【摘要】：展青霉素(PAT)是一種毒性很強的小分子真菌毒素,常污染蘋果汁及制品。傳統(tǒng)PAT檢測法存在耗時、成本高等不足,開發(fā)簡單、快速的PAT檢測方法十分重要。Mn摻雜ZnS量子點(Mn-ZnS)光學傳感性能優(yōu)越,制備簡單且無毒,具有的磷光發(fā)射可提高檢測靈敏度。由于PAT的高反應(yīng)活性,其抗體制備困難且目前尚無市售抗體可用。分子印跡聚合物(MIPs)是一類人工識別性材料,被稱為“人工抗體”。本研究利用MIPs修飾Mn-ZnS來構(gòu)建磷光納米傳感器(MIP-Mn:ZnS)以檢測蘋果汁中的PAT,主要對傳感器的制備、吸附性能、選擇性、檢測性能等進行了探討,并利用該傳感器檢測實際樣品中的PAT。論文的主要結(jié)論如下:1.以6-羥基煙酸(6-HNA)為假模板、3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)為功能單體、硅酸四乙酯(TEOS)為交聯(lián)劑,在6-HNA:APTES:TEOS=1:4:8的最佳摩爾比條件下通過表面分子印跡凝膠-溶膠技術(shù)制備了粒徑約為24 nm的磷光納米傳感器。2.以0.1 mol/L pH 6.0的PBS為優(yōu)選緩沖液,對該傳感器的吸附性能測試表明,MIP-Mn:ZnS對PAT/6-HNA的吸附能力、傳質(zhì)速率顯著高于非印跡量子點(NIP-Mn:ZnS)。相比結(jié)構(gòu)類似物2-HNA、6-HNA、闊馬酸及5-羥甲基糠醛(5-HMF),PAT對MIP/NIP-Mn:ZnS的親和磷光猝滅效率最高,最大印跡因子為2.02。MIP-Mn:ZnS能在PAT與OTA、DON、AFB1的二元體系中識別PAT,且濃度低于30.9μmol/L的5-HMF對檢測無顯著影響。表明MIP-Mn:ZnS對PAT具有良好的親和吸附性能和選擇識別性能。3.在優(yōu)化條件下(pH 6.0、MIP-Mn:ZnS濃度0.04 mg/mL、孵育時間30 min),PAT對MIP-Mn:ZnS的磷光猝滅符合Stern-Volmer方程(R2=0.9945),猝滅常數(shù)KSV,MIP可達48400 M-1。方法的線性范圍為0.43~6.50μmol/L,檢測限(LOD)為0.32μmol/L。4.干擾試驗結(jié)果顯示,果汁中可能的有機物(檸檬酸鈉、蔗糖、葡萄糖、果糖)及常見陰陽離子(K+、Na+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Zn~(2+)、Cu~(2+)、Ni~(2+)、Mn~(2+)、Al3+、NO3-、SO42-、PO43-)對MIP-Mn:ZnS檢測PAT無顯著影響,表明MIP-Mn:ZnS抗干擾能力強,可用于蘋果汁中PAT的磷光檢測。5.實際樣品分析表明,該方法的加標回收率為102.9~127.2%(加標水平為1~3μmol/L),相對標準偏差不超過4.95%。本方法的分析結(jié)果與高效液相色譜法(HPLC)的檢測結(jié)果基本一致(P0.05),表明方法具有良好的準確性和可行性。本研究構(gòu)建了一種簡單、快速、可行的蘋果汁中展青霉素非免疫磷光檢測方法,可為復(fù)雜食品基質(zhì)中展青霉素的快速檢測提供一定的理論及技術(shù)依據(jù)。
[Abstract]:(PAT) is a highly toxic small molecular mycotoxin, which often pollutes apple juice and products. The traditional PAT detection method has the disadvantages of time consuming and high cost. It is very important to develop a simple and fast PAT detection method. Mn doped ZnS quantum dots (Mn-ZnS) have excellent optical sensing performance, simple and non-toxic preparation. The detection sensitivity can be improved by phosphorescence emission. Because of the high reactive activity of PAT, it is difficult to prepare its antibody and there is no available antibody. Molecularly imprinted polymer (MIPs) is a kind of artificial recognition material, which is called artificial antibody. In this study, MIPs modified Mn-ZnS was used to construct phosphorescent nanosensor (MIP-Mn:ZnS) to detect PAT, in apple juice. The sensor is used to detect the PAT. in the actual sample. The main conclusions are as follows: 1. 6-hydroxynicotinic acid (6-HNA) was used as pseudo-template, 3-aminopropyl triethoxysilane (APTES) as functional monomer and tetraethyl silicate (TEOS) as crosslinking agent. A phosphorescence nanosensor with a particle size of about 24 nm was prepared by surface molecularly imprinted gel-sol technique under the optimum molar ratio of 6-HNA:APTES:TEOS=1:4:8. 2. Using 0.1 mol/L pH 6.0 PBS as the optimal buffer, the adsorption performance of the sensor shows that the adsorption ability and mass transfer rate of MIP-Mn:ZnS to PAT/6-HNA are significantly higher than that of non-imprinted quantum dots (NIP-Mn:ZnS). Compared with the structural analogue 2-HNA-6-HNA, the affinity quenching efficiency of MIP/NIP-Mn:ZnS was the highest in the presence of lataric acid and 5-hydroxymethylfurfural (5-HMF), PAT). The maximum imprinting factor was that 2.02.MIP-Mn:ZnS could be used in PAT and OTA,DON,. There was no significant effect on the detection of PAT, in the binary system of AFB1 when the concentration of 5-HMF was less than 30.9 渭 mol/L. The results show that MIP-Mn:ZnS has good affinity and selective recognition properties for PAT. 3. Under the optimized conditions (pH 6.0 / MIP-Mn: ZnS concentration 0.04 mg/mL, incubation time 30 min), PAT), the phosphorescence quenching of MIP-Mn:ZnS is in accord with Stern-Volmer equation (R2P 0.9945), and the quenching constant KSV,MIP can reach 48400 M-1. The linear range of the method is 0.430.50 渭 mol/L, and the detection limit (LOD) is 0.32 渭 mol/L.4.. The results of interference test showed that the possible organics in juice (sodium citrate, sucrose, glucose, fructose) and common anions (K, Na, Ca~ (2), Mg~ (2), Zn~ (2), Cu~ (2), Ni~ (2), Mn~ (2), Al3 and NO3-,SO42-,PO43- have no significant effect on MIP-Mn:ZnS detection of PAT, which indicates that MIP-Mn:ZnS has strong anti-interference ability and can be used in the phosphorescence detection of PAT in apple juice. The actual sample analysis shows that the recoveries of the method are 102.9% and 127.2% (the standard addition level is 1 渭 mol/L), and the relative standard deviation is less than 4.95%. The analytical results of this method were basically consistent with that of (HPLC) by HPLC (P0.05), which indicated that the method had good accuracy and feasibility. In this study, a simple, rapid and feasible non-immunophosphorimetric method for the detection of acropenicillin in apple juice was established, which can provide a theoretical and technical basis for rapid detection of acropenicillin in complex food matrix.
【學位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：TS255.44;O657.3

【參考文獻】

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本文編號：2359806