹法、超臨界流體、膜乳化法、超微膠囊技術(shù)等Ｗ４９］。逡逑１．２．３生物微膠囊壁材的選擇逡逑微膠囊壁材的選擇是至關(guān)重要的，微膠囊的溶解性、流動(dòng)性、滲透性、緩釋逡逑性能等性能都與壁材選擇相關(guān)，一般來(lái)說(shuō)，能夠包裹芯材成膜的材料均可作為壁逡逑材，通常根據(jù)芯材的物理性質(zhì)來(lái)選擇適宜的壁材，理想的壁材選擇具有以下特性逡逑［５￣５２］：（１）高濃度時(shí)有良好的流動(dòng)性，可以保證微囊化過(guò)程具有良好的可操作性能；逡逑（２）良好的溶解性；⑶制備過(guò)程能乳化囊芯形成穩(wěn)定的乳化體系；（４）微膠囊易逡逑干燥易脫落；（５）需要良好的生物相容性；（６）壁材能與芯材匹配而不發(fā)生化學(xué)逡逑反應(yīng)；（７）具有較好的滲透性、吸濕性、溶解性及穩(wěn)定性；（８）傳質(zhì)性能好、來(lái)逡逑源廣泛、價(jià)格便宜等［５３］。逡逑１．２．４生物微膠囊性能逡逑在生物催化中，生物微膠囊為生物體提供良好的生存環(huán)境，保護(hù)細(xì)胞及酶免逡逑受于囊外有毒物質(zhì)的毒害，而微膠囊性能是決定細(xì)胞或酶能夠正常生理功能的關(guān)逡逑鍵

海藻酸鹽與鈣離子的凝膠反應(yīng)可用“雞蛋格”模型解釋［６２］，當(dāng)Ｃａ２＋與海藻酸逡逑鈉結(jié)合時(shí)，Ｃａ２＋將Ｎａ＋置換出來(lái)，一個(gè)Ｃａ２＋與四個(gè)－Ｃ００－結(jié)合，形成穩(wěn)定的螯合逡逑物，即“雞蛋格”，如圖１．４。逡逑痛灥制逡逑sD[鰣義賢跡保春Ｔ逅嵫文航峁瑰義希疲椋紓澹保村澹櫻簦潁酰悖簦酰潁邋澹錚駑澹幔歟紓椋睿幔簦邋澹紓澹戾義希保常埠Ｔ逅岣頗褐橛τ緬義蝦Ｔ逅岣頗褐榫哂猩鏘噯菪院謾⒊尚腿菀椎扔諾�，哉洨五K刂剖頭擰⒚稿義霞跋赴墓潭ɑ確矯婢泄惴旱撓τ謾Ｖ喲蟾郟叮常蕕瓤⒁恢鐘刪郟ǎ�，邋Ｌ－乳酸）辶x銜⑶蚯度朧皆逅岣頗褐槎槌傻男灤退┪鋦┫低常梢醞備涸睪褪頭佩義希保福校什荽嗡幔ǎ牽�，疏水性药五P┖團(tuán)Ｑ灝椎鞍祝ǎ攏櫻粒姿閱Ｐ鴕┪錚┒且藻義系ヒ壞姆絞澆�。肖织d劍郟叮矗蕕韌üＴ逅岣頗嚎帕９潭ɑ咸煙茄躉福阱義獻(xiàn)鈑毆潭ɑ跫攏胗衛(wèi)朊趕啾冉�，固定化酶的租Q剩穡戎島妥釷蝕呋露確皺義媳鹛岣擼埃逗停

本文編號(hào)：2595211