【摘要】：基于微流控混合器,采用連續(xù)流探測方法,在北京同步輻射裝置真空紫外光譜實(shí)驗(yàn)站發(fā)展了毫秒動(dòng)態(tài)圓二色譜探測方法。石英微流控混合器采用深度離子刻蝕技術(shù)加工,通道深度44.5μm�；旌掀鞑捎蒙咝瓮ǖ缹�(shí)現(xiàn)溶液的快速混合。通過熒光倒置顯微鏡,在模擬真實(shí)實(shí)驗(yàn)條件的高粘度溶液中,觀察蛇形通道內(nèi)溶液混合的熒光圖像,進(jìn)行混合效率測試。500μL·min~(-1)流量下,目前可實(shí)現(xiàn)4.5~270μs的時(shí)間尺度探測。利用微流控混合器進(jìn)行動(dòng)態(tài)探測,同步輻射紫外光必須聚焦,但由于聚焦透鏡波長色散引起的焦點(diǎn)位移,導(dǎo)致圓二色譜發(fā)生畸變。通過精確測試不同波長對(duì)應(yīng)焦點(diǎn)的相對(duì)位置,然后在圓二色譜掃描中實(shí)現(xiàn)波長和焦點(diǎn)位置精確的反饋控制,獲得準(zhǔn)確的圓二色譜。利用所發(fā)展的方法,測試了去折疊狀態(tài)下的細(xì)胞色素c恢復(fù)折疊的動(dòng)態(tài)同步輻射圓二色譜,在4.5μs處折疊恢復(fù)54%。這種方法將為生物大分子折疊動(dòng)力學(xué)研究提供新的探測手段。

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