發(fā)布時(shí)間：2018-07-15 19:23

【摘要】：黃曲霉毒素是一類(lèi)結(jié)構(gòu)相似的二氫呋喃香豆素代謝產(chǎn)物,它主要是由曲霉真菌如黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生,并污染谷類(lèi)作物如(玉米、花生和飼料),及其他產(chǎn)品(如杏仁、無(wú)花果和牛奶)。由于具有很強(qiáng)的毒性、致畸性和致突變性,1993年世界衛(wèi)生組織的癌癥研究機(jī)構(gòu)(WHO-IARC)將黃曲霉毒素B1(AFB1)劃定為1類(lèi)致癌物。為了保護(hù)人類(lèi)的健康,建立一個(gè)簡(jiǎn)單、靈敏、低成本的方法用于痕量黃曲霉毒素的檢測(cè)具有重要意義。本論文首先合成了一種對(duì)黃曲霉毒素具有高選擇性識(shí)別能力的分子印跡聚合物。采用溶膠凝膠表面分子印跡方法,以5,7-二甲氧基香豆素(DMC)為假模板,負(fù)載型離子液體為功能單體和載體,四乙氧基硅烷(TEOS)為交聯(lián)劑,合成了 DMC分子印跡聚合物。通過(guò)傅里葉紅外光譜(FT-IR)、掃描電鏡、吸附實(shí)驗(yàn)對(duì)分子印跡聚合物進(jìn)行了表征。可知印跡聚合物不僅成功合成,而且傳質(zhì)速率較快。其次,將分子印跡聚合物作為固相萃取柱的填充材料,與高效液相色譜聯(lián)用。在最優(yōu)條件下,黃曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的線性相關(guān)系數(shù)為R20.9937,方法檢出限(S/N=3)為0.03-0.09 μg L-1之間,RSD(n=9)9.7%。對(duì)分子印跡-固相萃取柱(MIP-SPE)進(jìn)行選擇性實(shí)驗(yàn),研究表明,此柱對(duì)黃曲霉毒素的選擇性吸附要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于赭曲霉毒素A和雜色曲霉毒素,6種黃曲霉毒素的競(jìng)爭(zhēng)吸附表明,此柱對(duì)黃曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的吸附要高于黃曲霉毒素M1、M2。最后,為了驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)所建立方法的實(shí)用性,對(duì)玉米、花生和飼料中的黃曲霉毒素進(jìn)行了加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,在低含量(10μg kg-1)時(shí),黃曲霉毒素B1的回收率為77.8%-106.4%(RSD7.7%),黃曲霉毒素B2的回收率為34.0%-98.9%(RSD9.3%),黃曲霉毒素G1的回收率為44.3%-89.8%(RSD7.3%),黃曲霉毒素G2的回收率為24.3%-63.6%(RSD8.9%)。與免疫親和柱相比,分子印跡-固相萃取柱中色譜圖中雜質(zhì)峰較少,對(duì)黃曲霉毒素B1具有較好的選擇性。由于樣品中黃曲霉毒素的種類(lèi)較多和毒性很強(qiáng),為充分利用分子印跡-固相萃取柱的優(yōu)勢(shì),可以用于食品中黃曲霉毒素(B_1、B_2、G_1、G_2)的檢測(cè)�？傮w考慮,分子印跡-固相萃取柱成本低,實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單,對(duì)黃曲霉毒素的分離富集效果較好。因此分子印跡-固相萃取柱對(duì)于食品中黃曲霉毒素(B_1、B_2、G_1、G_2)的檢測(cè)有一定的適用性。
[Abstract]:Aflatoxin is a similar class of dihydrofurancoumarin metabolites produced mainly by aspergillus fungi such as Aspergillus flavus and parasitic Aspergillus sp., and contaminates cereals such as (corn, peanuts and fodder), as well as other products such as almonds, Fig and milk Because of its strong toxicity, teratogenicity and mutagenicity, aflatoxin B1 (AFB1) was classified as a class 1 carcinogen by the World Health Organization's Cancer Research Institute (WHO-IARC) in 1993. In order to protect human health, it is important to establish a simple, sensitive and low-cost method for the detection of trace aflatoxin. In this paper, we first synthesized a molecularly imprinted polymer with high selective recognition ability for aflatoxin. DMC molecularly imprinted polymers were synthesized by using sol-gel surface molecular imprinting method using 5-dimethoxy-coumarin (DMC) as false template, supported ionic liquids as functional monomer and carrier, and tetraethoxysilane (TEOS) as crosslinking agent. The molecularly imprinted polymers were characterized by Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR), scanning electron microscopy and adsorption experiments. It can be seen that imprinted polymers are not only successfully synthesized, but also have a fast mass transfer rate. Secondly, the molecularly imprinted polymer was used as the filling material of solid phase extraction column and coupled with high performance liquid chromatography. Under the optimum conditions, the linear correlation coefficient of aflatoxin B _ (1) B _ (2) / T _ (2) G _ (2) was R20.9937, and the detection limit (S / N ~ (3) was 0.03-0.09 渭 g 路L ~ (-1), RSD (n ~ (9) = 9.7). The selective adsorption of aflatoxin on MIP-SPE column was studied. The results showed that the selective adsorption of aflatoxin was much higher than that of ochratoxin A and six aflatoxins. The adsorption of aflatoxin B _ (1) B _ (2) to aflatoxin B _ (1) C _ (2) was higher than that of aflatoxin M _ (1) / M _ (2). Finally, in order to verify the practicability of the method established in the experiment, the aflatoxin in corn, peanut and fodder was reclaimed. The results showed that at low content (10 渭 g kg-1), aflatoxin in corn, peanut and feed were recovered. The recoveries of aflatoxin B1, aflatoxin B2, aflatoxin G1 and aflatoxin G2 were 77.8% -106.4% (RSD 7.7%), 34.0-98.9% (RSD9.3%), 44.3% -89.8% (RSD7.3%) and 24.3-63.6% (RSD8.9%), respectively. Compared with the immuno-affinity column, the chromatogram of molecularly imprinted solid phase extraction column showed less impurity peaks and better selectivity for aflatoxin B1. In order to make full use of the advantages of molecularly imprinted solid phase extraction (SPE) column, aflatoxin can be used for the determination of aflatoxin in food. On the whole, the cost of molecularly imprinted solid phase extraction column is low, the experimental operation is simple, and the separation and enrichment of aflatoxin is better. Therefore, the molecularly imprinted solid phase extraction column can be used for the detection of aflatoxin in food.
【學(xué)位授予單位】：天津科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：TS207.4;O631.3

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本文編號(hào)：2125130