【摘要】：展青霉素(PAT)是一種毒性很強(qiáng)的小分子真菌毒素,常污染蘋(píng)果汁及制品。傳統(tǒng)PAT檢測(cè)法存在耗時(shí)、成本高等不足,開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單、快速的PAT檢測(cè)方法十分重要。Mn摻雜ZnS量子點(diǎn)(Mn-ZnS)光學(xué)傳感性能優(yōu)越,制備簡(jiǎn)單且無(wú)毒,具有的磷光發(fā)射可提高檢測(cè)靈敏度。由于PAT的高反應(yīng)活性,其抗體制備困難且目前尚無(wú)市售抗體可用。分子印跡聚合物(MIPs)是一類(lèi)人工識(shí)別性材料,被稱為“人工抗體”。本研究利用MIPs修飾Mn-ZnS來(lái)構(gòu)建磷光納米傳感器(MIP-Mn:ZnS)以檢測(cè)蘋(píng)果汁中的PAT,主要對(duì)傳感器的制備、吸附性能、選擇性、檢測(cè)性能等進(jìn)行了探討,并利用該傳感器檢測(cè)實(shí)際樣品中的PAT。論文的主要結(jié)論如下:1.以6-羥基煙酸(6-HNA)為假模板、3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)為功能單體、硅酸四乙酯(TEOS)為交聯(lián)劑,在6-HNA:APTES:TEOS=1:4:8的最佳摩爾比條件下通過(guò)表面分子印跡凝膠-溶膠技術(shù)制備了粒徑約為24 nm的磷光納米傳感器。2.以0.1 mol/L pH 6.0的PBS為優(yōu)選緩沖液,對(duì)該傳感器的吸附性能測(cè)試表明,MIP-Mn:ZnS對(duì)PAT/6-HNA的吸附能力、傳質(zhì)速率顯著高于非印跡量子點(diǎn)(NIP-Mn:ZnS)。相比結(jié)構(gòu)類(lèi)似物2-HNA、6-HNA、闊馬酸及5-羥甲基糠醛(5-HMF),PAT對(duì)MIP/NIP-Mn:ZnS的親和磷光猝滅效率最高,最大印跡因子為2.02。MIP-Mn:ZnS能在PAT與OTA、DON、AFB1的二元體系中識(shí)別PAT,且濃度低于30.9μmol/L的5-HMF對(duì)檢測(cè)無(wú)顯著影響。表明MIP-Mn:ZnS對(duì)PAT具有良好的親和吸附性能和選擇識(shí)別性能。3.在優(yōu)化條件下(pH 6.0、MIP-Mn:ZnS濃度0.04 mg/mL、孵育時(shí)間30 min),PAT對(duì)MIP-Mn:ZnS的磷光猝滅符合Stern-Volmer方程(R2=0.9945),猝滅常數(shù)KSV,MIP可達(dá)48400 M-1。方法的線性范圍為0.43~6.50μmol/L,檢測(cè)限(LOD)為0.32μmol/L。4.干擾試驗(yàn)結(jié)果顯示,果汁中可能的有機(jī)物(檸檬酸鈉、蔗糖、葡萄糖、果糖)及常見(jiàn)陰陽(yáng)離子(K+、Na+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Zn~(2+)、Cu~(2+)、Ni~(2+)、Mn~(2+)、Al3+、NO3-、SO42-、PO43-)對(duì)MIP-Mn:ZnS檢測(cè)PAT無(wú)顯著影響,表明MIP-Mn:ZnS抗干擾能力強(qiáng),可用于蘋(píng)果汁中PAT的磷光檢測(cè)。5.實(shí)際樣品分析表明,該方法的加標(biāo)回收率為102.9~127.2%(加標(biāo)水平為1~3μmol/L),相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過(guò)4.95%。本方法的分析結(jié)果與高效液相色譜法(HPLC)的檢測(cè)結(jié)果基本一致(P0.05),表明方法具有良好的準(zhǔn)確性和可行性。本研究構(gòu)建了一種簡(jiǎn)單、快速、可行的蘋(píng)果汁中展青霉素非免疫磷光檢測(cè)方法,可為復(fù)雜食品基質(zhì)中展青霉素的快速檢測(cè)提供一定的理論及技術(shù)依據(jù)。
[Abstract]:(PAT) is a highly toxic small molecular mycotoxin, which often pollutes apple juice and products. The traditional PAT detection method has the disadvantages of time consuming and high cost. It is very important to develop a simple and fast PAT detection method. Mn doped ZnS quantum dots (Mn-ZnS) have excellent optical sensing performance, simple and non-toxic preparation. The detection sensitivity can be improved by phosphorescence emission. Because of the high reactive activity of PAT, it is difficult to prepare its antibody and there is no available antibody. Molecularly imprinted polymer (MIPs) is a kind of artificial recognition material, which is called artificial antibody. In this study, MIPs modified Mn-ZnS was used to construct phosphorescent nanosensor (MIP-Mn:ZnS) to detect PAT, in apple juice. The sensor is used to detect the PAT. in the actual sample. The main conclusions are as follows: 1. 6-hydroxynicotinic acid (6-HNA) was used as pseudo-template, 3-aminopropyl triethoxysilane (APTES) as functional monomer and tetraethyl silicate (TEOS) as crosslinking agent. A phosphorescence nanosensor with a particle size of about 24 nm was prepared by surface molecularly imprinted gel-sol technique under the optimum molar ratio of 6-HNA:APTES:TEOS=1:4:8. 2. Using 0.1 mol/L pH 6.0 PBS as the optimal buffer, the adsorption performance of the sensor shows that the adsorption ability and mass transfer rate of MIP-Mn:ZnS to PAT/6-HNA are significantly higher than that of non-imprinted quantum dots (NIP-Mn:ZnS). Compared with the structural analogue 2-HNA-6-HNA, the affinity quenching efficiency of MIP/NIP-Mn:ZnS was the highest in the presence of lataric acid and 5-hydroxymethylfurfural (5-HMF), PAT). The maximum imprinting factor was that 2.02.MIP-Mn:ZnS could be used in PAT and OTA,DON,. There was no significant effect on the detection of PAT, in the binary system of AFB1 when the concentration of 5-HMF was less than 30.9 渭 mol/L. The results show that MIP-Mn:ZnS has good affinity and selective recognition properties for PAT. 3. Under the optimized conditions (pH 6.0 / MIP-Mn: ZnS concentration 0.04 mg/mL, incubation time 30 min), PAT), the phosphorescence quenching of MIP-Mn:ZnS is in accord with Stern-Volmer equation (R2P 0.9945), and the quenching constant KSV,MIP can reach 48400 M-1. The linear range of the method is 0.430.50 渭 mol/L, and the detection limit (LOD) is 0.32 渭 mol/L.4.. The results of interference test showed that the possible organics in juice (sodium citrate, sucrose, glucose, fructose) and common anions (K, Na, Ca~ (2), Mg~ (2), Zn~ (2), Cu~ (2), Ni~ (2), Mn~ (2), Al3 and NO3-,SO42-,PO43- have no significant effect on MIP-Mn:ZnS detection of PAT, which indicates that MIP-Mn:ZnS has strong anti-interference ability and can be used in the phosphorescence detection of PAT in apple juice. The actual sample analysis shows that the recoveries of the method are 102.9% and 127.2% (the standard addition level is 1 渭 mol/L), and the relative standard deviation is less than 4.95%. The analytical results of this method were basically consistent with that of (HPLC) by HPLC (P0.05), which indicated that the method had good accuracy and feasibility. In this study, a simple, rapid and feasible non-immunophosphorimetric method for the detection of acropenicillin in apple juice was established, which can provide a theoretical and technical basis for rapid detection of acropenicillin in complex food matrix.
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：TS255.44;O657.3

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄧健康;劉璇;吳昕燁;畢金峰;焦藝;鐘耀廣;;蘋(píng)果汁香氣物質(zhì)研究進(jìn)展[J];食品工業(yè)科技;2015年04期

2 楊世亞;邱景富;;食品中真菌毒素的污染狀況與檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2012年22期

3 王婭芳;劉利亞;黃培林;;展青霉素檢測(cè)方法及污染情況的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2012年19期

4 李眾;祝欣;董朝青;黃香宜;陳虹錦;任吉存;;熒光量子點(diǎn)的水相合成及其在化學(xué)和生物分析中的應(yīng)用[J];高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào);2010年10期

5 李琰;;量子點(diǎn)表面分子印跡的研究與進(jìn)展[J];實(shí)驗(yàn)室科學(xué);2009年02期

6 陳長(zhǎng)寶;周杰;吳春輝;;分子印跡技術(shù)研究進(jìn)展[J];化學(xué)研究與應(yīng)用;2006年08期

7 烏日娜,李建科,仇農(nóng)學(xué),王平,楊曉媚;濃縮蘋(píng)果汁加工鏈中棒曲霉素的動(dòng)態(tài)分析研究[J];食品工業(yè)科技;2005年03期

8 黃偉,余以剛,劉繼平,林華山,李光偉;水果及果汁飲料中展青霉素和HMF分析方法研究進(jìn)展[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2003年01期

9 王素梅,楊文領(lǐng);高效液相色譜法測(cè)定濃縮蘋(píng)果汁中棒曲霉素[J];生物技術(shù);2003年01期

10 吳南;王玉華;劉勇;宋家玉;楊新民;蘇誠(chéng)玉;劉興;;我國(guó)部分地區(qū)水果制品中展青霉素含量的調(diào)查[J];中國(guó)食品衛(wèi)生雜志;1992年03期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 趙琪;分子印跡復(fù)合材料的制備及用于食品和環(huán)境樣品中污染物快速檢測(cè)的研究[D];吉林大學(xué);2015年

2 張菲;基于量子點(diǎn)的納米熒光探針的制備及其在細(xì)胞和生物活體成像中的應(yīng)用[D];南開(kāi)大學(xué);2014年

3 王啟歲;水溶性量子點(diǎn)的合成、生物效應(yīng)及在光動(dòng)力治療中的探索[D];武漢理工大學(xué);2012年

4 何瑜;基于Mn摻雜ZnS量子點(diǎn)的室溫磷光傳感[D];南開(kāi)大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前8條

1 王欣然;抗展青霉素單鏈抗體的制備及鑒定[D];吉林大學(xué);2015年

2 王志平;分析檢測(cè)用熒光量子點(diǎn)熒光探針[D];華東理工大學(xué);2014年

3 李倩倩;展青霉素分子印跡聚合物的制備及應(yīng)用研究[D];天津科技大學(xué);2014年

4 范萍;水溶性量子點(diǎn)熒光探針的制備及其在食品分析檢測(cè)中的應(yīng)用[D];湘潭大學(xué);2013年

5 李文君;霉菌毒素的量子點(diǎn)熒光免疫分析技術(shù)[D];河南科技大學(xué);2013年

6 孔金換;基于分子印跡技術(shù)的復(fù)雜食品分離分析方法研究與應(yīng)用[D];湖南大學(xué);2012年

7 田園;展青霉素特異性抗體的制備及其免疫學(xué)檢測(cè)方法的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

8 于學(xué)雷;棒曲霉素硅膠表面印跡聚合物的制備及其SPE-HPLC應(yīng)用[D];上海交通大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：2359807