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脂質(zhì)體熒光探針檢測磷脂酶C的活性

發(fā)布時間:2018-06-05 17:16

  本文選題:熒光 + 脂質(zhì)體 ; 參考:《分析化學(xué)》2017年09期


【摘要】:建立了一種以熒光標(biāo)記脂質(zhì)體為探針檢測磷脂酶C(PLC)活性的新方法。此熒光探針是由二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)和麗絲胺羅丹明B標(biāo)記的熒光磷脂(Liss Rhod PE)通過自組裝形成有序的熒光標(biāo)記脂質(zhì)體,探針脂質(zhì)體中Liss Rhod PE由于相互之間距離靠近產(chǎn)生自猝滅效應(yīng),因而作為探針的脂質(zhì)體并不表現(xiàn)出熒光性質(zhì)。當(dāng)在此探針溶液中加入目標(biāo)物PLC,PLC可以水解切割標(biāo)記在磷脂酰基二位上的熒光團羅丹明,使其從脂質(zhì)體釋放到溶液中,導(dǎo)致自猝滅效應(yīng)的減弱,溶液熒光信號增強,以此實現(xiàn)對PLC活性的檢測。使用此探針檢測PLC活性,熒光強度的增加值與PLC濃度在5~300 U/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,檢出限為2 U/L(S/N=3)。此外,此探針還可用于PLC抑制劑的篩選。
[Abstract]:A new method was developed for the detection of phospholipase C (PLC) activity using fluorescent labeled liposomes as probe. The fluorescence probe was self-assembled by dipalmitylphosphatidylcholine (DPPC) and lipiodothylamine B labeled phospholipids (Liss Rhod PEE) to form an ordered fluorescent labeled liposome. The Liss Rhod PE in probe liposomes does not exhibit fluorescence properties because of the self-quenching effect due to the proximity of each other. When PLCX PLC was added to the probe solution, the fluorescence group Rhodamine labeled on the phosphatidyl bisite could be hydrolyzed and released from the liposome to the solution, which resulted in the weakening of the self-quenching effect and the enhancement of the fluorescence signal of the solution. In this way, the activity of PLC was detected. Using this probe to detect PLC activity, there is a good linear relationship between the increase of fluorescence intensity and the concentration of PLC in the range of 5U / 300 U / L, and the detection limit is 2 U / L / S / N ~ (3 +). In addition, the probe can be used to screen PLC inhibitors.
【作者單位】: 陜西師范大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(No.21175089)資助~~
【分類號】:O657.3;Q55

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本文編號:1982804

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