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動(dòng)力學(xué)毛細(xì)管電泳法求解蛋白質(zhì)與單鏈脫氧核糖核苷酸結(jié)合的解離常數(shù)及可靠性分析

發(fā)布時(shí)間:2019-10-15 13:08
【摘要】:平衡混合物的非平衡毛細(xì)管電泳(NECEEM)可用于測(cè)定復(fù)合物的解離常數(shù)(K_d)。該文以單鏈脫氧核糖核苷酸結(jié)合蛋白(SSB)和單鏈脫氧核糖核苷酸(ssDNA)相互作用為模型,分析了相互作用強(qiáng)弱的電泳圖譜特征,測(cè)定了不同條件下復(fù)合物的K_d,建立了基于積分偏差的誤差分析方法。結(jié)果表明,SSB與ssDNA相互作用強(qiáng)弱所致的電泳圖差異、SSB與ssDNA的濃度比、毛細(xì)管分離溫度均影響K_d的計(jì)算。此外,基于25℃時(shí)SSB與5′-GGTTGGTGTGGTTGG-3′(15mer)人凝血酶適配體作用模型的數(shù)值分析結(jié)果表明,在現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)條件下,手動(dòng)積分峰面積時(shí)產(chǎn)生的面積偏差對(duì)K_d計(jì)算結(jié)果有影響,但在10%的偏差區(qū)間內(nèi),所求K_d值的最大相對(duì)偏差小于7%,所求K_d值的誤差可忽略。該文證實(shí)了基于NECEEM求解動(dòng)力學(xué)相關(guān)參數(shù)的方法可靠。
【作者單位】: 北京理工大學(xué)生命學(xué)院;公安部第一研究所;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(21675012,21375008,21175011)~~
【分類號(hào)】:Q50;O658.9

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1 雷鳴,黃德盈,蘭金貴;La(Ⅲ)與脫氧核糖核苷酸的相互作用[J];中南民族學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1998年04期

2 ;[J];;年期

,

本文編號(hào):2549649

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