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多肽在金納米粒子表面偶聯(lián)反應(yīng)效率研究

發(fā)布時間:2018-05-11 06:04

  本文選題:-(-二甲氨基丙基)--乙基碳二亞胺 + N-羥基琥珀酰亞胺; 參考:《分析化學(xué)》2017年05期


【摘要】:通過1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDC)與N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)活化反應(yīng)將多肽偶聯(lián)到金納米粒子表面,采用熒光光譜研究其形成的酰胺鍵的反應(yīng)偶聯(lián)效率?疾炝藢嶒灄l件,包括緩沖液的種類(HEPES、Tris-HCl、硼酸、PBS緩沖液)、pH值(pH 6.5~9.0)、緩沖液濃度(10,25,40和50 mmol/L)、NHS和EDC的濃度(NHS 0.2~1.0 mol/L,EDC 0.01~0.5 mol/L)及二者比例(0,0.5,1.0,2.0和2.5)、偶聯(lián)反應(yīng)時間(4,8,12,24和36 h)等對偶聯(lián)效率的影響,篩選出最佳實驗條件。實驗結(jié)果表明,25 mmol/L 4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)緩沖液(pH 7.0),NHS/EDC濃度為0.4 mol/L/0.2 mol/L和24 h的反應(yīng)時間為EDC-NHS活化反應(yīng)將多肽偶聯(lián)到金納米粒子上的最佳實驗條件。本研究結(jié)果可為相關(guān)研究提供技術(shù)參考。
[Abstract]:The polypeptide was coupled to the gold nanoparticles by the activation reaction of 1-oxy-3-dimethylamino-propyl-3-ethylcarbodiimide (EDCC) with N-hydroxysuccinimide (NHS). The coupling efficiency of the formed amide bonds was studied by fluorescence spectroscopy. The effects of the kinds of buffer (HEPES) Tris-HCl, the pH value of PBS buffer, the concentration of 10 mol / L ~ 2540 and 50 mmol 路L ~ (-1) and 50 mmol 路L ~ (-1 / L) on the coupling efficiency were investigated, including the ratio of 0.5 ~ (0.5) mol / L ~ (-1) and the ratio of 0 ~ (0.5) ~ 1.0 ~ (1.0) mol 路L ~ (-1) ~ (-1), and the coupling reaction time was (4 ~ 8 ~ 1224 and 36 h) respectively, and the effect of the concentration of the buffer solution on the coupling efficiency was also investigated, including the concentration of the buffer solution (HEPES), the pH value of the buffer, the concentration of the buffer solution, the concentration of NHS 0.2mol / L ~ (-1) and the concentration of the EDC, respectively. The best experimental conditions were screened out. The experimental results show that the optimal conditions for the coupling of polypeptides to gold nanoparticles by EDC-NHS activation reaction are as follows: the concentration of NHS / EDC is 0.4 mol/L/0.2 mol/L and the reaction time is 24 h in the buffer solution of 25 mmol/L 4-hydroxyethylpiperazine ethylenesulfonic acid (HEPES). The results of this study can provide a technical reference for related research.
【作者單位】: 天津科技大學(xué)食品營養(yǎng)與安全教育部重點實驗室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(No.21575102)資助~~
【分類號】:O621.25

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本文編號:1872720

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