【摘要】：微乳電動(dòng)色譜(MEEKC)是使用微乳作為分離介質(zhì)的電動(dòng)色譜技術(shù),因其具有高效的分離效率、廣泛的適用范圍和極少的樣品消耗量等優(yōu)勢(shì),自有研究報(bào)道以來一直很受關(guān)注,特別適合于復(fù)雜混合物的分析。作為MEEKC分離介質(zhì)的微乳液是一種納米級(jí)的液滴分散在另一種不相混溶的液體中形成的熱力學(xué)穩(wěn)定體系。因?yàn)槲⑷橐旱尉哂袃?nèi)部疏水、外側(cè)親水和各向異性的類生物膜結(jié)構(gòu),理論上MEEKC也可像其他生物分配色譜(BPC)一樣,如磷脂膜色譜(IAM)、膠束液相或電動(dòng)色譜(MLC,MELC)和脂質(zhì)體電動(dòng)色譜(LEKC)等,用于模擬化合物在生物膜上的被動(dòng)擴(kuò)散過程。但是由于經(jīng)典的MEEKC常以十二烷基硫酸鈉(SDS)為表面活性劑,其微乳構(gòu)成與生物膜成分存在明顯差異,MEEKC應(yīng)用于模擬生物膜研究的報(bào)道尚為少見。本研究以含有生物類表面活性劑磷脂和膽酸鈉(SC)的微乳作為電動(dòng)色譜中的分離介質(zhì),通過對(duì)不同結(jié)構(gòu)化合物集合的定量結(jié)構(gòu)-保留(QSRR)關(guān)系研究,分析新型磷脂MEEKC體系中的溶質(zhì)保留機(jī)制,并選擇一個(gè)較好的MEEKC體系用于藥物穩(wěn)態(tài)腦/血漿濃度比值(log BB)的預(yù)測(cè)。目的:以大豆磷脂為主要表面活性劑制備適合毛細(xì)管電動(dòng)色譜使用的的微乳體系,應(yīng)用溶劑化參數(shù)模型研究化合物的定量結(jié)構(gòu)保留關(guān)系,闡述化合物與微乳擬生物膜間的分子間作用機(jī)制,并考察磷脂微乳電動(dòng)色譜體系作為藥物血腦屏障通透性體外預(yù)測(cè)工具的實(shí)際價(jià)值。方法:以大豆磷脂、SDS、膽酸鈉或全氟辛基磺酸鉀等為表面活性劑,以正丁醇為助表面活性劑,庚烷、辛醇或肉豆蔻酸異丙酯(IPM)作為油相,磷酸鹽溶液為水相,制備適合于毛細(xì)管電泳使用的微乳體系。通過測(cè)定微乳的粒徑和Zeta電位變化考察微乳結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,通過測(cè)定苯甲酰胺、鄰甲苯胺和2-萘酚保留因子的重復(fù)性考察待測(cè)MEEKC體系的穩(wěn)定性。使用動(dòng)態(tài)涂層毛細(xì)管,以二甲基亞砜和十二烷基苯分別做為電滲流和微乳液滴的遷移標(biāo)記物,測(cè)定26個(gè)具有不同結(jié)構(gòu)的小分子中性化合物在微乳電動(dòng)色譜體系下的保留因子,建立線性溶劑化能量關(guān)系(LSER)方程,并分析各分子間作用力在溶質(zhì)分配到微乳液滴過程中的貢獻(xiàn)。利用LSER方程系數(shù),采用矢量距離法比較各MEEKC體系間或與其他生物分配過程的類似性。應(yīng)用所建的微乳體系ME5,在p H 7.4條件下測(cè)定了34種藥物的保留因子,并結(jié)合其他分子結(jié)構(gòu)參數(shù)建立藥物log BB值的預(yù)測(cè)模型。結(jié)果:共制備了18種微乳體系,在只改變油相而其他組成不變的情況下,微乳的粒徑和Zeta電位沒有明顯差異,且在30 d內(nèi)無明顯變化。建立了26個(gè)小分子化合物在18種微乳體系下的LSER方程,各方程都是系數(shù)v和b的絕對(duì)值較大,且均是前者為正后者為負(fù)。油相種類及濃度對(duì)LSER方程系數(shù)無明顯影響。選擇ME5體系(2.00%SP-3.50%SC-6.0%丁醇-0.7%辛醇-87.80%20 mmol·L-1磷酸二氫鈉磷酸鹽緩沖液,p H 7.4)模擬藥物的透血腦屏障過程,34種藥物的log k值與log BB值之間沒有顯著的線性相關(guān)性(log BB=0.7192 log k-0.2713,R2=0.487,n=34)。引入分子量(MW)、分子體積(MV)、分子極性表面積(PSA)、氫鍵受體數(shù)目(HBA)、自由旋轉(zhuǎn)鍵個(gè)數(shù)(FRB)、氫鍵供體數(shù)目(HBD)六個(gè)理化參數(shù)后,所建立的多元回歸方程的相關(guān)性得到顯著提高:log BB=0.468+0.411 log k-0.219 PSA/10+0.488 MW/100+0.088 HBA-0.007HBD+0.050 FRB-0.579 MV/100(R2=0.742,n=34)。結(jié)論:1磷脂類微乳電動(dòng)色譜體系下的溶質(zhì)保留特征與其他微乳電動(dòng)色譜體系特征基本相似,即溶質(zhì)的體積和氫鍵堿度對(duì)其在微乳中的保留影響較大,溶質(zhì)體積增加利于保留,氫鍵堿性增加減弱保留。各體系LSER方程系數(shù)間的矢量距離也非常接近,說明表面活性劑類型和油相組成對(duì)中性溶質(zhì)在微乳體系中的保留選擇性均無明顯影響。2應(yīng)用本研究篩選的磷脂微乳體系所測(cè)定的藥物log k值尚不能直接用于藥物log BB值的預(yù)測(cè),只有結(jié)合其他分子結(jié)構(gòu)參數(shù)進(jìn)行多元回歸才能建立較好的預(yù)測(cè)模型。但因所建立的磷脂-MEEKC體系具有高效分離、穩(wěn)定重現(xiàn)、經(jīng)濟(jì)方便的特點(diǎn),其作為高通量log BB值篩選工具仍有一定的應(yīng)用價(jià)值。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：O652.6;R96

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 馬新宇;倪鑫炯;盧婕;邢曉平;曹玉華;曹光群;;聚(苯乙烯-co-甲基丙烯酸)自組裝膠束假固定相電動(dòng)色譜的特性[J];色譜;2015年04期

2 劉建芳;隋曉t，

本文編號(hào)：2552625