基于量子點(diǎn)標(biāo)記免疫分析技術(shù)建立火鍋底料中嗎啡檢測(cè)方法的研究
本文選題:嗎啡 + 量子點(diǎn)。 參考:《江蘇大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:調(diào)味料在我國(guó)源遠(yuǎn)流長(zhǎng)的飲食文化中扮演著重要的角色,然而,一些非法商家和餐飲店為吸引更多顧客獲取巨額利潤(rùn),在火鍋和烤禽類等調(diào)味湯料中添加罌粟殼、罌粟籽及其水浸物等非食品用違禁材料,罌粟殼中主要化學(xué)成分有:嗎啡、罌粟堿、可待因、蒂巴因、那可汀、及罌粟殼堿等30多種類型生物堿。嗎啡作為罌粟殼中最具代表性的特征生物堿,具有較強(qiáng)藥理和毒理活性。人體長(zhǎng)期接觸容易成癮,在身體和心理上產(chǎn)生嚴(yán)重的依賴性,我國(guó)明令禁止添加罌粟殼到食品中,罌粟殼被衛(wèi)生部列入了第一批17種可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑品種名單之中。為保證食品的安全性和消費(fèi)者的合法權(quán)益,構(gòu)建一種快速、靈敏、有效的檢測(cè)體系,對(duì)于消除餐桌飲食中不安全因素和規(guī)范食品添加劑的使用,具有十分重要的意義。本論文基于量子點(diǎn)標(biāo)記熒光免疫分析技術(shù),試圖建立快速檢測(cè)嗎啡的方法。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:1.制備嗎啡抗體,并借助間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)嗎啡。將人工合成的嗎啡半抗原與牛血清白蛋白偶聯(lián)形成完全抗原,并采取背部皮下多點(diǎn)注射法免疫新西蘭大耳白兔,經(jīng)純化血清制備高純度嗎啡抗體。采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)嗎啡,結(jié)果表明,嗎啡濃度在1.6×10-3-1 mg L-1范圍內(nèi)呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系,抑制率最高可達(dá)88.9%,半抑制濃度(IC50)為0.043 mg L-1,檢出限(IC15)為2×10-3 mg L-1。2.基于量子點(diǎn)標(biāo)記嗎啡抗體,建立檢測(cè)嗎啡的熒光免疫分析方法。利用帶羧基量子點(diǎn)CdSe/ZnS為熒光標(biāo)記物,以EDC/NHS為交聯(lián)劑,將量子點(diǎn)與嗎啡抗體生物共價(jià)偶聯(lián)成熒光標(biāo)記抗體,通過紫外熒光光譜、瓊脂糖凝膠電泳等技術(shù)表征,表明制備的熒光標(biāo)記抗體具有較好的熒光穩(wěn)定性,并建立針對(duì)嗎啡檢測(cè)的熒光免疫分析方法。結(jié)果表明,在最佳優(yōu)化條件下,測(cè)得嗎啡濃度在3.2×10-4-1 mg L-1范圍內(nèi)呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系。以火鍋底料中添加罌粟殼為實(shí)際樣品進(jìn)行加標(biāo)測(cè)定回收率實(shí)驗(yàn),以嗎啡為檢測(cè)指示物,所建立的熒光免疫分析法測(cè)定嗎啡的回收率在78.2%-87%之間,檢測(cè)結(jié)果與間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA、HPLC法檢測(cè)的結(jié)果均具有較好的一致性。3.以硝酸纖維素膜為固相載體,將量子點(diǎn)標(biāo)記抗體作為靶向物,建立一種基于膜載體滲濾式熒光免疫分析檢測(cè)技術(shù),結(jié)果表明,該技術(shù)的嗎啡最低檢測(cè)限為0.01 mg L-1。并驗(yàn)證游離嗎啡抗體與量子點(diǎn)均不會(huì)影響膜載體滲濾式熒光免疫分析方法對(duì)嗎啡的檢測(cè),同時(shí)采用該方法對(duì)火鍋底料添加罌粟殼的實(shí)際樣品進(jìn)行檢測(cè),采用HPLC法和間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法作為對(duì)照,檢測(cè)結(jié)果具有較好的一致性。適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)篩選非法添加罌粟殼的火鍋湯料。
[Abstract]:In order to ensure the safety of food and to regulate the use of food additives , it is very important to establish a rapid , sensitive and effective method for detecting morphine by coupling indirect competitive ELISA . The results show that the concentration of morphine is within 1.6 脳 10 - 3 - 1 mg L - 1 . The results show that the concentration of morphine is within the range of 1 . 6 脳 10 - 3 - 1 mg L - 1 . The results showed that the lowest detection limit of morphine was 0.01 mg 路 L - 1 . The results showed that the lowest detection limit of morphine was 0.01 mg 路 L - 1 . The results showed that the lowest detection limit of morphine was 0.01 mg 路 L - 1 .
【學(xué)位授予單位】:江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:O657.3;TS264
【參考文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前10條
1 王毅謙;陸慧媛;袁芳;徐恒;方云濤;沈偉健;于洋;;競(jìng)爭(zhēng)化學(xué)發(fā)光酶免疫測(cè)定技術(shù)檢測(cè)鹽酸克倫特羅[J];食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào);2016年11期
2 陳鳴;;罌粟殼的臨床應(yīng)用與管理現(xiàn)狀[J];中國(guó)藥房;2016年25期
3 王芬;;HPLC測(cè)定罌粟殼與罌粟籽中嗎啡的含量[J];海峽藥學(xué);2016年04期
4 高波;鄭冉;趙成愛;;水熱法快速合成綠色到近紅外發(fā)光CdTe量子點(diǎn)[J];分子科學(xué)學(xué)報(bào);2015年05期
5 劉洋;王思珍;孫成彪;黃燕霞;;量子點(diǎn)抗體偶聯(lián)研究進(jìn)展[J];內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2015年04期
6 薄惠;張強(qiáng);;應(yīng)用熒光顯微鏡技術(shù)篩選高表達(dá)布魯桿菌Omp31蛋白單克隆抗體的研究[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2015年11期
7 王麗萍;;時(shí)間分辨熒光免疫法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙型肝炎病毒感染血清學(xué)標(biāo)志物的對(duì)照探究[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2015年07期
8 張金艷;魏益華;廖且根;袁麗娟;羅林廣;;基于微波輻射法制備水溶性CdTe量子點(diǎn)及其表征研究[J];農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全;2015年02期
9 張秋艷;孫琳;李珍珍;潘玉瑾;王青;趙強(qiáng);;CdTe量子點(diǎn)DNA熒光納米探針的合成及表征[J];無機(jī)化學(xué)學(xué)報(bào);2015年03期
10 李曉峰;周明;龔愛華;張嚴(yán);楊青峰;;氮摻雜碳量子點(diǎn)的合成、表征及其在細(xì)胞成像中的應(yīng)用[J];材料科學(xué)與工程學(xué)報(bào);2015年01期
相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條
1 曾若生;新型Ⅱ-Ⅵ族量子點(diǎn)的合成、應(yīng)用及機(jī)理研究[D];湖南大學(xué);2010年
相關(guān)碩士學(xué)位論文 前6條
1 劉相明;水相CdTe量子點(diǎn)的合成及其光學(xué)性能研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2014年
2 杜海平;基于金磁微粒的化學(xué)發(fā)光免疫學(xué)檢測(cè)嗎啡方法的建立[D];西北大學(xué);2012年
3 趙秋香;基于CdTe、ZnS:Mn量子點(diǎn)的熒光免疫分析[D];湖南師范大學(xué);2012年
4 陳朔;CdTe分子熒光標(biāo)記生物分子作用的研究[D];黑龍江大學(xué);2010年
5 趙燕榮;基于電化學(xué)傳感器的嗎啡檢測(cè)方法研究[D];蘇州大學(xué);2009年
6 郝建玉;量子點(diǎn)的水溶性修飾及標(biāo)記朊蛋白[D];西南大學(xué);2009年
,本文編號(hào):1940607
本文鏈接:http://sikaile.net/kejilunwen/huaxue/1940607.html