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HPLC在線篩選芳香新塔花中抗氧化活性成分及其化學(xué)成分的分離與活性研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-08 09:20

  慢性疾病的形成與人體內(nèi)的自由基息息相關(guān),包括糖尿病、艾滋病、心血管疾病和衰老等。由于合成抗氧化劑的副作用,人們?cè)絹碓絻A向于高效、無毒的天然抗氧化劑。目前用于測(cè)定植物抗氧化劑的方法雖然不少,,但是缺少快速檢測(cè)的方法。本文以芳香新塔花為研究材料,建立了一種新的在線篩選方法快速檢測(cè)植物提取物中抗氧化活性化合物,并目標(biāo)分離篩選得到的化合物,為從天然產(chǎn)物來源中尋找和發(fā)現(xiàn)新型藥物提供新的途徑。由于芳香新塔花化學(xué)成分研究尚不深入,為此我們對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離并對(duì)分離得到的化合物活性進(jìn)行了研究。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下: 1.優(yōu)化了硫酸高鈰法測(cè)定抗氧化活性成分在不同酸性介質(zhì)、溫度、反應(yīng)時(shí)間、pH值、甲醇和乙腈體積分?jǐn)?shù)對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響,優(yōu)化條件為:以硫酸作為酸性介質(zhì),pH為1,溫度為室溫,反應(yīng)時(shí)間為20s,甲醇和乙腈作為溶劑對(duì)體系幾乎沒有影響。并在此基礎(chǔ)上測(cè)定了不同抗氧化活性物質(zhì)的抗氧化活性,為模擬硫酸高鈰在線篩選天然產(chǎn)物抗氧化性成分研究提供數(shù)據(jù)參考。 2.建立了快速篩選復(fù)雜混合物中抗氧化活性成分的HPLC-Ce(SO4)2在線檢測(cè)系統(tǒng),檢測(cè)部分優(yōu)化設(shè)置為:流動(dòng)相流速為1mL/min,Ce(SO4)2流速為0.2mL/min,反應(yīng)圈長(zhǎng)度為3m。應(yīng)用此系統(tǒng)分析了芳香新塔花中的抗氧化活性成分,并對(duì)在線篩選得到的化合物進(jìn)行了目標(biāo)分離。利用各種手段,從中分離得到9個(gè)具有抗氧化活性的物質(zhì),經(jīng)核磁共振對(duì)其解析,確定化合物分別為原兒茶酸(FT-1),迷迭香酸(FT-2),咖啡酸(FT-3),木犀草素(FT-4),喬松素-7-O-蕓香糖苷(FT-5),黃芩素(FT-6),山奈素(FT-7),槲皮素(FT-8)和芹菜素(FT-9),其中化合物FT-4,F(xiàn)T-5,F(xiàn)T-6和FT-9為首次從該植物中分離得到。與HPLC-DPPH法相比,分辨率高、與抗氧化活性物質(zhì)反應(yīng)迅速、篩選試劑穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn),具有更廣泛的適用性。 3.建立了循環(huán)制備液相色譜分離芳香新塔花中的化學(xué)成分,綜合利用各種分離技術(shù)(硅膠、中壓制備液相色譜及制備液相色譜)和波譜鑒定方法(1H NMR、13C NMR、HSQC、HMBC、ROESY、UV)從芳香新塔花中分離得到14個(gè)單體化合物,分別為云杉素(FT-10),金雀異黃酮(FT-11),Irisdichotototin D(FT-12),金合歡素-7-O-蕓香糖苷(FT-13),白楊素-7-O-蕓香糖苷(FT-14),4-羥基苯乙酮-4-O-β-D-芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(FT-15),4-羥基-3-甲氧基苯乙酮-4-O-β-D-芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(FT-16),Polybotrin(FT-17),1-O-對(duì)羥基肉桂酰單甘油酯(FT-18),5-羥甲基-2-呋喃甲醛(FT-19),金合歡素(FT-20),白楊素(FT-21),6,8-二-C-β-D-葡萄糖白楊素(FT-22),鄰苯二甲酸二丁酯(FT-23),其中化合物FT-10~12,F(xiàn)T-15~19,F(xiàn)T-22~23為首次從該植物中分離得到。 4.采用96孔板法測(cè)定分離得到的單體化合物對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的最小抑菌濃度(MIC),并對(duì)目標(biāo)分離得到的具有抗氧化活性物質(zhì)的化合物進(jìn)行體外抗氧化活性實(shí)驗(yàn)(DPPH法和ABTS法)。結(jié)果表明:槲皮素、金雀異黃酮、山奈素、迷迭香酸、黃芩素、金合歡素-7-O-蕓香糖苷、木犀草素、原兒茶酸、4-羥基-3-甲氧基苯乙酮-4-O-β-D-芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷表現(xiàn)出抑制金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的生長(zhǎng),其中以黃芩素的抑菌活性最強(qiáng),對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌抑菌的MIC分別為12.5μg/mL和25μg/mL;對(duì)在線篩選得到的抗氧化活性化合物均表現(xiàn)出一定的抗氧化活性,只是活性的強(qiáng)弱不同,其中以槲皮素的抗氧化活性最強(qiáng),DPPH和ABTS的IC50值分別為17.25μg/mL和5.64μg/mL。

【學(xué)位授予單位】:塔里木大學(xué)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R284;O657.7
【目錄】:

文章目錄
符號(hào)和縮略詞說明
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 自由基及其危害
    1.2 抗氧化劑
    1.3 體外抗氧化檢測(cè)方法
    1.4 混合物中天然抗氧化活性成分在線篩選方法
    1.5 化學(xué)成分
    1.6 本課題的目的及設(shè)計(jì)思路
        1.6.1 研究的目的和意義
        1.6.2 研究主要內(nèi)容
        1.6.3 研究思路和技術(shù)路線
第二章 硫酸高鈰法測(cè)定抗氧化活性物質(zhì)反應(yīng)條件的優(yōu)化
    2.1 主要儀器和試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果與分析
    2.4 小結(jié)
第三章 HPLC 在線篩選抗氧化活性物質(zhì)系統(tǒng)的建立及應(yīng)用
    3.1 主要儀器、試劑和材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 結(jié)果與分析
    3.4 小結(jié)
第四章 芳香新塔花化學(xué)成分的研究
    第一節(jié) 概述
    第二節(jié) 循環(huán)制備液相色譜分離芳香新塔花中的化學(xué)成分
        4.1 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3 結(jié)果與分析
        4.4 小結(jié)
    第三節(jié) 芳香新塔花分離得到的化合物結(jié)構(gòu)鑒定
        4.5 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定
    第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分
        4.6 主要儀器、試劑和材料
        4.7 提取分離流程
        4.8 化合物鑒定數(shù)據(jù)
第五章 芳香新塔花化學(xué)成分的活性研究
    第一節(jié) 芳香新塔花中分離得到的化合物的生物活性篩選
        5.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        5.2 抑制金黃色葡萄球菌和大腸桿菌活性檢測(cè)
        5.3 分離得到的單體化合物對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌抑菌活性
    第二節(jié) 在線篩選得到的化合物抗氧化活性測(cè)定
        5.4 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        5.5 抗氧化活性檢測(cè)
        5.6 結(jié)果與分析
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)介

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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10 戴玉婷;謝靜莉;許學(xué)書;方明;孫松鶴;;食醋與果汁濃度對(duì)苯生成量的影響[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2009年13期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 段琦梅;黃芪、黨參質(zhì)量評(píng)價(jià)及其提取物活性研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

2 劉素慧;大蒜連作障礙形成機(jī)理及EM緩解效應(yīng)的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

3 盧慧明;大型海藻龍須菜化學(xué)成分及其對(duì)中肋骨條藻化感作用研究[D];暨南大學(xué);2011年

4 蘇潤(rùn)洲;木質(zhì)材料表面裝飾用材的光致變色機(jī)理的研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2011年

5 郭東曉;四種苔類植物的化學(xué)成分及其生物活性[D];山東大學(xué);2011年

6 蘇宇杰;竹紅菌素的特性及應(yīng)用研究[D];江南大學(xué);2011年

7 太志剛;四種花卉的化學(xué)成分及其抗氧化活性研究[D];云南大學(xué);2011年

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9 王瑞;植物多酚對(duì)皮革中Cr(Ⅵ)的防治機(jī)理及防治作用研究[D];陜西科技大學(xué);2011年

10 賈韶千;銀杏抗氧化肽的制備、結(jié)構(gòu)鑒定及活性研究[D];南京林業(yè)大學(xué);2011年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 余洋;鹵制甲魚加工工藝及貯藏特性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 趙紅玲;液態(tài)奶評(píng)價(jià)方法及其體系穩(wěn)定性影響的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

4 李科瑋;17種青藏高原植物提取物抑菌作用的篩選及苔草甲醇提取物抑菌機(jī)理的研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

5 李文瑾;葡萄(vitis vinifera L.)化感物質(zhì)的鑒定及化感作用研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

6 姚順平;無機(jī)銅試劑誘導(dǎo)棉花抗黃萎病的研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

7 王榮;方便豆絲的研制[D];武漢工業(yè)學(xué)院;2010年

8 王宇;對(duì)食品添加劑安全問題的倫理思考[D];武漢理工大學(xué);2010年

9 趙娜;表面活性劑對(duì)飼用油乳化效果及肉雞生長(zhǎng)的影響[D];浙江工商大學(xué);2011年

10 應(yīng)巧玲;海鰻脫脂及抗氧化技術(shù)的研究[D];浙江工商大學(xué);2011年



本文編號(hào):231282

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