【摘要】：熒光探針及熒光生物成像技術近年來取得了迅猛發(fā)展,該技術可以對活體細胞和動物體內的微小物種進行熒光成像檢測。偶氮還原酶是生命體內一種重要的酶,腫瘤中的偶氮還原酶水平與缺氧程度密切相關,對偶氮還原酶水平的檢測可用于評價腫瘤的缺氧程度(腫瘤的缺氧程度是判斷其為良性或惡性的重要指標),因而,對偶氮還原酶水平的檢測具有重要意義。利用熒光探針及熒光生物成像技術對活體細胞及活體組織中的偶氮還原酶進行檢測,在生物醫(yī)學及臨床診斷學中具有重要的意義。本文設計合成了一種檢測偶氮還原酶的光物理性能優(yōu)良的熒光探針,并將該探針成功應用于活體細胞、秀麗線蟲和實驗小鼠腫瘤中的偶氮還原酶熒光成像研究。主要工作內容如下:一、我設計合成了3種苯并吡喃腈熒光團,研究了這些熒光團的光物理性質,發(fā)現(xiàn)熒光團C3在DMF PBS緩沖液(0.02 M,pH 7.4)(V/V=5:5)中的最大發(fā)射波長位于675 nm,達到了近紅外熒光發(fā)射區(qū)(650-900 nm)。二、我基于熒光團C3設計合成了2種新型的檢測偶氮還原酶的熒光探針S1和S2,研究了這2種熒光探針對偶氮還原酶的熒光識別和熒光成像性能,發(fā)現(xiàn)探針S1和S2均對偶氮還原酶表現(xiàn)出由紅色熒光到綠色熒光發(fā)射的光譜變化。我們選用光物理性能更為優(yōu)良的探針S1為主要研究對象,對探針S1與偶氮還原酶的作用機理及探針S1在生物熒光成像(細胞、秀麗線蟲和小鼠腫瘤組織)中的應用進行了研究,發(fā)現(xiàn)探針S1對偶氮還原酶具有良好的光譜響應和生物相容性,可成功檢測活體細胞和活體組織中的偶氮還原酶。
[Abstract]:In recent years, fluorescent probes and fluorescent imaging techniques have been developed rapidly, which can be used to detect small species in living cells and animals. Azoreductase is an important enzyme in human body. The level of azoreductase in tumor is closely related to the degree of hypoxia. The determination of azoreductase level can be used to evaluate the degree of anoxia of tumor (the degree of anoxia of tumor is an important index to judge whether it is benign or malignant), so it is important to detect the level of azoreductase. The detection of azoreductase in living cells and tissues by fluorescence probe and fluorescence biometric imaging is of great significance in biomedicine and clinical diagnosis. A photophysical fluorescent probe for the detection of azoreductase was designed and synthesized. The probe was successfully applied to the fluorescence imaging of azoreductase in living cells, nematodes and mice. The main work is as follows: 1. I have designed and synthesized three kinds of benzopyranonitrile fluorescent groups and studied their photophysical properties. It was found that the maximum emission wavelength of fluorescent group C3 in DMF PBS buffer solution (0.02 MN pH 7.4) (V/V=5:5) was at 675 nm, and reached the near infrared fluorescence emission region (650-900 nm). Secondly, I designed and synthesized two new fluorescent probes S1 and S2 for detecting azo reductase based on fluorescent group C3, and studied the fluorescence recognition and imaging properties of these two fluorescent probes for azoreductase. It was found that both S _ 1 and S _ 2 showed spectral changes from red fluorescence to green fluorescence emission for azo reductase. The mechanism of probe S1 and azoreductase and the application of probe S1 in biological fluorescence imaging (cell, nematode and mouse tumor tissue) were studied. It was found that the probe S1 had good spectral response and biocompatibility to azo reductase and could be successfully used to detect azo reductase in living cells and tissues.
【學位授予單位】：云南師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：O657.3

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