本文關(guān)鍵詞：光譜法研究對(duì)硝基苯酚、蘇丹紅Ⅲ與牛血清白蛋白的相互作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：血清白蛋白是生命的基石，是血漿含量中最為豐富的蛋白質(zhì)，它可以結(jié)合外源性和內(nèi)源性的小分子物質(zhì)，并以蛋白質(zhì)為載體，在體內(nèi)存儲(chǔ)、運(yùn)輸和代謝。對(duì)于血清白蛋白與藥物小分子、有機(jī)小分子等物質(zhì)相互結(jié)合的深入研究，，可以系統(tǒng)地了解藥物等物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、生物化學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和動(dòng)力學(xué)等豐富信息，有助于了解藥物等小分子物質(zhì)在人體內(nèi)的吸收、分布與排泄，為藥物藥理和毒性研究提供了重要的參考價(jià)值，并且對(duì)進(jìn)一步了解蛋白質(zhì)載體的結(jié)構(gòu)、開(kāi)發(fā)新藥都具有重要的指導(dǎo)意義。 實(shí)驗(yàn)中采用了幾種光譜技術(shù)手段，分別研究了兩種小分子物質(zhì)(對(duì)硝基苯酚、蘇丹紅Ⅲ)與牛血清白蛋白的相互作用機(jī)理，同時(shí)還研究了作用區(qū)域、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)和作用力類型等。 主要研究結(jié)果如下： 1)采用熒光光譜、紫外-可見(jiàn)吸收光譜、圓二色譜以及三維熒光光譜、紅外光譜技術(shù)手段，在模擬生理?xiàng)l件下，研究了對(duì)硝基苯酚(PNP)與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用過(guò)程。結(jié)果表明，對(duì)硝基苯酚對(duì)BSA的內(nèi)源性熒光具有猝滅作用，屬于靜態(tài)猝滅。實(shí)驗(yàn)分別求得了在291，299和307K三種不同溫度下的對(duì)硝基苯酚與BSA結(jié)合的表觀結(jié)合常數(shù)，結(jié)果分別為3.310×10~4、2.375×10~4、2.153×10~4L·mol~(-1)，結(jié)合位點(diǎn)數(shù)都約為1。根據(jù)Van’t Hoff方程求得對(duì)硝基苯酚與BSA作用的熵變、焓變以及自由能變，由結(jié)果可知該體系是熵減少、自由能降低的自發(fā)過(guò)程，分子間主要以氫鍵和范德華力為主，并存在弱的靜電作用。基于F rster’s理論，計(jì)算求得結(jié)合距離為1.58nm。競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)表明，對(duì)硝基苯酚結(jié)合在蛋白質(zhì)的Site I位點(diǎn)上。圓二色譜、液體紅外光譜和三維熒光光譜結(jié)果表明，對(duì)硝基苯酚導(dǎo)致了BSA分子的構(gòu)象變化。 2)采用熒光光譜、紫外-可見(jiàn)吸收光譜、圓二色譜以及三維熒光光譜、紅外光譜技術(shù)手段，在模擬生理?xiàng)l件下，研究了蘇丹紅Ⅲ(SDⅢ)與牛血清白蛋白(BSA)的結(jié)合特征。結(jié)果表明，蘇丹紅Ⅲ對(duì)BSA的內(nèi)源性熒光具有猝滅作用，猝滅規(guī)律不明顯，主要為靜態(tài)猝滅，同時(shí)伴有動(dòng)態(tài)猝滅。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中分別求得了在291，299和307K三種溫度下的蘇丹紅Ⅲ與BSA結(jié)合的表觀結(jié)合常數(shù)，分別為5.650×10~3、2.240×10~5、5.380×10~5L·mol~(-1)，結(jié)合位點(diǎn)數(shù)都約為1。根據(jù)Van’t Hoff方程求得蘇丹紅Ⅲ與BSA作用的熵變、焓變以及自由能變，由結(jié)果可知該體系是熵增加、自由能降低的自發(fā)過(guò)程，分子間主要以疏水作用力為主，并存在弱的靜電作用力。基于F rster’s理論，可知兩者的結(jié)合距離為1.50nm。競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)表明，蘇丹紅Ⅲ結(jié)合在蛋白質(zhì)的Site I位點(diǎn)上。圓二色譜、液體紅外光譜和三維熒光光譜表明，蘇丹紅Ⅲ誘導(dǎo)了BSA分子的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，構(gòu)象發(fā)生改變。
【關(guān)鍵詞】：對(duì)硝基苯酚 蘇丹紅Ⅲ 牛血清白蛋白 紅外光譜 圓二色譜 三維熒光光譜
【學(xué)位授予單位】：遼寧大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：TQ460.7;O657.3
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-13
• 第1章 引言13-27
• 1.1 藥物與蛋白質(zhì)的相互作用13-16
• 1.1.1 蛋白質(zhì)的性質(zhì)與結(jié)構(gòu)13-15
• 1.1.2 蛋白質(zhì)與小分子藥物相互作用的研究意義15
• 1.1.3 蛋白質(zhì)與小分子藥物相互作用的研究背景15-16
• 1.2 蛋白質(zhì)與小分子藥物相互作用的研究手段16-19
• 1.2.1 熒光光譜法16-17
• 1.2.2 紫外-可見(jiàn)吸收光譜法17-18
• 1.2.3 紅外光譜法18
• 1.2.4 圓二色譜法18
• 1.2.5 核磁共振光譜法18-19
• 1.2.6 電化學(xué)法19
• 1.3 蛋白質(zhì)與小分子藥物相互作用的研究?jī)?nèi)容19-25
• 1.3.1 熒光猝滅機(jī)理及結(jié)合常數(shù)的分析19-20
• 1.3.2 結(jié)合位點(diǎn)、結(jié)合位數(shù)及結(jié)合距離的確定20-23
• 1.3.3 作用力類型的確定23-24
• 1.3.4 小分子藥物對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的影響24
• 1.3.5 小分子藥物與蛋白質(zhì)作用的影響因素24-25
• 1.4 課題設(shè)計(jì)、創(chuàng)新點(diǎn)與選題意義25-27
• 1.4.1 課題設(shè)計(jì)與創(chuàng)新點(diǎn)25-26
• 1.4.2 選題意義26-27
• 第2章 光譜法研究對(duì)硝基苯酚與牛血清白蛋白的相互作用27-51
• 2.1 材料與方法28-32
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器28-29
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑29
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑的配制29-30
• 2.1.4 光譜測(cè)定30-32
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論32-49
• 2.2.1 BSA 熒光猝滅機(jī)理分析32-36
• 2.2.2 PNP-BSA 體系的紫外-可見(jiàn)吸收光譜36-37
• 2.2.3 PNP-BSA 體系的表觀結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)37-38
• 2.2.4 PNP 與 BSA 的作用力類型38-40
• 2.2.5 PNP 與 BSA 間結(jié)合距離40-41
• 2.2.6 取代試驗(yàn)41-43
• 2.2.7 PNP 與 BSA 作用的同步熒光光譜43-44
• 2.2.8 PNP 與 BSA 作用的 CD 光譜44-46
• 2.2.9 PNP 與 BSA 作用的紅外光譜分析46
• 2.2.10 PNP 與 BSA 作用的 3 D 熒光猝滅光譜分析46-49
• 2.3 小結(jié)49-51
• 第3章 光譜法研究蘇丹紅Ⅲ和牛血清白蛋白的相互作用51-70
• 3.1 材料與方法52-54
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器52
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑52-53
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑的配制53
• 3.1.4 光譜測(cè)定53-54
• 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論54-69
• 3.2.1 蘇丹紅Ⅲ對(duì) BSA 熒光猝滅機(jī)理分析54-56
• 3.2.2 蘇丹紅Ⅲ-BSA 體系的紫外吸收光譜56-57
• 3.2.3 蘇丹紅Ⅲ與 BSA 表觀結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)57-59
• 3.2.4 蘇丹紅Ⅲ與 BSA 的作用力類型59-60
• 3.2.5 蘇丹紅Ⅲ與 BSA 間結(jié)合距離60-61
• 3.2.6 取代試驗(yàn)61-63
• 3.2.7 蘇丹紅Ⅲ與 BSA 作用的同步熒光光譜63-64
• 3.2.8 蘇丹紅Ⅲ與 BSA 作用的 CD 光譜64-65
• 3.2.9 蘇丹紅Ⅲ與 BSA 作用的紅外光譜分析65-66
• 3.2.10 蘇丹紅Ⅲ與 BSA 作用的 3 D 熒光猝滅光譜分析66-69
• 3.3 小結(jié)69-70
• 第4章 結(jié)論與展望70-72
• 4.1 結(jié)論70-71
• 4.2 展望71-72
• 致謝72-73
• 參考文獻(xiàn)73-79

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 黃賢智;許金鉤;李耀群;;同步熒光法同時(shí)測(cè)定色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸[J];分析化學(xué);1987年03期

2 劉典梅,李舒婷,趙書(shū)林;鋇A-偶氮氯膦Ⅲ絡(luò)合物探針?lè)止夤舛确y(cè)定蛋白質(zhì)[J];分析化學(xué);2004年02期

3 沈星燦,梁宏,何錫文,王新省;圓二色光譜分析蛋白質(zhì)構(gòu)象的方法及研究進(jìn)展[J];分析化學(xué);2004年03期

4 顏承農(nóng);童金強(qiáng);熊丹;劉義;潘祖亭;;熒光光譜法研究培氟沙星與牛血清白蛋白結(jié)合反應(yīng)特征[J];分析化學(xué);2006年06期

5 劉保生,趙長(zhǎng)容,張紅醫(yī),王甫麗,楊更亮;秦皮甲素、秦皮乙素與血清白蛋白的相互作用[J];分析科學(xué)學(xué)報(bào);2005年01期

6 張朝紅,臧樹(shù)良,耿兵,鐵梅,吳林友,蘇欣,馮沖;紫外和圓二色光譜法研究丁基錫化合物與牛血清白蛋白的相互作用[J];分析科學(xué)學(xué)報(bào);2005年02期

7 金瑞祥,張貴珠,馮喜增,何錫文,史慧明;氟喹諾酮類藥物與牛血清白蛋白作用的研究[J];分析科學(xué)學(xué)報(bào);1997年02期

8 王騰;何曉囡;董穎;張志紅;郭曉燕;相秉仁;;布南色林與人血清白蛋白相互作用的光譜學(xué)研究[J];分析試驗(yàn)室;2012年01期

9 安娜;敖登高娃;;頭孢噻肟-Cu(Ⅱ)-牛血清白蛋白相互作用的熒光光譜法研究[J];分析試驗(yàn)室;2012年02期

10 徐巍;吳霞;周海平;劉瀟_g;楊景和;范金勇;張梅鳳;;吡蚜酮與牛血清白蛋白的相互作用[J];高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào);2009年11期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 唐金艷;光譜法研究三種藥物與BSA的相互作用[D];湖北師范學(xué)院;2011年

2 李強(qiáng);黃酮類化合物與牛血清白蛋白的相互作用研究[D];南昌大學(xué);2011年

3 鄧世星;光譜法研究血清白蛋白及殼聚糖與染料的相互作用及分析應(yīng)用[D];西南大學(xué);2007年

  本文關(guān)鍵詞：光譜法研究對(duì)硝基苯酚、蘇丹紅Ⅲ與牛血清白蛋白的相互作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：258072