【摘要】：蜂蜜作為一種營養(yǎng)價(jià)值豐富、廣受人們歡迎的食品,由于生產(chǎn)周期長、產(chǎn)量低等原因常常供不應(yīng)求,加之蜂蜜成分復(fù)雜,使它成為食品摻假的一個(gè)主要對(duì)象,不法分子常通過各種摻假手段來對(duì)蜂蜜進(jìn)行造假,謀取利益。由于蜂蜜的主要成分為葡糖糖和果糖,目前蜂蜜摻假的常用手段是通過摻入廉價(jià)糖漿的方式制造摻假蜂蜜,現(xiàn)有的對(duì)蜂蜜摻假進(jìn)行鑒別的方法有:穩(wěn)定碳同位素比值分析法(SCIRA)、薄層色譜法(TLC)、脈沖電流檢測(cè)器的高效陰離子交換色譜法(HPAEC-PAD)、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)、高效液相色譜法(HPLC)、高效液相同位素質(zhì)譜儀聯(lián)用技術(shù)(HPLC-IRMS)、核磁共振技術(shù)(NMR)以及近紅外光譜技術(shù)(NIR)等,但是這些方法各有其缺陷,并且對(duì)于使用C3植物糖漿進(jìn)行摻假的摻假蜂蜜的鑒別難題并未突破。本研究采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)真蜂蜜(荊條蜜、洋槐蜜、棗花蜜)與摻假蜂蜜的代謝物進(jìn)行全面獲取與分析,并結(jié)合多元統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)真蜂蜜與摻假蜂蜜進(jìn)行區(qū)分,尋找真蜂蜜樣品的標(biāo)志性代謝物,實(shí)現(xiàn)對(duì)真假蜂蜜的鑒別。本研究在未來蜂蜜市場(chǎng)中對(duì)蜂蜜質(zhì)量的控制具有重大意義。本實(shí)驗(yàn)分為四部分,第一部分為基于代謝組學(xué)技術(shù)尋找真正蜂蜜的標(biāo)志性代謝物、第二部分為基于代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)真蜂蜜與糖漿摻假蜂蜜進(jìn)行區(qū)分、第三部分是基于代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)成熟蜜與未成熟蜜進(jìn)行區(qū)分、第四部分是基于代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)真蜂蜜與已知劣質(zhì)蜂蜜進(jìn)行區(qū)分。四部分實(shí)驗(yàn)對(duì)樣本原始數(shù)據(jù)的獲取均采用超高液相色譜串聯(lián)四級(jí)桿軌道離子阱高分辨質(zhì)譜(UHPLC-Q Exactive Obitrap LC-MS),上機(jī)檢測(cè)后的原始數(shù)據(jù)經(jīng)過Compounds Discoverer軟件對(duì)樣品進(jìn)行總離子流圖色譜峰的提取、峰對(duì)齊、未知物的檢測(cè)等差異性分析,通過多元統(tǒng)計(jì)分析實(shí)現(xiàn)對(duì)比較樣品組的區(qū)分,找到的可能的標(biāo)志性代謝物進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析尋找碎片離子,初步完成標(biāo)志性代謝物的定性工作。第一部分結(jié)果顯示:真正蜂蜜樣本荊條蜜、洋槐蜜、棗花蜜三種蜂蜜均能實(shí)現(xiàn)與各種蜂蜜摻假糖漿的區(qū)分,并通過分析找到了三種蜂蜜的各自的可能的標(biāo)志性代謝物并對(duì)其完成了初步定性。荊條蜜可能的標(biāo)志性代謝物有:苯丙氨酸、亮氨酸、泛酸、對(duì)香豆酸、肉桂酸、白楊素、酪氨酸,其中苯丙氨酸和泛酸是荊條蜜可能的特有的標(biāo)志物;洋槐蜜的可能的標(biāo)志性代謝物有:色氨酸、亮氨酸、酪氨酸、脯氨酸、視黃酸、對(duì)香豆酸、脫落酸、肉桂酸、白楊素,其中色氨酸、視黃酸和脫落酸是洋槐蜜可能特有的標(biāo)志性代謝物;棗花蜜可能的標(biāo)志性代謝物有:褪黑激素、N-乙酰羥色胺、亮氨酸、酪氨酸、脯氨酸、對(duì)香豆酸、肉桂酸、4-甲氧基肉桂酸、白楊素。其中褪黑激素、N-乙酰羥色胺、4-甲氧基肉桂酸是棗花蜜可能特有的標(biāo)志性代謝物。第二部分結(jié)果顯示:三種蜂蜜與糖漿摻假蜂蜜的區(qū)分效果明顯,在大米糖漿、玉米糖漿、甜菜糖漿、蜂蜜專用糖漿摻入1%比例的水平上,就能與三種真蜂蜜實(shí)現(xiàn)區(qū)分,說明本研究的代謝組學(xué)方法對(duì)糖漿摻假蜂蜜的檢測(cè)限能夠達(dá)到1%,且隨著摻入糖漿比例的增大,在PCA得分圖上糖漿摻假蜂蜜樣品組有距離真蜂蜜樣品組越來越遠(yuǎn)的趨勢(shì)。第三部分結(jié)果顯示:荊條蜜、洋槐蜜、棗花蜜三個(gè)品種的成熟蜜與未成熟蜜在PCA得分圖上在第一主成分上分離效果顯著,在最后第四部分對(duì)真蜂蜜與已知劣質(zhì)蜂蜜的鑒別試驗(yàn)中,本研究所用的代謝組學(xué)方法能夠?qū)崿F(xiàn)將真洋槐蜜與已知劣質(zhì)洋槐蜜的區(qū)分、真棗花蜜與已知劣質(zhì)棗花蜜的區(qū)分,并且將不同品種的已知劣質(zhì)蜜在與真荊條蜜、真洋槐蜜、真棗花蜜進(jìn)行統(tǒng)一比較時(shí),發(fā)現(xiàn)不同品種的已知劣質(zhì)蜜歸為一組,均能夠與三個(gè)品種的真蜂蜜實(shí)現(xiàn)分離。結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,本研究所用的代謝組學(xué)方法對(duì)蜂蜜摻假鑒別效果明顯,優(yōu)于現(xiàn)有的對(duì)蜂蜜摻假鑒別的其他檢測(cè)方法,不需要對(duì)某一或某些靶向物質(zhì)進(jìn)行定性定量測(cè)定,是一種宏觀非靶向的種類區(qū)分的方法。方便快捷,前處理方法比較簡單易于操作,上機(jī)處理后數(shù)據(jù)經(jīng)Compounds Discoverer軟件進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析建立PCA模型即可實(shí)現(xiàn)真蜂蜜與糖漿摻假蜂蜜的鑒別。
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【學(xué)位授予單位】：山東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S896.1;O657.63

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2291633