【摘要】：為研究大腸桿菌的高靈敏快速檢測方法,建立一種基于萘酰亞胺標(biāo)記的DNA探針和磁性四氧化三鐵氧化石墨烯分離的大腸桿菌O157:H7檢測方法。將標(biāo)記萘酰亞胺的ssDNA(單鏈DNA)作為捕獲探針吸附在磁性氧化石墨烯表面,當(dāng)目標(biāo)ssDNA存在時,捕獲探針與之部分雜交,利用磁場將目標(biāo)ssDNA捕獲并富集。然后加入釋放探針完成雜交,使標(biāo)記熒光的捕獲探針從磁性氧化石墨烯的表面釋放出來,通過測定溶液熒光強(qiáng)度可以實(shí)現(xiàn)大腸桿菌O157:H7的高靈敏檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:在一定條件下,O157:H7數(shù)量的對數(shù)值和熒光強(qiáng)度與空白值熒光強(qiáng)度的比值(F/F_0)呈線性關(guān)系,線性范圍為150~1.5×10~6個/m L,經(jīng)過富集后檢出限可達(dá)100個/m L。該方法靈敏度高,檢出限低,耗時較短,操作簡單,為致病菌的高靈敏檢測提供新思路。
[Abstract]:In order to study the highly sensitive and rapid detection method of Escherichia coli, a DNA probe based on naphthalimide and a O157:H7 method for the separation of magnetic graphene tetroxide were developed. SsDNA (single-stranded DNA) labeled with naphthalene imide was used as a trap probe to adsorb on the surface of magnetic graphene oxide. When the target ssDNA existed, the trap probe was hybridized with part of it, and the target ssDNA was captured and enriched by magnetic field. Then the labeled fluorescence capture probe was released from the surface of the magnetic graphene oxide by adding the release probe to complete the hybridization. The highly sensitive detection of Escherichia coli O157:H7 could be achieved by measuring the fluorescence intensity of the solution. The experimental results show that the logarithmic value of O 157: h 7 and the ratio of fluorescence intensity to blank fluorescence intensity (F/F_0) show a linear relationship under certain conditions. The linear range is 150 ~ 1.5 脳 10 ~ 6 / mL, and the detection limit can reach 100 / mL after enrichment. This method has the advantages of high sensitivity, low detection limit, short time consuming and simple operation, which provides a new method for the sensitive detection of pathogenic bacteria.
【作者單位】： 湖南大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院環(huán)境生物與控制教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(51541801)~~
【分類號】：O657.3

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳儉輝;劉程彬;王斕;桂建舟;楊鵬;;新型萘酰亞胺衍生物的合成[J];合成化學(xué);2013年05期

2 徐冬梅;任繩武;;1,8-萘酰亞胺分散染料的合成及性能研究[J];染料工業(yè);1992年03期

3 張鑒鋒,黃天寶,錢旭紅,王清春;硫代-1,8-萘酰亞胺的合成及表征[J];華東理工大學(xué)學(xué)報;1999年02期

4 黃淼;余亦華;陳群;徐敏;;可聚合萘酰亞胺類衍生物的合成及光譜研究[J];波譜學(xué)雜志;2009年04期

5 齊齊;哈涌泉;孫岳明;;1,8-萘酰亞胺衍生物的研究進(jìn)展[J];材料導(dǎo)報;2013年19期

6 梅文明;;1,8-萘酰亞胺衍生物的合成及應(yīng)用研究[J];中山大學(xué)研究生學(xué)刊(自然科學(xué)、醫(yī)學(xué)版);2002年01期

7 張業(yè);王凱;義祥輝;覃雯;王恒山;;超聲波輔助下合成一些1,8-萘酰亞胺衍生物[J];有機(jī)化學(xué);2011年04期

8 徐文連;蔣偉;;用于有機(jī)電致發(fā)光材料的萘酰亞胺類化合物的研究進(jìn)展[J];化工時刊;2008年09期

9 玄學(xué)民;白哲革;黨國棟;趙曉剛;周宏偉;陳春海;;一種可溶性聚萘酰亞胺的合成與性能[J];高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報;2009年10期

10 陳軍;陳婉容;董靈茜;王幸逸;戚林軍;金正能;;兩種新型萘酰亞胺衍生物的合成及表征[J];廣州化工;2013年09期

相關(guān)會議論文 前10條

1 李曉川;朱凱娟;姜文娟;李亞娟;;堿誘導(dǎo)的萘酰亞胺分子開關(guān)[A];河南省化學(xué)會2012年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2012年

2 李曉川;朱凱娟;姜文娟;李亞娟;;萘酰亞胺雙體的合成與光學(xué)性質(zhì)[A];河南省化學(xué)會2012年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2012年

3 馬金飛;徐括喜;李殿秀;袁保重;趙永德;;含雜環(huán)的萘酰亞胺衍生物的合成[A];河南省化學(xué)會2010年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2010年

4 李沖;Matthew P.Aldred;張國峰;龔文亮;朱明強(qiáng);;萘酰亞胺取代的二芳烯熒光分子開關(guān)的合成及性質(zhì)[A];中國化學(xué)會第28屆學(xué)術(shù)年會第11分會場摘要集[C];2012年

5 王世敏;;以萘酰亞胺為發(fā)色團(tuán)的聚合物的制備與性能研究[A];2007年全國高分子學(xué)術(shù)論文報告會論文摘要集（上冊）[C];2007年

6 呂敬松;周成合;;新穎的萘酰亞胺炔化物自組裝[A];全國第十六屆大環(huán)化學(xué)暨第八屆超分子化學(xué)學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2012年

7 張良;許勝杰;李勝輝;王書香;張金超;;新型吡唑基修飾萘酰亞胺衍生物的設(shè)計、合成及細(xì)胞毒性研究[A];中國化學(xué)會第29屆學(xué)術(shù)年會摘要集——第07分會：有機(jī)化學(xué)[C];2014年

8 郭祥峰;朱寶存;劉媛媛;張宇;賈麗華;錢旭紅;;4-(氮雜-15-冠-5)-1,8-萘酰亞胺熒光分子探針的合成及性能[A];中國化學(xué)會第四屆有機(jī)化學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2005年

9 付梅艷;肖義;;基于萘酰亞胺—方酸雙發(fā)色團(tuán)的熒光共振能量轉(zhuǎn)移體系[A];中國化學(xué)會第二十五屆學(xué)術(shù)年會論文摘要集（下冊）[C];2006年

10 齊齊;哈涌泉;蔣銀花;孫岳明;;新的萘酰亞胺類化合物的結(jié)構(gòu)和光譜學(xué)性質(zhì)的密度范函理論研究[A];中國化學(xué)會第26屆學(xué)術(shù)年會理論化學(xué)方法和應(yīng)用分會場論文集[C];2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 王艷;1,8-萘酰亞胺類熒光探針分子光物理過程的理論研究[D];中國科學(xué)院研究生院(武漢物理與數(shù)學(xué)研究所);2014年

2 金正能;活性自由基聚合法合成含1，8-萘酰亞胺官能團(tuán)的熒光聚合物[D];蘇州大學(xué);2008年

3 李鵬;含六元酰亞胺環(huán)結(jié)構(gòu)聚萘酰亞胺的合成及其性能研究[D];吉林大學(xué);2011年

4 馬國春;新型萘酰亞胺金屬離子熒光探針的設(shè)計、合成及性能研究[D];天津大學(xué);2007年

5 王玉霞;基于多胺修飾的萘酰亞胺、黃酮衍生物的合成及抗腫瘤活性評價[D];河南大學(xué);2013年

6 吳愛斌;新穎萘酰亞胺類抗腫瘤劑的設(shè)計合成與生物性能[D];華東理工大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張振宇;由1,8-萘酰亞胺和硫脲構(gòu)成的光譜探針研究[D];蘇州大學(xué);2015年

2 婁靜靜;萘酰亞胺類CN~-/F~-比色型化學(xué)探針的設(shè)計合成及性能研究[D];河南師范大學(xué);2015年

3 余磊;基于氨基酸的手性酰亞胺類金屬有機(jī)化合物的研究[D];寧波大學(xué);2015年

4 余穎昊;萘酰亞胺衍生物的合成及其對苦味酸的檢測和四苯乙烯類衍生物的合成[D];西北師范大學(xué);2015年

5 孫京府;具有聚集誘導(dǎo)熒光特性的樹形萘酰亞胺分子的合成及其熒光探針的應(yīng)用研究[D];東南大學(xué);2015年

6 許文迎;4-氨基-1,8-萘酰亞胺及其結(jié)構(gòu)類似物的合成研究[D];華僑大學(xué);2016年

7 戈超超;新型萘酰亞胺衍生物WYX56抗腫瘤作用及機(jī)制研究[D];河南大學(xué);2016年

8 陳成勇;萘酰亞胺—酰胺離子探針的設(shè)計合成及性質(zhì)研究[D];蘭州交通大學(xué);2016年

9 王少紅;基于萘酰亞胺類新型熒光染料的設(shè)計、合成及性能研究[D];河南師范大學(xué);2013年

10 施銳言;萘酰亞胺的氨基迫位效應(yīng)對熒光傳感性能影響[D];華東理工大學(xué);2015年

，

本文編號：2211238