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熒光DNA-銀納米簇對生物分子及汞離子的檢測

發(fā)布時間:2019-07-11 07:00
【摘要】:近些年來,以DNA為模板合成的銀納米簇(DNA-Ag NCs)因其粒徑小且具有優(yōu)異的光學性質(zhì)而受到科研工作者的廣泛關(guān)注。結(jié)合文獻本文設計了不同序列的模板DNA來合成Ag NCs,并分別對其光學性質(zhì)進行了研究。從中篩選出熒光性能較好的B-DNA-Ag NCs對生物分子和重金屬Hg~(2+)進行了檢測,并進一步探究了DNA-Ag NCs與靶分子的作用機理。主要研究工作如下:(1)設計了不同序列的ssDNA模板,合成了有熒光性能的DNA-Ag NCs,并對DNA-Ag NCs的光學性質(zhì)進行了研究。結(jié)果表明,不同序列DNA合成的Ag NCs的熒光性質(zhì)不同,從中選擇了量子產(chǎn)率高(~29%)且熒光較穩(wěn)定的B-DNA-Ag NCs,進行了后續(xù)的檢測實驗。(2)以B-DNA-Ag NCs作為熒光探針對生物硫醇(Cys、GSH)和乙酰膽堿酯酶(AChE)的活性進行了檢測。該方法對Cys和GSH的檢出限分別為0.134μM和0.172μM,檢測范圍分別為0-5.0μM和0.5-4.5μM。另外,該方法通過DNA-Ag NCs熒光強度變化可以間接檢測AChE的活性,對AChE活性的檢出限為0.071 U/L,檢測范圍為0-4.0 U/L。進一步對巰基分子與DNA-Ag NCs作用機理進行了研究。紫外可見吸收結(jié)果表明二者作用形成了不發(fā)射熒光的復合物,此過程屬于靜態(tài)淬滅;瞬態(tài)熒光結(jié)果表明巰基分子與DNA-Ag NCs存在激發(fā)態(tài)的相互作用,此過程屬于動態(tài)淬滅;透射電鏡結(jié)果表明二者相互作用使得DNA-Ag NCs聚集成較大顆粒進而導致熒光淬滅。該方法還可應用于尿液中生物硫醇的檢測。(3)以B-DNA-Ag NCs為熒光探針對溶液中的Hg~(2+)進行了檢測。該方法對Hg~(2+)的檢出限低至4.5 nM,檢測范圍為0-150 nM。進一步對Hg~(2+)與DNA-Ag NCs可能的作用機理進行了研究。紫外可見吸收結(jié)果表明,Hg~(2+)與DNA-Ag NCs作用生成了不發(fā)射熒光的復合物;綜合穩(wěn)態(tài)熒光及瞬態(tài)熒光結(jié)果分析得出,Hg~(2+)80 nM時,淬滅過程為純粹的動態(tài)淬滅,Hg~(2+)80 nM時,淬滅過程既存在動態(tài)淬滅又存在靜態(tài)淬滅;透射電鏡結(jié)果排除了熒光淬滅是由于DNA-Ag NCs的聚集引起的,另外EDTA和NaBH4的加入并未能使DNA-Ag NCs的熒光恢復,因此排除了金屬間的相互作用。此方法還被應用于湖水及自來水中Hg~(2+)的檢測,具有潛在的應用價值。
文內(nèi)圖片:不同序列單鏈DNA合成AgNCs的激發(fā)和發(fā)射圖譜
圖片說明: 熒光 DNA-銀納米簇對生物分子及汞離子的檢測合成了多種 DNA-Ag NCs,這些 DNA-Ag NCs 的熒光最大發(fā)射波05 nm,如圖 1.1。成功實現(xiàn)了對 DNA-Ag NCs 熒光發(fā)射的調(diào)控,Chang[25]課題組利用不同長度的 DNA 合成了不同發(fā)射波長的 探究了 DNA 序列及長度影響 Ag NCs 光學性質(zhì)的機理。實驗不同序列 DNA 的構(gòu)象不同,氧化 Ag NCs 的狀態(tài)不同,以及模子個數(shù)不同等導致納米簇粒徑大小不同從而使得 DNA-Ag NCs
文內(nèi)圖片:五種不同長度DNA合成AgNCs的熒光光譜
圖片說明: 序列 DNA 的構(gòu)象不同,氧化 Ag NCs 的狀態(tài)不同,,以數(shù)不同等導致納米簇粒徑大小不同從而使得 DNA-Ag 圖 1.1 不同序列單鏈 DNA 合成 Ag NCs 的激發(fā)和發(fā)射圖譜dy-state excitation and emission spectra for distinct ssDNA
【學位授予單位】:山西大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:O657.3

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本文編號:2512964

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