【摘要】：采用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)小米中非法染色姜黃素進(jìn)行定性定量測(cè)定,并對(duì)其不確定度進(jìn)行分析。以乙腈-4%冰乙酸(45+55)為流動(dòng)相,流速1.0 mL/min,經(jīng)C18柱分析,檢測(cè)波長(zhǎng)425 nm。采用外標(biāo)法定量,姜黃素在0.585μg/mL~4.88μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)r~2=0.999 9,平均回收率92%,檢出限為0.08 mg/kg,整個(gè)試驗(yàn)的合成不確定度為1.937%,擴(kuò)展不確定度為X=(7.15±0.29)mg/kg;k=2。本方法操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,檢出限低,可用于小米中姜黃素非法染色的測(cè)定。
【圖文】：

10min，放置至室溫，搖勻后，用0.45μm有機(jī)系濾膜過(guò)濾于棕色樣品瓶中，待測(cè)。1.3.3色譜條件流動(dòng)相：乙腈+4%冰乙酸=45+55；色譜柱：Agela，C184.6mm×250mm，5μm；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：425nm；進(jìn)樣體積：10μL。1.4結(jié)果計(jì)算用外標(biāo)法計(jì)算姜黃素的含量：X=C×V×1000m×1000式中：X為姜黃素的含量，mg/kg；C為由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品溶液中姜黃素的濃度，μg/mL；m為樣品的質(zhì)量，g；V為甲醇加入體積，mL。2結(jié)果與討論2.1色譜條件的選擇2.1.1檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇姜黃素光譜圖見(jiàn)圖1。如圖1所示，采用二極管陣列檢測(cè)器在190nm~800nm波長(zhǎng)下對(duì)姜黃素標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行掃描，結(jié)果顯示姜黃素在425nm處有最大吸收峰，為了使其靈敏度最佳，選擇425nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。2.1.2流動(dòng)相的選擇姜黃素具有兩個(gè)羥基，羥基氫易解離，在流動(dòng)相中加入一定量酸可以抑制姜黃素的解離，以改善其在C18柱中的保留及峰型。本試驗(yàn)比較了乙腈-水、乙腈-1%磷酸、乙腈-0.1%冰乙酸、乙腈-4%冰乙酸4個(gè)體系的流動(dòng)相，結(jié)果表明，在乙腈-水、乙腈-1%磷酸、乙腈-0.1%冰乙酸流動(dòng)相體系下，姜黃素目標(biāo)峰都有不X=（7.15±0.29）mg/kg；k=2.Themethodwassample，reproducible，lowdetectionlimit，andcanbeusedtode－terminetheillegalstainingofcurcumininmillet.Keywords：highperformanceliquidchromatography（HPLC）；curcumin；millet；uncertainty181614121086420-2mAU200300600波長(zhǎng)/nm400500425.07圖1姜黃素光譜圖Fig.1Spectrumofcurcumin李卓，等：HPLC測(cè)定小米中非法添加姜黃素及不確定度分析標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)170

同程度的拖尾現(xiàn)象，而以乙腈-4%冰乙酸體系為流動(dòng)相，目標(biāo)峰峰型對(duì)稱效果好，故選擇乙腈-4%冰乙酸為流動(dòng)相。圖2、圖3為姜黃素標(biāo)準(zhǔn)品及樣品溶液色譜圖。2.1.3提取溶劑的選擇姜黃素極性較小，不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、冰乙酸等試劑中[9]。本試驗(yàn)比較了甲醇、無(wú)水乙醇、乙酸乙酯、冰乙酸、70%冰乙酸5種提取溶劑，結(jié)果如圖4。由圖4可知，提取率由大至小依次為：甲醇＞冰醋酸＞無(wú)水乙醇＞乙酸乙酯＞70%冰醋酸，甲醇的提取率最高，故選擇甲醇為提取溶劑。2.2方法學(xué)考察2.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取1.3.1項(xiàng)下姜黃素系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液在本試驗(yàn)所選色譜條件下測(cè)定，以姜黃素質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為y=0.8907x-0.0294，相關(guān)系數(shù)為r2=0.9999，結(jié)果表明，姜黃素在0.585μg/mL~4.88μg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。2.2.2回收率與重復(fù)性取陰性小米樣品，分別添加了3個(gè)水平濃度，每個(gè)水平添加3個(gè)平行，按照本試驗(yàn)的方法測(cè)定姜黃素質(zhì)量濃度，加標(biāo)回收率及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差見(jiàn)表1。由結(jié)果可以看出，該方法具有良好的準(zhǔn)確性和精密度。2.2.3穩(wěn)定性由于姜黃素分子結(jié)構(gòu)中含有共軛雙鍵，易在光與熱作用下發(fā)生氧化降解[10]，故應(yīng)將提取溶液過(guò)濾后貯存于棕色樣品瓶中，在室溫下放置0、3、6、12、24、48h進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)姜黃素在0~24h內(nèi)比較穩(wěn)定，，24h時(shí)后有小幅度下降，說(shuō)明處理好的樣品應(yīng)盡快測(cè)定，不宜放置過(guò)久。2.2.4檢出限與定量限在本試驗(yàn)所選色譜條件下，用空白樣品溶液稀釋姜黃素標(biāo)準(zhǔn)溶液至10倍信噪比、3倍信噪比，結(jié)果10S/N時(shí)姜黃素質(zhì)量濃度為0.06μg/mL，3S/N時(shí)姜黃素質(zhì)量濃度為0.02μg/mL，經(jīng)計(jì)算，姜黃素定量限為28262422201816141210864

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 夏振華,黃麗娟,魏小平;克林霉素磷酸酯凝膠的HPLC測(cè)定[J];中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志;1998年11期

2 徐黎玲;鹽酸林可霉素滴眼液的HPLC測(cè)定[J];中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志;2003年02期

3 朱寶琬,袁國(guó)平,金乃寶;甲苯磺酸托氟沙星的HPLC測(cè)定[J];中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志;1998年11期

4 張s

本文編號(hào)：2583546