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海產(chǎn)品中霍亂弧菌、副溶血性弧菌和單增李斯特菌三重熒光定量PCR檢測方法的建立

發(fā)布時間:2019-11-08 11:51
【摘要】:目的:建立一種同時定量檢測霍亂弧菌、副溶血性弧菌、單增李斯特菌的三重PCR方法。方法:依據(jù)霍亂弧菌CTX遺傳單元中zot毒力基因;副溶血性弧菌TDH中tl基因;單增李斯特菌hly基因,設計特異性引物探針,建立和評價了檢測試劑盒性能。結(jié)果:霍亂弧菌、副溶血性弧菌、單增李斯特菌濃度在10~2~10~5cfu/m L標準曲線線性相關(guān)系數(shù)分別為0.9998、0.999、0.9963。三種致病菌10~5cfu/m L與10~3cfu/m L兩種檢測濃度對數(shù)值,批內(nèi)變異系數(shù)分別為0.40%、0.83%、0.49%與0.75%、0.81%、0.64%;0.76%、1.03%、0.62%與1.06%、0.72%、1.26%;0.62%、0.51%、0.81%和1.38%、0.76%、2.34%;批間變異系數(shù)分別為0.58%與0.76%;0.83%與1.01%;0.66%與1.58%。檢測靈敏度分別為:23、16、35 cfu/m L。結(jié)論:本文所建立的檢測試劑盒適合于海產(chǎn)品等產(chǎn)品中三種致病菌的快速篩檢。
【圖文】:

擴增曲線,霍亂弧菌,標準品,副溶血性弧菌


杉剖,

本文編號:2557833

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