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基于液滴微流控的殼寡糖植物免疫誘導(dǎo)劑熒光檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2019-07-05 11:25
【摘要】:為了建立基于液滴微流控芯片平臺(tái)的植物免疫誘導(dǎo)劑的熒光信號(hào)檢測(cè)技術(shù),該文設(shè)計(jì)制作了具有液滴生成結(jié)構(gòu)的芯片,制備包裹煙草(BY-2)細(xì)胞的液滴,并對(duì)包裹了細(xì)胞的液滴數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。將包裹細(xì)胞的液滴孵育一氧化氮探針后使用質(zhì)量濃度為50μg/m L殼寡糖處理,在熒光顯微鏡下觀測(cè)其產(chǎn)生的熒光,利用熒光酶標(biāo)儀對(duì)比采用96孔板和液滴承載的細(xì)胞的熒光變化趨勢(shì)。結(jié)果顯示,水相流速為100μL/h,油相流速為300μL/h時(shí),微流控芯片產(chǎn)生的液滴尺寸適合包裹細(xì)胞,其中液滴包裹單細(xì)胞的比例達(dá)22.9%。經(jīng)殼寡糖處理后的細(xì)胞在生成的液滴中產(chǎn)生了明顯的熒光,且用96孔板和液滴承載的細(xì)胞的熒光變化趨勢(shì)一致。研究結(jié)果為開發(fā)基于液滴微流控技術(shù)的植物免疫誘導(dǎo)劑的高通量篩選平臺(tái)提供參考。
[Abstract]:In order to establish the fluorescence signal detection technology of plant immune inducer based on droplet microfluidic chip platform, a chip with droplet formation structure was designed and fabricated, and the droplets wrapped in tobacco (BY-2) cells were prepared, and the number of droplets wrapped in the cells was statistically analyzed. The nitric oxide probe was incubated with the coated cell droplets and treated with 50 渭 g / mL chitosan oligosaccharide. The fluorescence produced by the probe was observed under the fluorescence microscope. The fluorescence change trend of the cells carried by 96 well plate and droplet was compared by fluorescence enzyme labeling instrument. The results showed that when the flow rate of water phase was 100 渭 L / h and that of oil phase was 300 渭 L / h, the droplet size produced by microfluidic chip was suitable for wrapping cells, and the proportion of single cell wrapped by droplets was 22.9%. The cells treated with chitosan oligosaccharide produced obvious fluorescence in the droplets, and the fluorescence trend of the cells loaded with 96 well plates and droplets was the same. The results provide a reference for the development of a high throughput screening platform for plant immune inducers based on droplet microfluidic technology.
【作者單位】: 大連工業(yè)大學(xué)食品學(xué)院;中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所;大連海事大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31370391) 中科院STS計(jì)劃(KFJ-SW-STS-143) 大連市人才項(xiàng)目(2016RQ064) 遼寧省教育廳項(xiàng)目(2016J008)
【分類號(hào)】:TQ458;O657.3

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本文編號(hào):2510483

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